哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)是多種海水養(yǎng)殖動(dòng)物的主要致病菌,可以導(dǎo)致養(yǎng)殖動(dòng)物的皮膚、肌肉潰爛和內(nèi)臟壞死進(jìn)而使水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物大量死亡,造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失�？股乜捎行Х乐嗡a(chǎn)動(dòng)物細(xì)菌性疾病,然而長(zhǎng)期持續(xù)地或大劑量使用抗生素類藥物防治水產(chǎn)養(yǎng)殖動(dòng)物細(xì)菌性病害,會(huì)導(dǎo)致水產(chǎn)品藥物殘留、細(xì)菌耐藥性、環(huán)境污染等問題,如何安全高效地防治細(xì)菌疾病已成為水產(chǎn)動(dòng)物病害防控領(lǐng)域的一個(gè)重點(diǎn)。噬菌體(bacteriophage,phage)作為一種具有高效特異裂解性、專一宿主性、自我增殖能力強(qiáng)、給藥方式多、無藥物殘留、不形成耐藥性等優(yōu)點(diǎn)的產(chǎn)品,將成為替代抗生素用于水產(chǎn)動(dòng)物疾病防治的綠色產(chǎn)品之一。本論文旨在針對(duì)特定的海水養(yǎng)殖病原菌一哈維氏弧菌,分離不同的烈性噬菌體,通過研究噬菌體的生長(zhǎng)特性和生物學(xué)特征,探討利用噬菌體來防控水產(chǎn)動(dòng)物弧菌病的潛力。本試驗(yàn)從不同海區(qū)采集海水樣品,包括廈門環(huán)島近岸、東山島及寧德養(yǎng)殖海區(qū),利用雙層平板法分離哈維氏弧菌噬菌體,并采用透射電子顯微鏡觀察其形態(tài)特征。本實(shí)驗(yàn)共得到12株噬菌體純株(2株肌尾噬菌體、2株短尾噬菌體、8株長(zhǎng)尾噬菌體),其中短尾噬菌體在哈維氏弧菌噬菌體中鮮有發(fā)現(xiàn)。12株噬菌體的宿主范圍及一步生長(zhǎng)曲線檢測(cè)結(jié)果顯示,哈維氏弧菌噬菌體普遍具有高裂解性以及相對(duì)較窄的宿主范圍。之后,本文選取了 5株具有較高裂解能力的噬菌體,深入研究噬菌體在不同環(huán)境條件下(溫度、pH)的穩(wěn)定性,以探討噬菌體在實(shí)際環(huán)境中的應(yīng)用潛力。結(jié)果表明,5株噬菌體的溫度適應(yīng)性較低,在60℃條件下,噬菌體完全失去侵染裂解宿主細(xì)菌的能力;而對(duì)pH的適應(yīng)性較廣,在正常海水pH條件下噬菌體活性無改變,能夠耐受5-10以內(nèi)的酸堿性變化。不同環(huán)境條件穩(wěn)定性測(cè)試結(jié)果表明分離得到的噬菌體具備優(yōu)良的應(yīng)用潛能。綜上所述,本試驗(yàn)中通過分離得到12株哈維氏弧菌噬菌體,并篩選出裂解能力強(qiáng)、理化性質(zhì)穩(wěn)定的噬菌體,為噬菌體實(shí)際使用提供了基礎(chǔ)材料。同時(shí),綜合現(xiàn)有數(shù)據(jù)表明,其中短尾噬菌體具有一定的研究意義,可用于深入探究噬菌體與宿主之間的相互關(guān)系。
【學(xué)位單位】：廈門大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S941.42
【部分圖文】：

年的全國(guó)水產(chǎn)品總產(chǎn)量６９０１．２５萬噸，同比上一年增長(zhǎng)３．０１％，其中，水產(chǎn)養(yǎng)殖逡逑產(chǎn)量５１４２．３９萬噸（海水產(chǎn)品產(chǎn)量３４９０．１５萬噸，占總產(chǎn)量的５０．５７％，），占總產(chǎn)逡逑量的７４．５１％，捕撈產(chǎn)量１７５８．８６萬噸，占總產(chǎn)量的２５．４９％，（圖１－１）。目前，我逡逑國(guó)不僅是全球水產(chǎn)養(yǎng)殖產(chǎn)量第一大國(guó)，也是僅有的養(yǎng)殖產(chǎn)量超過捕撈產(chǎn)量的國(guó)家，逡逑水產(chǎn)養(yǎng)殖己成為主要的水產(chǎn)品來源。逡逑百萬噸逡逑７０邐欲逡逑：＊邋Ｉ邋１邋Ｌ邋ｔ逡逑２０１２邐２０１３邐２０１４邐２０１５邐２０１６逡逑々水產(chǎn)總產(chǎn)量？養(yǎng)殖總產(chǎn)量＊養(yǎng)殖魚類總產(chǎn)量逡逑圖１－１邋２０１２－２０１６年全國(guó)水產(chǎn)品產(chǎn)量及構(gòu)成（數(shù)據(jù)來源于農(nóng)業(yè)部漁業(yè)漁政管理局逡逑歷年的《中國(guó)漁業(yè)統(tǒng)計(jì)年鑒》）逡逑Ｆｉｇ．邋１－１邋Ｔｈｅ邋ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ邋ａｎｄ邋ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ邋ｏｆ邋ａｑｕａｔｉｃ邋ｐｒｏｄｕｃｔｓ邋ｉｎ邋ｏｕｒ邋ｃｏｕｎｔｒｙ邋ｆｒｏｍ逡逑２０１２邋ｔｏ邋２０１６邋（Ｔｈｅ邋ｄａｔａ邋ｆｒｏｍ邋Ｍｉｎｉｓｔｒｙ邋ｏｆ邋ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ邋ｆｉｓｈｅｒｙ邋ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ逡逑ｂｕｒｅａｕ，邋ｃａｌｅｎｄａｒ邋ｙｅａｒ邋ｏｆ邋Ｃｈｉｎａ邋ｆｉｓｈｅｒｙ邋ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ邋ｙｅａｒｂｏｏｋ）逡逑水產(chǎn)品是人類優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的重要來源，具有高蛋白質(zhì)、低脂肪、低熱量等優(yōu)逡逑點(diǎn)，可提供豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、微量元素（如鐵、鈣、鋅、碘和銅等）和脂逡逑１逡逑

