中華絨螯蟹(Eriocheir sinensis),又稱河蟹,屬節(jié)肢動(dòng)物門甲殼綱,是我國的一種重要經(jīng)濟(jì)蟹類,因其營養(yǎng)豐富,味道鮮美,深受廣大消費(fèi)者的喜愛。但是,據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO,2014)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示,2012年中華絨螯蟹捕撈產(chǎn)量僅為6.13萬噸,遠(yuǎn)遠(yuǎn)無法滿足人們的需求。因此,規(guī)模化人工養(yǎng)殖中華絨螯蟹越來越受到人們的關(guān)注和重視。近年來,中華絨螯蟹養(yǎng)殖面積不斷擴(kuò)大,養(yǎng)殖集約化程度不斷提高,產(chǎn)量與之俱增。2013年,中華絨螯蟹養(yǎng)殖產(chǎn)量達(dá)到72.99萬噸,產(chǎn)值高達(dá)50.85億美元。然而,隨著養(yǎng)蟹業(yè)的迅速發(fā)展,高效配合飼料的開發(fā)已成為亟待解決的問題。迄今為止,有關(guān)中華絨螯蟹對(duì)蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物等宏量元素營養(yǎng)需求的研究較多,但對(duì)于微量元素維生素和礦物質(zhì)的研究則相對(duì)缺乏。本文報(bào)道了有關(guān)水溶性維生素葉酸以及葉酸和維生素B12的協(xié)同效應(yīng)對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、抗氧化和免疫功能的影響,并研究了亞硝酸鹽脅迫下補(bǔ)充葉酸對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、抗氧化和免疫功能的影響。研究結(jié)果豐富了蝦、蟹類的微量元素營養(yǎng)生理研究,并為科學(xué)配制中華絨螯蟹專用飼料提供了參考依據(jù)。1.飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、抗氧化和免疫機(jī)能的影響1.1飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、體成分及抗氧化能力的影響試驗(yàn)以酪蛋白和明膠為蛋白源,共配制了7種葉酸添加量的等氮等能飼料,分別為0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0和16.0mg/kg飼料(飼料中葉酸總水平分別為0.078、0.589、1.14、2.12、4.07、8.17和16.16 mg/kg),并增設(shè)一組不含葉酸和維生素B12的飼料組作為對(duì)照,投喂初始體重為(0.051±0.001 g)的中華絨螯蟹幼蟹8周,每組4個(gè)平行,每個(gè)平行40只幼蟹。結(jié)果表明：添加≥2.0 mg/kg葉酸的處理組,其幼蟹的增重率、特定生長率和飼料效率顯著高于其它處理組,且添加2.0-16.0 mg/kg葉酸的處理組之間不存在顯著差異；存活率在添加2.0 mg/kg葉酸處理組時(shí)達(dá)到最大值。飼料中葉酸水平顯著影響了中華絨螯蟹體粗蛋白和粗脂肪含量,但是對(duì)灰分和水分無顯著影響。隨著飼料葉酸水平升高,肝胰腺中葉酸含量、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶活性呈先上升后平穩(wěn)趨勢,而丙二醛的含量則一直呈下降趨勢。本研究表明：飼料中添加適量葉酸,可以提高中華絨螯蟹幼蟹的生長速度和抗氧化能力；以增重率和肝胰腺中葉酸含量為指標(biāo),進(jìn)行折線回歸分析得出,中華絨螯蟹幼蟹對(duì)葉酸的適宜需求量為2.29-2.52 mg/kg。1.2飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹免疫性能和抗病力的影響以不含葉酸和維生素B12的飼料組作為對(duì)照,研究了飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹血清酚氧化酶、溶菌酶、酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和血淋巴細(xì)胞密度,以及對(duì)嗜水氣單胞菌抵抗力的影響。