發(fā)布時間：2020-06-16 17:57

【摘要】：中華絨螯蟹(Eriocheir sisensis)廣泛分布于南北沿海各地湖泊,是我國一種重要的經(jīng)濟蟹類品種,也是一種中國傳統(tǒng)美食。隨著中國經(jīng)濟的發(fā)展,人們對于中華絨螯蟹的需求逐漸增多,這使它的養(yǎng)殖業(yè)大規(guī)模發(fā)展,但養(yǎng)殖場經(jīng)常遭受病原菌或病毒等的侵害,經(jīng)常大規(guī)模爆發(fā)疾病,造成直接的經(jīng)濟損失。因此,研究中華絨螯蟹的免疫防御機制,尤其是研究該蟹對復(fù)雜的養(yǎng)殖水環(huán)境中大量細菌等病原的識別機理尤為重要。免疫系統(tǒng)一般分為先天或固有和適應(yīng)或獲得性免疫系統(tǒng)。無脊椎動物不存在典型的由一系列免疫因子組成以及能產(chǎn)生免疫記憶的獲得性免疫,但具有先天免疫。它依靠模式識別受體(pattern recognition receptors, PRRs)與病原相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular patterns, PAMPs)相互作用,識別并結(jié)合病原菌,從而激活宿主體內(nèi)信號通路,防御病原菌入侵。在無脊椎動物免疫中,C型凝集素(CTLs)作為一種模式識別受體(PRRs)具有重要作用。本研究基于中華絨螯蟹肝胰腺cDNA庫的表達序列標簽(expressed sequence tag, EST),克隆了一個新的C型凝集素EsLecB。EsLecB含19個氨基酸的信號肽,能編碼156個氨基酸的開放閱讀框(open reading frame, ORF),含131個氨基酸的糖基識別功能域(carbohydrate-recognition domain, CRD)。熒光定量qRT-PCR分析EsLecB的組織表達情況,發(fā)現(xiàn)它在檢測的中華絨螯蟹各個組織中均表達,且在血細胞、肝胰腺和心臟中表達最多；病原相關(guān)分子模式(PAMPs)或病原菌誘導(dǎo)刺激中華絨螯蟹后,EsLecB表達上調(diào)。EsLecB的重組原核表達蛋白(rEsLecB)具有鈣離子(Ca2+)不依賴而碳水化合物依賴的菌結(jié)合和凝集能力,且具有抗菌能力、血細胞包裹能力及激活酚氧化酶原(prophenoloxidase, proPO)激活系統(tǒng)的能力。本研究不僅豐富了C型凝集素(CTLs)的免疫功能研究,也為其他模式識別受體(PRRs)的免疫調(diào)控機制研究提供了參考,同時也將有助于更好的理解中華絨螯蟹乃至其他甲殼動物的先天免疫反應(yīng)機理。
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：S917.4
【圖文】：

集而致死；相關(guān)免疫分子激活黑化級聯(lián)反應(yīng)生成的一系列化合物可將其殺死；此逡逑外，一些抗菌蛋白也可Ｗ直接消滅病原茵［１＂＂］。無脊椎動物免疫系統(tǒng)參與的通路逡逑已有初步研究，但具體分子機制仍有待深入研究（圖１．１）。逡逑無脊椎動物免疫系統(tǒng)，包括一些細胞內(nèi)的免疫反應(yīng)，如吞枿及激活信號通路逡逑等；化及細胞外的免疫反應(yīng)，如凝集和黑化等（圖１．２）。大多數(shù)情況下，凝集、逡逑黑化和Ｔｏｌｌ信號通路受s{氧化酶（ＰＯ）級聯(lián)系統(tǒng)調(diào)控�？嵫趸盖桑埃┘壜�(lián)系逡逑統(tǒng)能被模式識別蛋白（ｐａｔｔｅｒｎ邋ｒｅｃｏｇｎｉｔｉｏｎ邋ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＰＲＰｓ）或損傷組織激活。酪逡逑氧化酶（Ｐ０）級聯(lián)系統(tǒng)的激活比一些需要調(diào)控基因表法的免疫反應(yīng)要快，因此逡逑在無脊椎動物免疫中有重要的地位Ｐ１。雖然在無脊椎動物中不存在與脊椎動物獲逡逑得性免疫相關(guān)的一些關(guān)鍵成分，如Ｂ細胞、Ｔ細胞和主要的組織相容性分子，但逡逑這不能說明無脊椎動物缺乏具有免疫記憶的特異性免疫，只能說明無脊椎動物與逡逑脊椎動物執(zhí)行特異性免疫的具體機制有可能不一樣。因此，無脊椎動物很可能具逡逑有與脊椎動物相似的免疫記憶或特異性免疫。已有相關(guān)巧巧表明無脊椎動物免疫逡逑具有類似于脊椎動物的特異性免疫ｔｗｉ。逡逑無脊椎動物先天免疫激活的第一道免疫防線是免疫識別

邐華東師范大學(xué)２０１６屆碩王研究生學(xué)位論文邐逡逑反應(yīng)［Ｓ’ｌＷｌ’Ｗ。逡逑二、功能逡逑無脊椎動物Ｃ型凝集素作為一種模式識別受體（ＰＲＲｓ）能識別病原菌表面逡逑的病原相關(guān)分子模式（ＰＡＭＰｓ），進而結(jié)合微生物激活免疫系統(tǒng)無脊椎動物逡逑免疫系統(tǒng)激活的第一步是識別并結(jié)合病原菌。已報道Ｃ型凝集素能夠結(jié)合大多逡逑數(shù)種類的病原菌和碳水化合物，且具有不同親和力，也受劑量依賴［３８－３９］。此外，逡逑Ｃ型凝集素結(jié)合微生物和碳水化合物的反應(yīng)類型，部分屬于Ｃａ２＋不依賴，另有部逡逑分屬于Ｃａ２＋依賴，但大多Ｃ型凝集素都是碳水化合物依賴ＰＳ’Ｗ。作為參與宿主逡逑區(qū)分自己與非己的重要模式識別受體（ＰＲ民Ｓ），Ｃ型凝集素通過識別、結(jié)合病原逡逑菌或碳水化合物后，能誘導(dǎo)激活Ｗ下等一系列的免疫反應(yīng)。逡逑Ｆｕｎｇｉ逡逑

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本文編號：2716370