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高產(chǎn)多糖葡萄藻的培養(yǎng)優(yōu)化及其體內(nèi)抑菌與體外水質(zhì)凈化作用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-09-19 17:50
   傳統(tǒng)漁用飼料功能單一,營(yíng)養(yǎng)不足,并且未被食用的飼料易造成微生物滋生及富營(yíng)養(yǎng)化污染;與此同時(shí),漁飼用抗生素產(chǎn)生細(xì)菌耐藥性增加、藥物殘留、環(huán)境污染等弊端也日益成為食品安全中突出問(wèn)題。而高產(chǎn)多糖微藻固定化形成的生物膠球營(yíng)養(yǎng)豐富,具有較廣泛的體內(nèi)抑菌能力和體外的污水凈化能力,深入研究該種微藻生物膠球可以促進(jìn)餌料新資源開(kāi)發(fā)的開(kāi)發(fā)和利用,又可以探尋一條漁業(yè)疫病防控和養(yǎng)殖池污水處理的新道路。本實(shí)驗(yàn)首先對(duì)一株從工廠得到的微藻進(jìn)行了分離和純化;經(jīng)鑒定確認(rèn)其為葡萄藻(Botryococcus sp.),屬于綠藻門(mén)(Chlorophyta),共球藻綱(Treboux iophyceae),索囊藻目(C horicyst is);以此為基礎(chǔ),為了獲得一株高產(chǎn)多糖和高生物量的微藻,本文摸索得到了葡萄藻最佳生長(zhǎng)和產(chǎn)糖條件為:BG11培養(yǎng)基,65μmol·m-2·s-1的光照強(qiáng)度,28℃的溫度,不加抗生素,此時(shí):15d時(shí)葡萄藻的生物量能夠達(dá)到0.92 g/L(DW),總糖含量能夠達(dá)到32.7%,產(chǎn)糖量能夠達(dá)到0.30 g/L;與此同時(shí),通過(guò)對(duì)葡萄糖磷酸異構(gòu)酶(GPI)和己糖激酶(HK)兩種酶酶學(xué)性質(zhì)的研究發(fā)現(xiàn):其活性變化與微藻的總糖含量變化具有顯著相關(guān)性,為監(jiān)測(cè)微藻多糖合成的速率提供了酶活測(cè)定這一新指標(biāo);隨后,為驗(yàn)證藻體在魚(yú)體內(nèi)被消化崩解后釋放出的多糖的抑菌能力,本文通過(guò)堿提法提取得到了葡萄藻多糖,分析發(fā)現(xiàn)其由9種單糖組成;同時(shí)通過(guò)秀麗隱桿線蟲(chóng)抑菌模型,驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)該多糖對(duì)沙門(mén)氏菌和金黃色葡萄球菌均有抑制作用,其IC50分別為3.75 mg/m L和1.04 mg/m L,從而證明葡萄藻作為飼料對(duì)魚(yú)體有一定的保健作用;然后,本實(shí)驗(yàn)制作了一種固定化的微藻膠球。為了驗(yàn)證其改善魚(yú)體周邊水環(huán)境和資源化吸收養(yǎng)殖水體中高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力,本文研究了該種膠球?qū)θ斯の鬯膬艋偷自氐奈绽眯Ч?通過(guò)與市售硝化細(xì)菌生化環(huán)的對(duì)比,發(fā)現(xiàn)其具有較強(qiáng)的污水處理能力,在0.75 g/L藻液濃度下,10 d后其對(duì)NO--N和PO--P的最終清除率分別達(dá)到了76.9%和89.6%。最后,考慮到膠球制作與漁業(yè)飼養(yǎng)之間時(shí)間與地域上的差異,研究了固定化膠球的短期儲(chǔ)存能力,獲得了其儲(chǔ)存的最佳條件是藻液濃縮2.5倍,藻液和海藻酸鈉溶液比例為:1:3,膠球大小為:2.2 mm;并且發(fā)現(xiàn)影響比增長(zhǎng)率、儲(chǔ)存期生物量、儲(chǔ)存期多糖含量和儲(chǔ)存期葉綠素含量的三個(gè)因素中,濃縮倍數(shù)藻膠比例膠球直徑。
【學(xué)位單位】:中國(guó)計(jì)量學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2015
【中圖分類(lèi)】:S963.213
【部分圖文】:

原理圖,污水處理,原理,體系


細(xì)菌可以降解污水中的有機(jī)廢物,是微藻光合作用的重要碳源和生長(zhǎng)所必者可以降解污水中的無(wú)機(jī)物,同時(shí)通釋能夠分泌胞外多糖等有機(jī)物促進(jìn)細(xì)菌的系在污水處理中的原理如下圖所示:

微藻,純化培養(yǎng)


圖 2.3 微藻純化培養(yǎng)第三代及未純化的微藻1:被細(xì)菌污染的微藻;2:被真菌污染的微藻;3:經(jīng)三代劃線后已純化的微藻離心和抗生素處理能夠在去除雜菌的同時(shí)富集未污染藻株,大大提高

微藻,產(chǎn)物,基因組DNA,基因組


圖 2.4 微藻 PCR 產(chǎn)物及基因組 DNANA marker ; 1:ITS rDNA PCR 產(chǎn)物; 2: 18S rDNA PC微藻基因組 DNAR 產(chǎn)物測(cè)序結(jié)果經(jīng) NCBI 對(duì)比可以得到如下進(jìn)化

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8 孫凱峰;光照和株間混合比例對(duì)布朗葡萄藻群體生長(zhǎng)的影響[D];暨南大學(xué);2009年



本文編號(hào):2822825

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