隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)集約化的飛速發(fā)展,水產(chǎn)飼料業(yè)的魚粉供需矛盾日益加劇,以優(yōu)質(zhì)、廉價(jià)、來源廣泛的植物蛋白源替代魚粉是維持水產(chǎn)飼料業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的必然發(fā)展方向。魚類對(duì)植物蛋白利用率低,除了植物蛋白本身的限制性因素如蛋白質(zhì)不平衡、具有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子外,魚類本身在蛋白質(zhì)攝入、代謝及蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄調(diào)控中是否也存在偏好等問題仍不清楚。團(tuán)頭魴(Megalobrama amblycephala)是我國(guó)重要的大宗淡水養(yǎng)殖魚類之一,因此以團(tuán)頭魴為代表研究其對(duì)飼料蛋白源的利用及相關(guān)分子機(jī)制、腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義。本研究旨在分析團(tuán)頭魴對(duì)植物性飼料蛋白源菜粕、棉粕與動(dòng)物性蛋白源魚粉利用的差異,分析飼料中不同蛋白源對(duì)蛋白代謝調(diào)控通路TOR和AAR信號(hào)通路的影響,從蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄水平分析團(tuán)頭魴對(duì)飼料蛋白源利用的差異,從動(dòng)物體角度出發(fā)探求限制魚類對(duì)植物蛋白利用的因素;同時(shí),分析攝食不同蛋白源飼料后,團(tuán)頭魴腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)的變化,探討腸道微生態(tài)對(duì)飼料的適應(yīng)性,為提高水產(chǎn)動(dòng)物配合飼料中植物蛋白利用提供研究基礎(chǔ)和理論指導(dǎo)。本研究?jī)?nèi)容主要包括以下6個(gè)部分:1比較不同蛋白源對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)的影響本試驗(yàn)比較以魚粉(FM)、棉粕(CSM)、菜粕(CM)以及棉粕、菜粕分別添加賴氨酸和蛋氨酸(CSM+AA、CM+AA)為主要蛋白源的飼料對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)的影響,研究結(jié)果顯示:以棉粕和菜粕為主要蛋白源的飼料顯著降低團(tuán)頭魴的增重率(WGR)、特定增長(zhǎng)率(SGR)和蛋白質(zhì)效率(PER),顯著升高團(tuán)頭魴餌料系數(shù)(FCR),但是在棉粕和菜粕組飼料中添加賴氨酸和蛋氨酸后,其WGR、SGR和PER升高,FCR降低,且與FM組差異不顯著。在團(tuán)頭魴形體指標(biāo)方面,植物蛋白源CSM組和CM組肥滿度、臟體比和肝體比顯著低于FM組。各組間團(tuán)頭魴全魚體成分差異不顯著。不同蛋白源飼料對(duì)團(tuán)頭魴腸道蛋白酶和脂肪酶活性影響不顯著,但是在棉粕和菜粕組飼料中添加氨基酸可以提高其腸道淀粉酶活性。不同蛋白源飼料對(duì)血漿中谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和肝臟中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)及Y-谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶(γ-GT)活性影響不顯著,但CM組血漿ALT活性顯著高于FM組,而肝臟組織中CM+AA組AST活性顯著高于FM組。飼料蛋白源不顯著影響團(tuán)頭魴白細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白含量和血球容積,但是CSM組的紅細(xì)胞數(shù)顯著低于FM組。FM組團(tuán)頭魴血漿總蛋白含量顯著高于CSM+AA組,CSM組和CSM+AA組的尿素氮含量顯著高于其他三組,FM組的膽固醇含量顯著高于其他各組,CM+AA組葡萄糖含量顯著低于CSM+AA組,但是各組間甘油三酯含量差異不顯著。2不同蛋白源對(duì)腸道PepT1、TOR信號(hào)通路、AAR信號(hào)通路及腸道微生態(tài)的影響探討飼料中不同蛋白源對(duì)腸道PepT1、蛋白代謝調(diào)控通路TOR信號(hào)通路和AAR信號(hào)通路的影響,結(jié)果顯示:FM組腸道PepT1mRNA水平顯著低于其他各組。不同蛋白源飼料不影響團(tuán)頭魴腸道TOR、4E-BP2和S6K1基因表達(dá)水平,但是FM組AKT基因表達(dá)水平相較其他各組顯著降低。肝臟組織中,在棉粕、菜粕中添加氨基酸后,顯著上調(diào)TOR基因表達(dá)水平。與FM組相比,CM組和CSM組的IGF-1基因以及AKT基因mRNA表達(dá)水平顯著升高,而添加氨基酸后IGF-1基因以及AKT基因mRNA表達(dá)顯著下調(diào),與FM組差異不顯著。TOR信號(hào)通路中的下游調(diào)控基因中,S6K1基因的mRNA水平各組間差異不顯著,但是在棉粕、菜粕中添加氨基酸后,顯著下調(diào)4E-BP2的基因表達(dá)。腸道組織中,FM組的ATF4基因以及ASNS基因mRNA水平顯著低于其他各組,同時(shí)FM組的ATF3基因表達(dá)水平高于其他各組。在肝臟組織中,棉粕、菜粕組添加氨基酸后,顯著下調(diào)ATF4基因表達(dá)水平;CSM和CM組的ATF3和ASNS基因表達(dá)水平高于FM組、CSM+AA組和CM+AA組。團(tuán)頭魴飼料內(nèi)的不同蛋白源影響腸道微生物多樣性指數(shù)。腸道微生物相對(duì)豐度結(jié)果顯示團(tuán)頭魴腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群依次為梭桿菌科(Fusobacteriaceae)、氣單胞菌科(Aeromonadaceae)和黃桿菌科(Flavobacteriaceae)。攝食不同的蛋白源飼料,腸道微生物種類及其豐度存在巨大差異;但是CSM+AA組與CSM組、CM+AA組與CM組的OTU種類一致。3棉粕替代魚粉對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)的影響為了評(píng)估日糧中棉粕替代魚粉水平對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)影響,以棉粕分別替代0(CMO)、25%(CM25)、50%(CM50)、75%(CM75)和 100%(CM100)的魚粉蛋白水平,配置了 5組等氮(36%粗蛋白)等能(16 MJ/kg)的日糧,并添加了晶體賴氨酸和蛋氨酸以保持所有試驗(yàn)日糧中賴氨酸和蛋氨酸含量一致。