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大菱鲆溶藻弧菌噬菌體制劑制備及其應用效果評價

發(fā)布時間:2020-07-05 21:01
【摘要】:大菱鲆(Scophthalmus maximus L)是我國北方沿海地區(qū)主要養(yǎng)殖的經(jīng)濟名貴魚類,具有極高的營養(yǎng)價值和商業(yè)價值。但隨著大菱鲆養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的日益發(fā)展,以弧菌為病原菌的細菌性病害也越來越嚴重,且此病一旦發(fā)生,病魚死亡率可高達15%以上。噬菌體這種天然抑菌劑綠色、安全、環(huán)保,相對于傳統(tǒng)的抗生素藥物具有不引發(fā)耐藥性、不殘留、對環(huán)境無污染等優(yōu)點。本研究以溶藻弧菌噬菌體PVA1為主要研究對象,考察其治療效果和安全性,并研制出一種可常溫保存的溶藻弧菌噬菌體制劑,同時對其應用效果進行評價。主要工作內(nèi)容如下:(1)驗證了溶藻弧菌對大菱鲆的致病性,并對由溶藻弧菌引起的大菱鲆弧菌病的治療效果進行考察,結(jié)果顯示:溶藻弧菌浸浴攻毒半數(shù)致死量為7.85′10~6 CFU/mL,腹腔攻毒半數(shù)致死量為1.52′10~6 CFU/g;浸浴攻毒治療時MOI≈10即濃度為2.66′10~7PFU/mL為最佳治療濃度;腹腔注射攻毒治療結(jié)果為MOI≈10實驗組治療效果明顯。(2)溶藻弧菌噬菌體PVA1急、亞慢性腹腔攻毒實驗結(jié)果顯示,急性腹腔注射攻毒中100倍治療濃度的溶藻弧菌噬菌體不會引起大菱鲆短期內(nèi)死亡,并未檢測出溶藻弧菌噬菌體LC_(50);為期1個月的亞慢性腹腔注射攻毒對實驗大菱鲆生存率、體重體長無明顯影響;本部分實驗對大菱鲆各項血漿生化、肝臟、腎臟和脾臟組織細胞無顯著性影響。(3)對大蒜素在常溫下對噬菌體的保藏作用進行研究,研發(fā)出一種溶藻弧菌噬菌體制劑其配方為:含有4.32′10~7 PFU/mL噬菌體、0.1250 mg/mL大蒜素、2.5mmol/mLNaCl和5.0 mmol/mL MgCl_2,并對其應用效果進行評價結(jié)果顯示本噬菌體制劑實驗組大菱鲆生存率為70.00%,與5 mg/L強力霉素(Doxycycline)實驗組76.7%生存率無顯著性差異。
【學位授予單位】:大連理工大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:S948

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