結(jié)果表明：添加≥2.0 mg/kg葉酸的處理組,機(jī)體的酚氧化酶和血淋巴細(xì)胞密度顯著高于添加：≤1.0 mg/kg葉酸的處理組和對(duì)照組,且添加2.0-16.0 mg/kg葉酸處理組間不存在顯著差異；溶菌酶、酸性磷酸酶和堿性磷酸酶在添加2.0 mg/kg葉酸處理組時(shí)達(dá)到最大值,并且活力顯著高于對(duì)照組；用1.2 x 107 CFU/ml的嗜水氣單胞菌感染不同處理組幼蟹2周后,添加2.0 mg/kg葉酸處理組的累積死亡率最低。2.飼料中葉酸和維生素B12對(duì)中華絨螯蟹幼蟹的交互作用2.1中華絨螯蟹幼蟹對(duì)飼料中維生素Bl：的適宜需求量本試驗(yàn)旨在研究飼料中不同維生素B12水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、非特異性免疫力和抗病力的影響,以確定中華絨螯蟹幼蟹對(duì)維生素B12的適宜需求量。選取初始體重為(0.051±0.001g)的健康幼蟹,隨機(jī)分成8組,每組4個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)40只幼蟹,分別投喂不添加葉酸和維生素B12(VB12)的飼料(對(duì)照)以及維生素B12含量為0、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 mg/kg的8種飼料,養(yǎng)殖周期為8周。結(jié)果表明：添加0.2和0.4 mg/kg VB12的處理組,幼蟹的增重率和特定生長率顯著高于添加0.05.1.6 mg/kg VB12的處理組和對(duì)照組；飼料效率和存活率在添加0.2 mg/kg VB12處理組時(shí)達(dá)到最大值。添加0.2和0.4 mg/kg VB12處理組的超氧化物歧化酶活性和血淋巴細(xì)胞密度顯著高于添加0.05、1.6 mg/kg VB12處理組和對(duì)照組；血清酚氧化酶,酸性磷酸酶,堿性磷酸酶和溶菌酶活性在添加0.2 mg/kg VB12處理組時(shí)達(dá)到最大值,并顯著高于其他各處理組；累積死亡率在添加2.0 mg/kg VB12處理組時(shí)最低,并且顯著低于對(duì)照組。通過增重率和血淋巴細(xì)胞密度對(duì)飼料中維生素B12水平做折線回歸,求得中華絨螯蟹幼蟹對(duì)飼料中維生素B12的需求量為0.20-0.22 mg/kg。2.2飼料中葉酸和維生素B12對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、免疫性能和抗病力的影響本試驗(yàn)旨在研究葉酸和維生素B12(VB12)協(xié)同作用對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、非特異性免疫和抗病力的影響。選取初始體重為(2.57±0.03 g)的幼蟹600只,隨機(jī)分成4組,每組5個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)30只幼蟹,分別投喂對(duì)照組(不添加葉酸和VB12),單一VB12組(0.2 mg/kg VB12),單一葉酸組(2.3 mg/kg葉酸)和聯(lián)合處理組(0.2 mg/kg VB12+2.3 mg/kg葉酸)的飼料8周。養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,先統(tǒng)計(jì)成活率和稱重,然后從每個(gè)處理組隨機(jī)選取30只幼蟹,用2 × 108 CFU/ml的嗜水氣單胞菌注射攻毒2周。結(jié)果表明：幼蟹的增重率、特定生長率、飼料效率和存活率在聯(lián)合處理組最高,顯著高于對(duì)照組,但與單一葉酸或VB12組相比不存在顯著差異。聯(lián)合處理組的酚氧化酶活力顯著高于對(duì)照組,但與單一葉酸或VB12組也無顯著性差異。同時(shí),聯(lián)合處理組的酸性磷酸酶、堿性磷酸酶、溶菌酶活性和血淋巴細(xì)胞密度等指標(biāo)最高,其次是單一葉酸組和VB12組,而對(duì)照組最低。