結(jié)果顯示:棉粕替代魚粉水平對(duì)團(tuán)頭魴幼魚存活率無顯著影響;CSM75組和CSM100組的WGR和SGR顯著低于其他各組。CSM0組和CSM25組的FCR和攝食率顯著低于其他各組;而CSM0、CSM25和CSM50組的PER顯著高于其他兩組。棉粕替代魚粉水平不影響團(tuán)頭魴的肥滿度以及全魚體成分,但顯著影響團(tuán)頭魴臟體比、肝體比。棉粕替代魚粉水平不影響團(tuán)頭魴消化道蛋白酶活性、脂肪酶活性以及淀粉酶活性;對(duì)團(tuán)頭魴血漿及肝臟中ALT、AST以及γ-GT活性不產(chǎn)生顯著影響。各組間團(tuán)頭魴血液中紅細(xì)胞數(shù)量、血紅蛋白含量以及血球容積差異不顯著,但影響白細(xì)胞數(shù)量。棉粕替代魚粉水平不影響血漿總蛋白含量、膽固醇含量、甘油三酯含量以及葡萄糖含量,但影響血漿內(nèi)尿素氮含量。4棉粕替代魚粉對(duì)團(tuán)頭魴腸道PepT1、TOR信號(hào)通路、AAR信號(hào)通路及腸道微生態(tài)的影響隨著棉粕替代魚粉水平升高,團(tuán)頭魴腸道內(nèi)小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體PepT1 mRNA表達(dá)量顯著下降,CSM75組和CSM100組的PepT1水平顯著低于其他三組。CSM75組和CSM100組腸道TOR基因mRNA水平顯著低于其他三組;對(duì)照組和CSM25組團(tuán)頭魴腸道AKT基因mRNA水平顯著高于其他三組;CSM75組和CSM100組的腸道4E-BP2顯著低于CSM50組,而與其他兩組差異不顯著;CSM50組S6K1基因mRNA水平顯著高于其他各組。CSM100組肝臟TOR基因mRNA水平顯著低于對(duì)照組和CSM75組,與其他兩組差異不顯著;CSM75組和CSM100組的IGF-1基因的mRNA水平顯著高于CSM25組,而與其他兩組差異不顯著;棉粕替代魚粉水平對(duì)AKT基因及4E-BP2基因的表達(dá)水平不產(chǎn)生顯著影響;CSM75組的S6K1基因的mRNA水平顯著高于CSM25、CSM50和CSM100組,但是與對(duì)照組差異不顯著。CSM75組和CSM100組的ATF4基因和ATF3表達(dá)水平顯著高于其他三組;但是,棉粕替代魚粉水平對(duì)ASNS基因的表達(dá)水平影響不顯著。CSM100組團(tuán)頭魴肝臟中ATF4基因表達(dá)水平顯著高于CSM50組以外的其他三組;CSM50組團(tuán)頭魴肝臟中ATF3基因表達(dá)水平顯著高于CSM25組和CSM 100組;CSM 100組ASNS基因的mRNA水平顯著高于CSM0、CSM25和CSM50組。團(tuán)頭魴飼料中棉粕替代魚粉水平引起腸道微生物多樣性指數(shù)變化。腸道微生物相對(duì)豐度結(jié)果顯示:腸道內(nèi)優(yōu)勢(shì)菌為乳球菌(Lactococcus)、假單胞菌(Pseudomonas)和鯨桿菌(Cetobacterium),替代水平顯著影響腸道微生物豐度;但是棉粕替代魚粉水平對(duì)團(tuán)頭紡腸道微生物種類影響不明顯。5萊粕替代魚粉對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)的影響為了評(píng)估日糧中菜粕替代魚粉水平對(duì)團(tuán)頭魴生長(zhǎng)的影響,以菜粕分別替代0(CM0)、25%(CM25)、50%(CM50)、75%(CM75)和 100%(CM100)的魚粉蛋白水平,配置了 5組等氮(36%粗蛋白)等能(16 MJ/kg)的試驗(yàn)日糧,并添加了晶體賴氨酸和蛋氨酸以保持所有試驗(yàn)日糧中賴氨酸和蛋氨酸含量一致。結(jié)果顯示:日糧中菜粕替代魚粉水平不影響團(tuán)頭魴的存活率;但是隨著替代水平升高,WGR、SGR和PER顯著降低,FCR和攝食量同時(shí)升高,CM75組和CM100組的WGR、SGR和PER顯著低于其他三組,FCR和攝食量顯著高于其他三組,菜粕替代魚粉水平不影響團(tuán)頭魴的肥滿度、臟體比、肝體比以及全魚體成分。菜粕替代魚粉水平不影響團(tuán)頭魴消化道蛋白酶活性、脂肪酶活性以及淀粉酶活性;對(duì)血漿及肝臟中的ALT、AST以及γ-GT活性無顯著影響;不影響血液中血紅蛋白含量以及血球容積,但是影響白細(xì)胞數(shù)量和紅細(xì)胞數(shù)量。菜粕替代魚粉水平顯著影響團(tuán)頭魴血漿總蛋白含量、尿素氮含量、膽固醇含量和甘油三酯含量,但是各組間葡萄糖含量差異不顯著。6菜粕替代魚粉對(duì)腸道PepT1、TOR信號(hào)通路、AAR信號(hào)通路及腸道微生態(tài)的影響CM25組和CM50組團(tuán)頭魴腸道PepT1 mRNA水平顯著高于對(duì)照組和CM75組。日糧中菜粕替代魚粉水平顯著影響團(tuán)頭魴腸道和肝臟TOR信號(hào)通路,CM100組團(tuán)頭魴腸道TOR基因mRNA水平顯著低于對(duì)照組外的其他三組,并且CM25和CM50組的TOR基因表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組;菜粕替代魚粉水平不影響團(tuán)頭魴腸道中AKT基因表達(dá)水平;CM100組腸道4E-BP2 mRNA顯著低于對(duì)照組、CM25組和CM75組,同時(shí)CM50組顯著低于CM0組;CM0組和CM75組的腸道S6K1基因表達(dá)水平顯著高于CM50和CM100組。在肝臟組織中,CM100組TOR基因mRNA水平顯著低于對(duì)照組;CM100組IGF1基因表達(dá)水平顯著高于其他各組;CM75和CM100組的AKT基因水平顯著高于對(duì)照組和CM25組、CM50組;CM100組的4E-BP2顯著高于其他各組;而CM25組的S6K1 mRNA水平最高,顯著高于CM50組以外的其他各組。日糧中菜粕替代魚粉水平顯著影響團(tuán)頭魴腸道和肝臟組織AAR信號(hào)通路的基因表達(dá)。CM100組的腸道ATF4基因表達(dá)水平顯著高于其他各組;同時(shí),CM75組和CM100組的ATF3基因表達(dá)水平顯著高于其他三組;但是菜粕替代魚粉水平對(duì)腸道ASNS基因不產(chǎn)生顯著影響。在肝臟組織中,CM75組的ATF4基因表達(dá)水平顯著高于對(duì)照組和CM50組,而與CM25組和CM100組差異不顯著;同時(shí),CM75組和CM100組的ATF3基因表達(dá)水平顯著高于其他三組;但是菜粕替代魚粉水平對(duì)肝臟ASNS基因不產(chǎn)生顯著影響。菜粕替代魚粉水平影響團(tuán)頭魴腸道微生態(tài)群落多樣性以及腸道微生物相對(duì)豐度,但是對(duì)腸道微生物種類影響不明顯;團(tuán)頭魴腸道內(nèi)的優(yōu)勢(shì)菌群為鯨桿菌(Cetobacterium)和乳球菌(Lactococcus)。
【學(xué)位單位】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2016
【中圖分類】：S917.4
【部分圖文】：

