【摘要】：斑節(jié)對蝦(Penaeus monodon)是我國重要的水產(chǎn)養(yǎng)殖種類,養(yǎng)殖區(qū)域遍布我國廣東、福建、廣西、浙江等各省沿海一帶。因其個體大,肉質(zhì)鮮美,營養(yǎng)價值高等優(yōu)點(diǎn),深受廣大消費(fèi)者的青睞,然而,由于近年來雄性親蝦在人工繁育過程中,時常出現(xiàn)產(chǎn)精率低及精莢利用率低的現(xiàn)象,以致于受精后的雌蝦產(chǎn)卵率和孵化率過低,從而影響子代的成活率,使斑節(jié)對蝦人工繁育時的效率難以得到提高。如何提高產(chǎn)精率和精莢利用率是當(dāng)前生產(chǎn)應(yīng)用和產(chǎn)業(yè)發(fā)展中亟需解決的問題。營養(yǎng)是蝦類性腺成熟和種苗質(zhì)量的重要決定因素。沙蠶、牡蠣、魷魚、烏賊等天然餌料對親蝦性腺發(fā)育和繁殖具有促進(jìn)作用,其實(shí)質(zhì)是與其特異的營養(yǎng)組成密切相關(guān)。本文利用不同營養(yǎng)餌料對斑節(jié)對蝦雄蝦的影響,分別從營養(yǎng)與飼料學(xué)、組織學(xué)及組織表達(dá)分析幾個方面,來探究斑節(jié)對蝦雄蝦精莢的發(fā)育與再生規(guī)律,為斑節(jié)對蝦的人工繁育提供了理論參考。實(shí)驗結(jié)果如下:1.飼料中添加不同水平維生素E(vitamin E,VE)對雄性斑節(jié)對蝦精莢再生質(zhì)量的影響該章節(jié)實(shí)驗用基礎(chǔ)飼料來制備了四種不同水平的維生素E(0、200、600、1000 mg·kg-1)配合飼料,人工擠出雄蝦的精莢后,精養(yǎng)40 d,來評價斑節(jié)對蝦雄蝦的精莢再生之后的精子數(shù)量和質(zhì)量。添加維生素E的每個實(shí)驗組雄蝦兩次再生精莢重量均要顯著高于實(shí)驗初始值,而對照組中雄蝦的三次精莢的重量沒有顯著差異。實(shí)驗各組的第一次再生的精莢的重量大于對照組,E1000組的精莢重量顯著大于對照組(P0.05),E200組和E600組差異不顯著。同樣,實(shí)驗中第二次再生的精莢重量高于對照組,E600組精莢重量極顯著高于對照組(P0.01),且顯著大于E200組和E1000組(P0.05),E200組和E1000組之間無顯著差異。第一次精莢再生后,E200組精子總數(shù)極顯著高于對照組和E1000組(P0.01),顯著高于E600組(P0.05),而對照組和E1000組的精子數(shù)量無顯著差異(P0.05)。第二次精莢再生后,三個實(shí)驗組的精子總數(shù)均高于對照組,其中E200組精子總數(shù)極顯著高于對照組(P0.01)。綜合三項指標(biāo),顯示添加200 mg·kg-1維生素E可以顯著促進(jìn)斑節(jié)對蝦的精莢再生和精子數(shù)量。2.維生素E和裂壺藻(Schizochytrium sp.,Sch)對斑節(jié)對蝦雄蝦精莢再次發(fā)育和精子數(shù)量及活力的影響該章節(jié)實(shí)驗用基礎(chǔ)飼料來制備了四種不同的配合飼料(A組:0添加;B組:VE 200;C組:1%Sch;D組:VE 200+1%Sch),人工擠出雄蝦的精莢后,精養(yǎng)40 d,結(jié)果表明:各實(shí)驗組第一次再生精莢質(zhì)量大于對照組,VE 200組和VE 200+1%Sch組的精莢質(zhì)量顯著大于對照組(P0.05),1%Sch組和對照組差異不顯著。各實(shí)驗組第二次再生精莢質(zhì)量顯著大于對照組(P0.01),VE200+1%Sch組的精莢質(zhì)量極顯著大于對照組(P0.01),且顯著大于VE 200組和1%Sch組(P0.05),VE 200組和1%Sch組無顯著差異。B組的活精子數(shù)百分比顯著高于A組(P0.05);C組的活精子數(shù)與A組間差異不顯著(P0.05);D組的精子總數(shù)顯著高于A組(P0.05)。根據(jù)這三個指標(biāo)(精莢質(zhì)量、精子數(shù)量及活精子數(shù)百分比)初步認(rèn)為飼料中聯(lián)合添加1%裂壺藻與200 mg·kg-1維生素對斑節(jié)對蝦雄蝦精莢的再生和精子數(shù)量的提高有協(xié)同作用。3.維生素E和裂壺藻對斑節(jié)對蝦雄蝦精莢組織的顯微和亞顯微結(jié)構(gòu)的影響該章節(jié)實(shí)驗用基礎(chǔ)飼料來制備了四種不同的配合飼料(A組:0添加;B組:VE 200;C組:1%Sch;D組:VE 200+1%Sch),人工擠出雄蝦的精莢后,精養(yǎng)40 d,結(jié)果表明:飼料中維生素E和裂壺藻添加后,精莢內(nèi)的精子團(tuán)數(shù)量顯著高于對照組(P0.05);而維生素E和裂壺藻聯(lián)合添加比單獨(dú)添加維生素E或裂壺藻的精子團(tuán)數(shù)量顯著升高(P0.05)。4.維生素E和裂壺藻對斑節(jié)對蝦雄蝦精莢發(fā)育中MAPK/Erk(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase)信號通路中的相關(guān)基因表達(dá)的影響該章節(jié)實(shí)驗用基礎(chǔ)飼料來制備了4種不同的配合飼料(A組:0添加;B組:VE 200;C組:1%Sch;D組:VE 200+1%Sch),人工擠出雄蝦的精莢后,精養(yǎng)40 d,結(jié)果表明:在MAPK/Erk信號通路中,D組的Ras基因表達(dá)量均高于其他各組,其中顯著高于B組(P0.05);D組PKC基因表達(dá)量顯著高于其他各組(P0.05);C組MP1基因表達(dá)量顯著高于其他各組(P0.05);C和D組的Mos和MNK2基因表達(dá)量顯著高于A組和B組(P0.05);D組MEK1基因表達(dá)量均高于其他各組,其中顯著高于A組和C組(P0.05);A組和D組的Erk基因表達(dá)量顯著性高于B組和C組(P0.05);各組CREB基因的表達(dá)量均無顯著性差異(P0.05);D組c-Myc基因表達(dá)量極顯著性高于其他各組(P0.01),其中D組表達(dá)量是A組的18.54倍,是B組的4.46倍,14.11倍于C組。MAPK/Erk信號通路上的各基因參與了斑節(jié)對蝦的精莢再生過程。維生素E和裂壺藻可能含有某種促生長因子,通過信號傳遞,激活核轉(zhuǎn)錄因子,促進(jìn)細(xì)胞增值分化,從而促進(jìn)精莢成熟。
【學(xué)位授予單位】：上海海洋大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：S917.4
【圖文】：

圖 2-1 生長與分化中的 MAPK/Erk 信號通路Fig.2-1 MAPK/Erk in Growth and Differentian圖片來源：Cell Signaling Technology (CST)2.4 斑節(jié)對蝦精莢的發(fā)育及精子質(zhì)量研究進(jìn)展

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本文編號：2733737