投喂聯(lián)合處理組飼料幼蟹的超氧化物歧化酶最高,而丙二醛含量和累積死亡率最低。以上結(jié)果表明,葉酸和VB12對(duì)幼蟹的生長、生理代謝和免疫性能均可能有互補(bǔ)和協(xié)同作用。3.亞硝酸鹽脅迫下飼料中補(bǔ)充葉酸對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、抗氧化和免疫性能的影響亞硝酸鹽毒性是水產(chǎn)動(dòng)物集約化養(yǎng)殖中的主要限制因素之一。本試驗(yàn)旨在研究飼料中添加葉酸對(duì)緩解亞硝酸鹽脅迫的作用。以酪蛋白和明膠為蛋白源,配制葉酸添加量為0、2.5和8.0 mg/kg(飼料中葉酸總水平分別為0.08、2.59和8.17 mg/kg)的三種等氮等能的飼料,各飼料處理組幼蟹分別暴露在三個(gè)亞硝酸鹽水平(0、0.2和2.0 mg/L)的養(yǎng)殖水體中,共形成9個(gè)實(shí)驗(yàn)處理組,每組4個(gè)平行,投喂初始體重為(0.14±0.02g)的中華絨螯蟹幼蟹8周。結(jié)果表明,與2.0 mg/L亞硝酸鹽處理組相比,0和0.2 mg/L亞硝酸鹽處理組幼蟹的增重率顯著升高。添加2.5和8.0 mg/kg葉酸處理組的飼料效率和成活率與不添加葉酸的處理組有顯著差異,并且幼蟹暴露于0 mg/L亞硝酸鹽處理組時(shí),其飼料效率和存活率要顯著高于2.0 mg/L亞硝酸鹽處理組。添加2.5和8.0 mg/kg葉酸處理組的肝胰腺超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性顯著高于不添加葉酸的處理組,并且其活性隨著養(yǎng)殖水體中亞硝酸鹽濃度的升高而降低。而丙二醛含量的趨勢正好與超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性的趨勢相反,即不添加葉酸處理組顯著高于添加葉酸的處理組,且2.0 mg/L亞硝酸鹽處理組最高。血清酚氧化酶和堿性磷酸酶活性在2.5和8.0 mg/kg葉酸處理組顯著高于不添加葉酸處理組,而血細(xì)胞總數(shù)、溶菌酶和酸性磷酸酶活性隨著飼料中葉酸添加量的增加而增加。此外,血細(xì)胞總數(shù)、酚氧化酶、溶菌酶和磷酸酶的活性隨之水體中亞硝酸鹽濃度的增加而降低。以上結(jié)果表明,飼料中添加葉酸可以有效地緩解亞硝酸鹽對(duì)中華絨螯蟹幼蟹的毒性,提高幼蟹的非特異性免疫力。
【學(xué)位單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：S966.16
【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    第一節(jié) 水產(chǎn)動(dòng)物的葉酸營養(yǎng)生理研究
    第二節(jié) 中華絨螯蟹的營養(yǎng)生理研究
    第三節(jié) 本研究的目的、意義和技術(shù)路線
第二章 飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、抗氧化和免疫性能的影響
    第一節(jié) 飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、體成分及抗氧化能力的影響
    第二節(jié) 飼料葉酸水平對(duì)中華絨螯蟹幼蟹的免疫性能和抗病力的影響
12對(duì)中華絨螯蟹幼蟹的交互作用'>第三章 飼料中葉酸和維生素B₁₂對(duì)中華絨螯蟹幼蟹的交互作用
12的適宜需求量'>    第一節(jié) 中華絨螯蟹幼蟹對(duì)飼料中維生素B₁₂的適宜需求量
12對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、免疫性能和抗病力的影響'>    第二節(jié) 飼料中葉酸和維生素B₁₂對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、免疫性能和抗病力的影響
第四章 亞硝酸鹽脅迫下飼料中補(bǔ)充葉酸對(duì)中華絨螯蟹幼蟹生長、抗氧化和免疫性能的影響
全文總結(jié)和展望
參考文獻(xiàn)
科研成果
致謝

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本文編號(hào)：2835297