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高產(chǎn)多糖葡萄藻的培養(yǎng)優(yōu)化及其體內(nèi)抑菌與體外水質(zhì)凈化作用研究

發(fā)布時間:2020-09-19 17:50
   傳統(tǒng)漁用飼料功能單一,營養(yǎng)不足,并且未被食用的飼料易造成微生物滋生及富營養(yǎng)化污染;與此同時,漁飼用抗生素產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性增加、藥物殘留、環(huán)境污染等弊端也日益成為食品安全中突出問題。而高產(chǎn)多糖微藻固定化形成的生物膠球營養(yǎng)豐富,具有較廣泛的體內(nèi)抑菌能力和體外的污水凈化能力,深入研究該種微藻生物膠球可以促進(jìn)餌料新資源開發(fā)的開發(fā)和利用,又可以探尋一條漁業(yè)疫病防控和養(yǎng)殖池污水處理的新道路。本實(shí)驗(yàn)首先對一株從工廠得到的微藻進(jìn)行了分離和純化;經(jīng)鑒定確認(rèn)其為葡萄藻(Botryococcus sp.),屬于綠藻門(Chlorophyta),共球藻綱(Treboux iophyceae),索囊藻目(C horicyst is);以此為基礎(chǔ),為了獲得一株高產(chǎn)多糖和高生物量的微藻,本文摸索得到了葡萄藻最佳生長和產(chǎn)糖條件為:BG11培養(yǎng)基,65μmol·m-2·s-1的光照強(qiáng)度,28℃的溫度,不加抗生素,此時:15d時葡萄藻的生物量能夠達(dá)到0.92 g/L(DW),總糖含量能夠達(dá)到32.7%,產(chǎn)糖量能夠達(dá)到0.30 g/L;與此同時,通過對葡萄糖磷酸異構(gòu)酶(GPI)和己糖激酶(HK)兩種酶酶學(xué)性質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn):其活性變化與微藻的總糖含量變化具有顯著相關(guān)性,為監(jiān)測微藻多糖合成的速率提供了酶活測定這一新指標(biāo);隨后,為驗(yàn)證藻體在魚體內(nèi)被消化崩解后釋放出的多糖的抑菌能力,本文通過堿提法提取得到了葡萄藻多糖,分析發(fā)現(xiàn)其由9種單糖組成;同時通過秀麗隱桿線蟲抑菌模型,驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)該多糖對沙門氏菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用,其IC50分別為3.75 mg/m L和1.04 mg/m L,從而證明葡萄藻作為飼料對魚體有一定的保健作用;然后,本實(shí)驗(yàn)制作了一種固定化的微藻膠球。為了驗(yàn)證其改善魚體周邊水環(huán)境和資源化吸收養(yǎng)殖水體中高營養(yǎng)物質(zhì)的能力,本文研究了該種膠球?qū)θ斯の鬯膬艋偷自氐奈绽眯Ч?通過與市售硝化細(xì)菌生化環(huán)的對比,發(fā)現(xiàn)其具有較強(qiáng)的污水處理能力,在0.75 g/L藻液濃度下,10 d后其對NO--N和PO--P的最終清除率分別達(dá)到了76.9%和89.6%。最后,考慮到膠球制作與漁業(yè)飼養(yǎng)之間時間與地域上的差異,研究了固定化膠球的短期儲存能力,獲得了其儲存的最佳條件是藻液濃縮2.5倍,藻液和海藻酸鈉溶液比例為:1:3,膠球大小為:2.2 mm;并且發(fā)現(xiàn)影響比增長率、儲存期生物量、儲存期多糖含量和儲存期葉綠素含量的三個因素中,濃縮倍數(shù)藻膠比例膠球直徑。
【學(xué)位單位】:中國計(jì)量學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2015
【中圖分類】:S963.213
【部分圖文】:

原理圖,污水處理,原理,體系


細(xì)菌可以降解污水中的有機(jī)廢物,是微藻光合作用的重要碳源和生長所必者可以降解污水中的無機(jī)物,同時通釋能夠分泌胞外多糖等有機(jī)物促進(jìn)細(xì)菌的系在污水處理中的原理如下圖所示:

微藻,純化培養(yǎng)


圖 2.3 微藻純化培養(yǎng)第三代及未純化的微藻1:被細(xì)菌污染的微藻;2:被真菌污染的微藻;3:經(jīng)三代劃線后已純化的微藻離心和抗生素處理能夠在去除雜菌的同時富集未污染藻株,大大提高

微藻,產(chǎn)物,基因組DNA,基因組


圖 2.4 微藻 PCR 產(chǎn)物及基因組 DNANA marker ; 1:ITS rDNA PCR 產(chǎn)物; 2: 18S rDNA PC微藻基因組 DNAR 產(chǎn)物測序結(jié)果經(jīng) NCBI 對比可以得到如下進(jìn)化

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前9條

1 許常虹;俞敏娟;;成油藻——布朗葡萄藻的研究[J];水生生物學(xué)報(bào);1988年01期

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3 吳夏芫;李環(huán);韋萍;;能源微藻——葡萄藻培養(yǎng)的研究進(jìn)展[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年20期

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6 孫凱峰;胡章喜;段舜山;;N、P營養(yǎng)鹽脅迫對兩株布朗葡萄藻生長的影響[J];水生生物學(xué)報(bào);2010年03期

7 胡章喜;安民;段舜山;徐寧;孫凱峰;劉曉娟;李愛芬;張成武;;不同氮源對布朗葡萄藻生長、總脂和總烴含量的影響[J];生態(tài)學(xué)報(bào);2009年06期

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相關(guān)會議論文 前1條

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相關(guān)博士學(xué)位論文 前3條

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相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

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3 胡章喜;兩株布朗葡萄藻的氮素營養(yǎng)生態(tài)位研究[D];暨南大學(xué);2007年

4 劉新穎;布朗葡萄藻(Botryococcus braunii)種質(zhì)分離、鑒定及誘變創(chuàng)新研究[D];浙江大學(xué);2013年

5 殷大聰;幾種主要理化因子對布朗葡萄藻(Botryococcus Braunii)光合作用的影響[D];中國科學(xué)院研究生院(武漢植物園);2007年

6 董文靜;利用富營養(yǎng)廢水培養(yǎng)能源微藻布朗葡萄藻的研究[D];河南師范大學(xué);2012年

7 熊爽;葡萄藻原生質(zhì)體制備與評價方法研究[D];華南理工大學(xué);2014年

8 孫凱峰;光照和株間混合比例對布朗葡萄藻群體生長的影響[D];暨南大學(xué);2009年



本文編號:2822825

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