發(fā)布時(shí)間：2020-06-29 23:03

【摘要】：本研究采用生理生化及分子生物學(xué)技術(shù),研究三倍體虹鱒對(duì)低氧脅迫的響應(yīng)機(jī)制,并探討飼料蛋白質(zhì)水平和脂肪水平對(duì)三倍體虹鱒低氧應(yīng)激后肌肉品質(zhì)、血漿應(yīng)激指標(biāo)、低氧應(yīng)答相關(guān)基因表達(dá)(mRNA水平)、抗氧化及免疫系統(tǒng)應(yīng)答相關(guān)基因表達(dá)和相關(guān)指標(biāo)的影響,研究成果將為魚類低氧應(yīng)激機(jī)制及營(yíng)養(yǎng)調(diào)控策略提供理論依據(jù)。本研究主要由以下三部分組成:1.低氧應(yīng)激后對(duì)三倍體虹鱒的影響。通過設(shè)置正常組(溶氧高于7mg/L)和應(yīng)激組(溶氧低于5 mg/L維持10 min),分析急性低氧應(yīng)激對(duì)三倍體虹鱒肌肉品質(zhì)、血漿應(yīng)激指標(biāo)、低氧應(yīng)答相關(guān)基因表達(dá)、抗氧化系統(tǒng)及免疫系統(tǒng)的影響。結(jié)果表明:(1)低氧應(yīng)激導(dǎo)致肌肉品質(zhì)降低。低氧脅迫后,應(yīng)激組肌肉pH、內(nèi)聚性、彈性、膠黏性、咀嚼性顯著高于正常組(P0.05),持水力、亮度值(L*)、紅色值(a*)、黃色值(b*)和粘附性顯著低于正常組(P0.05)。(2)低氧應(yīng)激導(dǎo)致血漿應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)產(chǎn)生明顯改變。低氧脅迫后,血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性及球蛋白(GLOB)、葡萄糖(GLU)、甘油三酯(TG)和皮質(zhì)醇含量顯著高于正常組(P0.05);白蛋白(ALB)水平顯著低于正常組(P0.05),應(yīng)激前后血漿中總蛋白(TP)、總膽固醇(TC)含量和堿性磷酸酶(ALP)無(wú)顯著差異(P0.05)。(3)低氧應(yīng)激導(dǎo)致低氧應(yīng)答相關(guān)基因表達(dá)量明顯改變。肌肉中低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)基因表達(dá)量上調(diào),肝臟中血紅素加氧酶1(HO-1)基因表達(dá)量下調(diào)。(4)低氧應(yīng)激導(dǎo)致抗氧化系統(tǒng)明顯被激活。應(yīng)激組血漿和肝臟丙二醛(MDA)含量顯著升高(P0.05),總抗氧化能力(T-AOC)顯著下降(P0.05);低氧脅迫后,肌肉中超氧化物岐化酶基因(SOD)和過氧化氫酶基因(CAT)表達(dá)量上調(diào),肝臟中核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)基因表達(dá)量上調(diào),而SOD基因表達(dá)量下調(diào)。(5)低氧應(yīng)激導(dǎo)致免疫系統(tǒng)明顯被激活。應(yīng)激后血漿溶菌酶、熱休克蛋白(HSP70)活性顯著升高(P0.05),肌肉HSP70基因表達(dá)量上調(diào),肝臟HSP70和腫瘤壞死因子α(TNFα)基因表達(dá)量下調(diào)(P0.05)。如上所述,本實(shí)驗(yàn)所用的急性低氧應(yīng)激手段對(duì)三倍體虹鱒生理狀態(tài)產(chǎn)生顯著影響,低氧應(yīng)激導(dǎo)致三倍體虹鱒肌肉品質(zhì)降低以及抗氧化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)明顯被激活。2.飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)三倍體虹鱒低氧應(yīng)激的影響。以初始體重為(233.30±0.39)g的三倍體虹鱒為研究對(duì)象,配制蛋白質(zhì)水平為35.40%(低蛋白組)、43.30%(中蛋白組)和52.40%(高蛋白組)的3組等脂等能飼料,并進(jìn)行為期80天的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)后,進(jìn)行急性低氧脅迫(溶氧低于5 mg/L維持10 min),結(jié)果表明:高蛋白組肌肉紅色值和亮度值變小,血漿GLU水平顯著下降(P0.05);低蛋白組肌肉粘附性和紅色值下降,血漿ALT、AST、ALP、LDH和TC水平顯著上升(P0.05);中蛋白組血漿T-AOC水平顯著升高(P0.05),肝臟和肌肉Nrf2基因表達(dá)量上調(diào),肌肉TNFα和IL-1β基因表達(dá)量上調(diào)以及IL-8基因表達(dá)量下調(diào),肝臟TNFα、HSP70、IL-1β和IL-8基因表達(dá)量低于高蛋白組。因此,過低或過高飼料蛋白質(zhì)水平都會(huì)加劇肝臟應(yīng)激損傷,適宜飼料蛋白質(zhì)水平(43.30%)有助于提高肌肉紅色值和抗應(yīng)激能力,緩解低氧應(yīng)激損傷。3.飼料脂肪水平對(duì)三倍體虹鱒低氧應(yīng)激的影響。以初始體重為(232.83±0.44)g的三倍體虹鱒為研究對(duì)象,配制脂肪水平為6.60%(低脂肪組)、14.80%(中低脂肪組)、22.80%(中高脂肪組)和29.40%(高脂肪組)的4組等氮飼料,在80天的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)后,進(jìn)行急性低氧脅迫(脅迫條件同上),結(jié)果表明:低脂肪組肌肉紅色值和黃色值顯著降低,血漿ALT、AST和LDH水平顯著升高(P0.05)。高脂肪組血漿TC、MDA水平顯著上升(P0.05),T-AOC下降。中高脂肪組肝臟SOD基因表達(dá)量上調(diào)。低脂肪組血漿TP、ALB和GLOB水平下降,低脂肪組和高脂肪組肌肉HSP-70和IL-8基因表達(dá)量上調(diào)。因此,過低或過高的飼料脂肪水平都會(huì)影響三倍體虹鱒的肌肉品質(zhì),會(huì)加重低氧應(yīng)激下三倍體虹鱒代謝負(fù)擔(dān)。適宜的飼料脂肪水平(22.80%)會(huì)有助于應(yīng)對(duì)低氧應(yīng)激損傷,增強(qiáng)免疫能力。綜上所述,在本研究條件下,低氧脅迫會(huì)明顯降低三倍體虹鱒肌肉品質(zhì),同時(shí)明顯激活三倍體虹鱒的抗氧化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng),過高或者過低的飼料蛋白質(zhì)水平和脂肪水平對(duì)三倍體虹鱒抗氧化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)產(chǎn)生不利影響,而適宜的飼料蛋白質(zhì)水平(43.30%)和脂肪水平(22.80%)能夠減輕低氧脅迫對(duì)三倍體虹鱒抗氧化系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)的影響。
【學(xué)位授予單位】：青海大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S965.122

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本文編號(hào)：2734473