發(fā)布時(shí)間：2020-07-18 15:00

【摘要】：本研究以匙吻鱘仔、稚魚為研究材料,綜合發(fā)育生物學(xué)、酶學(xué)和分子生物學(xué)等研究方法探究了匙吻鱘仔、稚魚生長(zhǎng)規(guī)律、抗氧化能力及維生素C對(duì)亞硝酸鹽脅迫下匙吻鱘仔魚非特異性免疫、抗氧化能力及HSP70基因的表達(dá)影響。主要結(jié)果如下:1、研究了匙吻鱘仔、稚魚的生長(zhǎng)規(guī)律。結(jié)果顯示:(1)仔魚發(fā)育時(shí)期(3~10d),全長(zhǎng)、體質(zhì)量與日齡分別呈線性和指數(shù)相關(guān),生長(zhǎng)方程分別為:L=0.179t+9.271,R~2=0.948、W=0.007e~(0.028t),R~2=0.889;(2)體質(zhì)量相對(duì)全長(zhǎng)生長(zhǎng)方程為:W=6.3004L ~(2.041),R~2=0.814;(3)全長(zhǎng)、體質(zhì)量的特定生長(zhǎng)率在3~6日齡為11.28%、13.52%,7~10日齡為5.51%、20.80%;(4)在頭部器官中,口寬、吻長(zhǎng)均為正異速生長(zhǎng),眼徑為等速生長(zhǎng)。(5)稚魚發(fā)育時(shí)期,全長(zhǎng)、體質(zhì)量隨日齡的變化均呈指數(shù)函數(shù)關(guān)系,生長(zhǎng)方程分別為:L=8.923e~(0.061t),R~2=0.977、W=0.003e~(0.178t),R~2=0.975;(6)體質(zhì)量相對(duì)全長(zhǎng)生長(zhǎng)方程為:W=5.219x10~-66 L~(2.926),R~2=0.989;(7)12~55日齡稚魚全長(zhǎng)、體質(zhì)量的特定生長(zhǎng)率為5.71%、15.99%。結(jié)果表明:(1)仔魚出膜生長(zhǎng)到3日齡,眼睛已發(fā)育較為完善;(2)匙吻鱘仔魚體質(zhì)量相對(duì)于全長(zhǎng)不均勻生長(zhǎng),稚魚體質(zhì)量相對(duì)于全長(zhǎng)均勻生長(zhǎng)。2、研究了匙吻鱘仔、稚魚的抗氧化能力變化。結(jié)果顯示:(1)仔魚在內(nèi)源營養(yǎng)期(3~6d)均含有T-SOD和CAT,其活性隨發(fā)育時(shí)間延長(zhǎng)均顯著升高(P0.05),在內(nèi)源營養(yǎng)期結(jié)束之前出現(xiàn)最大值。(2)仔魚發(fā)育到混合營養(yǎng)期(7~10d),CAT在7日齡出現(xiàn)最低值,之后出現(xiàn)上升現(xiàn)象。(3)仔魚發(fā)育時(shí)期,T-AOC逐漸升高,直至卵黃囊消失前出現(xiàn)下降,但差異不顯著(P0.05);MDA含量逐漸降低,直至卵黃囊消失前顯著升高(P0.05)。(4)稚魚發(fā)育階段(12~55d),T-SOD逐漸升高,發(fā)育到55日齡時(shí)出現(xiàn)最大值(19.96±0.05)U/gprot;CAT出現(xiàn)“波浪形”變化趨勢(shì),發(fā)育到55日齡時(shí)出現(xiàn)最低值(1.39±0.10)U/gprot。(5)稚魚期,T-AOC在35日齡出現(xiàn)最大值(0.525±0.03)U/gprot,之后出現(xiàn)顯著下降(P0.05),MDA含量在35日齡出現(xiàn)最小值(0.340±0.01)U/gprot,之后出現(xiàn)顯著升高(P0.05)。(6)稚魚期,T-AOC、氧化損傷整體均高于仔魚期。(7)隨仔稚魚的不斷發(fā)育,AKP和ACP均在35日齡出現(xiàn)最大值,且仔稚魚AKP活力總體水平高于ACP。結(jié)果表明:(1)匙吻鱘仔魚發(fā)育時(shí)期,在開口攝食前后,由不同種類的抗氧化酶發(fā)揮抗氧化作用來增強(qiáng)抗氧化能力;(2)稚魚發(fā)育期主要以超氧化物歧化酶來增強(qiáng)抗氧化能力,減輕機(jī)體的氧化損傷。3、研究了維生素C對(duì)亞硝酸鹽脅迫下匙吻鱘仔魚非特異性免疫、抗氧化能力的影響。結(jié)果顯示:(1)仔魚的內(nèi)源營養(yǎng)期,LZM、AKP、ACP隨Vc濃度的增加呈現(xiàn)升高現(xiàn)象,且90mg/L、120mg/L Vc組顯著高于對(duì)照組和脅迫組(P0.05);仔魚的混合營養(yǎng)期,LZM、AKP、ACP隨Vc濃度的增加呈現(xiàn)“升高-降低”現(xiàn)象。(2)仔魚從內(nèi)源營養(yǎng)期發(fā)育到混合營養(yǎng)期,90mg/L Vc組LZM、AKP、ACP顯著上升(P0.05),上升率分別為71.8%、51.9%、48.4%;(3)仔魚的內(nèi)源及混合營養(yǎng)期,T-SOD和T-AOC隨Vc濃度的增加逐漸升高,且120mg/LVc添加組顯著高于脅迫組(P0.05);而CAT是對(duì)照組顯著高于脅迫組和Vc添加組(P0.05),Vc添加組CAT活性雖高于脅迫組,但差異不顯著(P0.05);(4)仔魚的內(nèi)源及混合營養(yǎng)期,MDA含量隨Vc濃度的增加呈現(xiàn)降低現(xiàn)象,且顯著低于脅迫組(P0.05)。結(jié)果表明:(1)亞硝酸鹽脅迫下,90mg/L Vc浸泡對(duì)匙吻鱘仔魚不同發(fā)育時(shí)期保護(hù)效果較好;(2)亞硝酸鹽脅迫可導(dǎo)致匙吻鱘仔魚不同發(fā)育時(shí)期的氧化損傷及抗氧化能力的不平衡,不同濃度Vc浸泡可以在一定程度上緩解亞硝酸鹽脅迫的負(fù)面影響。4、研究了維生素C對(duì)亞硝酸鹽脅迫下匙吻鱘仔魚HSP70基因表達(dá)影響。結(jié)果顯示:亞硝酸鹽脅迫下,仔魚不同發(fā)育時(shí)期HSP70 mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著高于對(duì)照組和Vc添加組(P0.05),但隨Vc濃度的逐漸增加,HSP70 mRNA相對(duì)表達(dá)量逐漸下降,且在120mg/LVc添加組恢復(fù)到正常表達(dá)水平。結(jié)果表明:亞硝酸鹽脅迫可以誘導(dǎo)仔魚HSP70 mRNA相對(duì)表達(dá),從而保護(hù)受損細(xì)胞或修復(fù)損傷細(xì)胞。Vc可以降低脅迫條件下匙吻鱘仔魚HSP70 mRNA相對(duì)表達(dá),從而提高機(jī)體的抗脅迫能力。
【學(xué)位授予單位】：貴州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S917.4
【圖文】：