第一章文獻(xiàn)綜述所需要的翻譯起始因子（Ｓｏｎｅｎｂｅｒｇａｎｄ邋Ｈｉｎｎｅｂｕｓｃｈ，邋２００９），翻譯開始的第ｍＲＮＡ邋５’端帽子結(jié)構(gòu)上裝配形成ｅＩＦ４Ｆ復(fù)合體（Ｍａｔｈｅｗｓ邋ｅｔ邋ａＵ邋２００７；邋Ｓｏｎｅｎｉｎｎｅｂｕｓｃｈ，邋２００９；邋Ｊａｃｋｓｏｎ邋ｅｔ邋ａｌ．，２０１０；邋Ｔｏｐｉｓｉｒｏｖｉｃ邋ｅｔ邋ａｌ．，２０１１）。ｅＩＦ４Ｆ邋復(fù)合體是構(gòu)連接的ｅＩＦ４Ｅ亞基、骨架蛋白ｅＩＦ４Ｇ以及ＲＮＡ解旋酶ｅＩＦ４Ａ組成（Ｇｉｎｇｒａ９９ｂ；邋Ｓｏｎｅｎｂｅｒｇ邋ａｎｄ邋Ｈｉｎｎｅｂｕｓｃｈ，邋２００９；邋Ｊａｃｋｓｏｎ邋ｅｔ邋ａｌ．，２０１０）。４Ｅ－ＢＰｓ邋是一個(gè)小制子，哺乳動(dòng)物中其家族包括４Ｅ－ＢＰ１，４Ｅ－ＢＰ２和４Ｅ－ＢＰ３，它通過與ｅＩＦ４到ｅＩＦ４Ｅ結(jié)構(gòu)上來阻止ｅＩＦ４Ｆ復(fù)合物的形成（Ｐａｕｓｅ邋ｅｔ邋ａｌ．，邋１９９４）。活化時(shí)，ＴＯ４Ｅ－ＢＰｓ的Ｔｈｒ３７、Ｔｈｒ４６、Ｓｅｒ６５和Ｔｈｒ７０位點(diǎn)，使其與ｅＩＦ４Ｅ結(jié)構(gòu)解離，４Ｆ邋復(fù)合體可以正常形成（Ｐａｕｓｅ邋ｅｔ邋ａｌ．，１９９４；邋Ｇｉｎｇｒａｓ邋ｅｔ邋ａｌ．，１９９９ａ，邋２００１邋）以完始過程。逡逑