在此狀態(tài)下，病毒處于休眠狀態(tài)，不進(jìn)行生物合成作用。但病毒一旦進(jìn)入宿逡逑主細(xì)胞內(nèi)，病毒通過控制宿主的代謝機(jī)制，開始自我復(fù)制。合成子代病毒顆粒，逡逑并釋放出來，開始新一輪的循環(huán)。逡逑病毒在環(huán)境中主要的存在方式是浮游在水體中，其分布廣泛，且多樣性豐富，逡逑目前對(duì)病毒的研究也主要集中在浮游病毒上（Ｂｒｕｍｅ／0／．，２０１５）。病毒是生態(tài)系逡逑統(tǒng)中個(gè)體最小，也是豐度最高，多樣性最為豐富的成員。表層海水中浮游病毒的逡逑豐度通常能達(dá)到ｌＯ７！＾１，在生產(chǎn)力高的近岸環(huán)境中，豐度可達(dá)到ｌＯ８�。。。。�，是逡逑細(xì)菌數(shù)量的邋５－２５邋倍（Ｓｕｔｔｌｅ，邋２００５；邋Ｗｅｉｔｚ邋ａｎｄ邋Ｗｉｌｈｅｌｍ，邋２０１４）。逡逑海洋病毒主要包括嗤菌體（Ｂａｃｔｅｒｉｏｐｈａｇｅ）和真核藻類病毒（Ｐｈｙｃｏｖｉｒｕｓ），逡逑此外，還有一些植物病毒、動(dòng)物病毒和真菌病毒等；其形態(tài)有蝌蚪狀、絲狀、桿逡逑狀、子彈狀、球狀、紡錘狀、六邊形和多邊形等。噬菌體是一類感染細(xì)菌、放線逡逑菌、螺旋體和真菌等微生物的病毒，由于水體環(huán)境中細(xì)菌的數(shù)量最多，因此水體逡逑環(huán)境中絕大多數(shù)病毒為嗤菌體（Ｓｕｔｔｌｅ，邋２００５；邋Ｒｏｈｗｅｒ邋ａｎｄ邋Ｔｈｕｒｂｅｒ，邋２００９）。逡逑

，，培養(yǎng)，觀察是否有噬菌斑出現(xiàn)。逡逑２．３結(jié)果與討論逡逑２．３．１噬菌體分離純化及鑒定逡逑廈門環(huán)島近岸、寧德養(yǎng)殖區(qū)、廈門東山島水域、福建平潭近岸、西太平洋這逡逑５個(gè)海水區(qū)域中篩選得到形態(tài)大小不盡相同的哈維氏弧菌噬菌斑，其形態(tài)可見圖逡逑２－１。＿菌體侵染后形成的嗤菌斑的大小不一，直徑最小為０．５邋ｍｍ左右，較大的逡逑直徑可達(dá)３邋ｍｍ左右。形成的噬菌斑的形態(tài)基本一致，中間透明，邊緣清晰，無逡逑暈環(huán)，噬菌體菌體特征見表２－３。經(jīng)過３次以上的純化過程，在平板上可以得到逡逑大小形態(tài)基一致的噬菌斑。經(jīng)連續(xù)３次以上對(duì)單獨(dú)的噬菌體進(jìn)行分離純化，共計(jì)逡逑得到１２株能夠侵染裂解哈維氏弧菌的烈性噬菌體。具體分離信息見表２－４。逡逑ＶＨＦＷＪ邐ＶＨＡ１邐ＶＨＣ２邋？邐ＶＨＤ１逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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1 高曉建;姚東瑞;孫晶晶;白雪松;~F一恒;張熒熒;畢可然;秦蕾;張曉君;;4株長(zhǎng)牡蠣(Crassostrea gigas)致病性哈維氏弧菌(Vibrio harveyi)鑒定及其毒力基因檢測(cè)[J];海洋湖沼通報(bào);2015年03期

2 楊生國(guó);;水產(chǎn)養(yǎng)殖用藥存在的問題與對(duì)策[J];黑龍江水產(chǎn);2015年02期

3 葛明峰;鄭曉葉;王國(guó)良;;大黃魚感染致病弧菌的檢測(cè)及其病害的預(yù)測(cè)預(yù)警[J];水產(chǎn)學(xué)報(bào);2014年12期

4 肖婧凡;王s

本文編號(hào)：2828177