動(dòng)物的氧化損傷，只有在理化因子發(fā)生改變引起水產(chǎn)動(dòng)物應(yīng)激時(shí)才會(huì)引起氧傷。水環(huán)境中，亞硝酸鹽為主要脅迫因子之一，相關(guān)研究表明，亞硝酸鹽濃改變均會(huì)改變水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)抗氧化酶的活性以及對(duì)酶基因的表達(dá)產(chǎn)生影響，引起一定的氧化損害（譚樹華，2005；Kroupova H 等，2005；洪美玲，200omano et al，2007；高明輝，2008；陳家長(zhǎng)等，2012）。.3 亞硝酸鹽對(duì)魚類的影響研究.3.1 亞硝酸鹽的產(chǎn)生近年來，水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展極其迅速，雖帶來了顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益高密度精養(yǎng)和環(huán)境惡化使水生動(dòng)物遭受的環(huán)境脅迫日益嚴(yán)重。亞硝酸鹽是細(xì)化作用和生態(tài)系統(tǒng)中脫氮作用過程的中間產(chǎn)物，如圖 1-1。通常情況下，生統(tǒng)中細(xì)菌硝化作用和反硝化作用是一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡，但隨水環(huán)境受各因素的污，這種平衡很容易被打破，從而使水環(huán)境中亞硝酸鹽含量升高。

圖 2-1 匙吻鱘仔魚全長(zhǎng)、體質(zhì)量與日齡的關(guān)系Fig 2-1 the relation etween weight, total length and day age of larvae Polyodon spathula圖 2-2 匙吻鱘仔魚全長(zhǎng)與體質(zhì)量函數(shù)關(guān)系Fig 2-2 the function relation etween weight and total length of larvae Polyodon spathula

22圖 2-2 匙吻鱘仔魚全長(zhǎng)與體質(zhì)量函數(shù)關(guān)系Fig 2-2 the function relation etween weight and total length of larvae Polyodon spathula鱘仔魚頭部器官與全長(zhǎng)生長(zhǎng)的關(guān)系鱘仔魚頭部器官與全長(zhǎng)的生長(zhǎng)關(guān)系見圖 2-3、2-4、2-5 和 2-6。吻長(zhǎng)(圖寬(圖 2-4)、眼徑(圖 2-5)和眼間距(圖 2-6)的異速生長(zhǎng)指數(shù)分別為 1.782.990 和 1.439�？趯�、吻長(zhǎng)和眼間距異速生長(zhǎng)指數(shù)與 1 之間均具有顯著<0.05)，表現(xiàn)出快速生長(zhǎng)，眼徑異速生長(zhǎng)指數(shù)與 1 之間差異不顯著），表現(xiàn)為等速生長(zhǎng)，但均沒有出現(xiàn)生長(zhǎng)拐點(diǎn)。

【參考文獻(xiàn)】

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