棉粕和菜粕經(jīng)ＴＯＲ、ＡＡＲ信號(hào)通路調(diào)控團(tuán)頭魴生長(zhǎng)及腸道微生態(tài)的研究蛋白源的利用及相關(guān)分子機(jī)制、腸道微生態(tài)結(jié)構(gòu)具有重要的理論和現(xiàn)實(shí)意義析團(tuán)頭魴攝食不同蛋白源飼料后，蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄水平上與蛋白質(zhì)代謝調(diào)控相關(guān)水平的變化，探討動(dòng)物蛋白源與植物蛋白源在體內(nèi)利用時(shí)產(chǎn)生差異的機(jī)制，角度出發(fā)探求限制魚類對(duì)植物蛋白利用的因素，為提高水產(chǎn)動(dòng)物配合飼料中利用提供研宄基礎(chǔ)，為水產(chǎn)配合飼料配方過程中以植物蛋白替代魚粉、提高利用率提供理論指導(dǎo)，對(duì)實(shí)現(xiàn)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的健康快速可持續(xù)發(fā)展具有重要意主：逡逑

３．１對(duì)腸小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體ＰｅｐＴｌ表達(dá)的影響逡逑飼料蛋白源顯著影響腸道小肽轉(zhuǎn)運(yùn)載體的ｍＲＮＡ基因表達(dá)水平，ＦＭ組腸道逡逑ＰｅｐＴｌ邋ｍＲＮＡ水平顯著低于其他各組（Ｐ＜邋０．０５）（圖３－１）。逡逑？邐０．５邐－逡逑Ｅ邋０．４５邋－邐ｂ邐ｂ逡逑？｜邐°－４邐＇邐？邐Ｉ邐Ｔ邐ｂ逡逑Ｉ：邐Ｔ邐Ｔ逡逑４邐ｏ．１邐＿邐＿邐＿邐＿邐＿邐＿逡逑Ｊ０．０５邐■邋Ｉ逡逑ＦＭ邐ＣＳＭ邐ＣＭ邐ＣＳＭ＋ＡＡ邐ＣＭ＋ＡＡ逡逑試驗(yàn)日糧逡逑Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ邋ｄｉｅｔｓ逡逑圖３－１飼喂含不同蛋白源飼料后團(tuán)頭魴腸道ＰｅｐＴｌ邋ｍＲＮＡ基因表達(dá)水平。圖中值為平均值士標(biāo)準(zhǔn)逡逑誤（ｎ邋＝邋９），不同字母表示經(jīng)Ｄｕｎｃａｎ多重比較后差異顯著（Ｐ＜邋０．０５）。逡逑Ｆｉｇ．邋３－１邋Ｐｅｐｔｉｄｅ邋ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ邋１邋（ＰｅｐＴｌ）邋ｇｅｎｅ邋ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ邋ｏｆ邋ｂｌｕｎｔ邋ｓｎｏｕｔ邋ｂｒｅａｍ邋ｆｅｄ邋ｗｉｔｈ邋ｄｉｅｔｓ邋ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ逡逑ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｐｒｏｔｅｉｎ邋ｓｔｕｆｆ．邋Ｄａｔａ邋ａｒｅ邋ｍｅａｎｓ邋ｏｆ邋ｎｉｎｅ邋ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ；邋ｍｅａｎｓ邋ｗｉｔｈ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｌｅｔｔｅｒ邋ｄｉｆｆｅｒｓ逡逑ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ邋ｗｉｔｈ邋ｅａｃｈ邋ｏｔｈｅｒ邋｛Ｐ邋＜邋０．０５）．逡逑３．２腸道以及肝臟ＴＯＲ信號(hào)通路相關(guān)基因表達(dá)的影響逡逑團(tuán)頭魴攝食含不同蛋白源的飼料后，比較腸道ＴＯＲ通路相關(guān)基因（ＴＯＲ、ＡＫＴ、逡逑４Ｅ－ＢＰ２和Ｓ６Ｋ１）的ｍＲＮＡ表達(dá)水平（圖３－２）。結(jié)果顯示蛋白源飼料不影響腸道ＴＯＲ逡逑基因的表達(dá)水平

