【摘要】：羅非魚是我國淡水養(yǎng)殖的重要品種,主要在廣東、海南、廣西、云南及福建等省份養(yǎng)殖。近年來由于規(guī)�；B(yǎng)殖模式的推廣和養(yǎng)殖環(huán)境惡化,導(dǎo)致病害頻發(fā),其中以無乳鏈球菌病的危害最大。目前尚無報道羅非魚感染無乳鏈球菌的途徑及侵染靶器官。開展羅非魚感染無乳鏈球菌后的動態(tài)病理學(xué)及免疫酶活性變化研究工作,可以為更深入研究無乳鏈球菌的致病機理和防控藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。本研究采用注射、灌胃、浸泡三種方式對吉富羅非魚進(jìn)行無乳鏈球菌(HN016菌株)感染,觀察三種方式感染后病原菌在吉富羅非魚體內(nèi)的分布規(guī)律及病理變化,同時研究不同種群羅非魚感染無乳鏈球菌后血液及肝臟組織中免疫相關(guān)酶的變化規(guī)律。主要結(jié)論如下:(1)采用注射、灌胃、浸泡三種方式對吉富羅非魚進(jìn)行人工感染,其中注射和灌胃均出現(xiàn)典型的無乳鏈球菌病臨床癥狀,注射組的死亡周期最短,感染后12 h出現(xiàn)死魚,感染后24 h出現(xiàn)死亡高峰,死亡率最高,達(dá)到92.5%;灌胃組感染后5 h出現(xiàn)死魚,感染后48 h出現(xiàn)死亡高峰,死亡率為90%;而浸泡組感染后僅出現(xiàn)輕微發(fā)病癥狀,沒有出現(xiàn)死魚。(2)在吉富羅非魚感染無乳鏈球菌后體內(nèi)病原菌分離方面,注射組和灌胃組感染后2h在脾臟、肝臟、前腎、胃、腮、皮膚和肌肉組織中均可分離出病原菌,感染后5h在兩組的腦組織中均可分離出病原菌,感染后8h兩組均已表現(xiàn)出明顯的發(fā)病癥狀,此時體內(nèi)各組織的病原菌濃度達(dá)到峰值;而浸泡組感染后8 h才在體內(nèi)各組織中分離出病原菌,但它們的濃度均低于相同時期的注射組和灌胃組。(3)對吉富羅非魚進(jìn)行注射、灌胃、浸泡三種方式感染無乳鏈球菌,取感染后2 h、5 h、8 h、12 h、24 h的鰓、腸、脾臟、肝臟組織進(jìn)行蘇木精-伊紅染色法(H.E染色法)染色及免疫組織化學(xué)定位。H.E染色結(jié)果顯示:三種方式在感染后早期(2-5 h)鰓、肝臟、脾臟、腸組織均已經(jīng)出現(xiàn)明顯病變,其中鰓表現(xiàn)為基部上皮細(xì)胞增生及鰓小片壞死,脾臟為含鐵血黃素增多、巨噬細(xì)胞彌漫性浸潤以及血管變細(xì),肝臟為出現(xiàn)空泡變性、毛細(xì)血管破裂,腸為腸絨毛斷裂、黏膜下層細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞;三種方式的病變程度依次為注射組灌胃組浸泡組。免疫組化定位結(jié)果顯示:灌胃感染后病原菌強陽性信號先在腸組織出現(xiàn),注射組為脾臟組織,浸泡組為鰓組織。(4)采用腹腔注射方式對吉富羅非魚抗病選育系、百桂品系吉富羅非魚及奧尼羅非魚感染無乳鏈球菌(HN016菌株),分析感染后三種羅非魚血液及肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)、總抗氧化能力(T-AOC)等免疫相關(guān)酶活性變化。結(jié)果顯示:三個不同種群羅非魚肝臟組織ACP、AKP、LZM、SOD、T-AOC酶活力均呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢,而CAT酶活力呈現(xiàn)先下降再升高的趨勢;而感染24h后CAT、ACP、AKP、LZM活力在三種羅非魚血液中均表現(xiàn)出上升的趨勢。
【學(xué)位授予單位】：廣西大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S943
【圖文】：

廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文邐吉富羅非魚您染無乳鏈球菌后的病理觀蔡及免疫酶ｉ舌性變化研究逡逑ｍｉ逡逑圖２－１發(fā)病吉富羅非魚體表癥狀逡逑Ｆｉｇ．邋２－１邋ＧＩＦＴ邋ｔｉｌａｐｉａ邋ｄｉｓｅａｓｅ邋ｉｎ邋ｓｙｍｐｔｏｍ邋ｉｎ邋ｓｕｒｆａｃｅ逡逑２．３．２病原菌鑒定及分離逡逑從出現(xiàn)明顯發(fā)病癥狀的吉富羅非魚組織接種到雞血平板上恒溫培養(yǎng)１０邋ｈ后在顯微逡逑鏡下便可觀察到呈球狀或卵圓形的無乳鏈球菌，其直徑約為０．６－１．０）Ｌｉｍ邋（見圖２－２）。在逡逑革蘭氏染色處理后鏡檢可觀察到菌體為鏈狀或成對排列的革蘭氏陽性球菌（見圖２－３）。逡逑W逡逑ＨＰ逡逑圖２－２雞血平板上分離出的病原菌逡逑Ｆｉｇ．邋２－２邋Ｔｈｅ邋ｐａｔｈｏｇｅｎｓ邋ｏｎ邋ｂｌｏｏｄ邋ａｇａｒ邋ｐｌａｔｅ逡逑ｌｌ逡逑

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【參考文獻(xiàn)】

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2 劉丹;耿毅;汪開毓;余澤輝;陳德芳;歐陽萍;黃小麗;牟維豪;李亞軍;;大鯢蛙病毒感染大鯢的動態(tài)病理損傷及病原的組織分布[J];中國水產(chǎn)科學(xué);2017年01期

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4 祝t熈

本文編號：2720540