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5 唐凌;色氨酸對(duì)幼建鯉消化吸收能力和疾病抵抗能力及其組織器官中TOR表達(dá)影響研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

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7 熊方杰;擬南芥TOR信號(hào)通路調(diào)控植物光合自養(yǎng)生長(zhǎng)的分子機(jī)制[D];重慶大學(xué);2017年

8 宋云;棉花TOR信號(hào)途徑及其與JA信號(hào)途徑互作機(jī)理的研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2017年

9 鄧可宣;TOR信號(hào)通路在馬鈴薯生長(zhǎng)發(fā)育和根系再生過程中的功能研究[D];重慶大學(xué);2017年

10 馮琳;蘇氨酸對(duì)幼建鯉消化吸收能力和抗病力以及組織器官中蛋白質(zhì)調(diào)控信號(hào)分子TOR表達(dá)的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 周勇;基于TOR的匿名通信研究[D];西安電子科技大學(xué);2013年

2 王付剛;TOR匿名通信技術(shù)研究[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2010年

3 楊元原;一種混合的Tor匿名通信系統(tǒng)方案[D];西安電子科技大學(xué);2007年

4 鄭光;Tor匿名通信系統(tǒng)的安全性分析與研究[D];上海交通大學(xué);2011年

5 陳毅超;桔小實(shí)蠅人工飼料優(yōu)化及其對(duì)TOR基因表達(dá)的影響[D];中國(guó)計(jì)量學(xué)院;2013年

6 周挺;Tor匿名通信系統(tǒng)的測(cè)量與改進(jìn)[D];北京郵電大學(xué);2009年

7 孫姝娟;中國(guó)明對(duì)蝦（Fenneropenaeus chinensis）TOR基因的分子克隆及相關(guān)信號(hào)通路的初步研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2010年

8 張欽;基于傳感測(cè)量的TOR橡膠瀝青路面試驗(yàn)及有限元模擬[D];揚(yáng)州大學(xué);2012年

9 萬超;針對(duì)TOR的節(jié)點(diǎn)選擇攻擊技術(shù)研究[D];國(guó)防科學(xué)技術(shù)大學(xué);2009年

10 馬帥;日本血吸蟲TOR基因克隆表達(dá)及生物學(xué)功能研究[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2015年

本文編號(hào)：2828305