發(fā)布時間：2020-04-18 17:42

【摘要】：中華鱘(Acipenser sinensis)是瀕危物種,國家一級保護動物,其親魚的養(yǎng)殖在中國早已開展,但在親魚養(yǎng)殖過程中,其性成熟困難是個科學難題,大多數(shù)雌魚性腺發(fā)育停留在II期,只有少數(shù)發(fā)育到III期或IV期,因此,為了更好的保護中華鱘,找到解決其人工養(yǎng)殖條件下性腺發(fā)育困難的方法非常重要。本文從營養(yǎng)調(diào)控角度出發(fā),首先分析性腺發(fā)育處于II期的中華鱘各組織(肌肉、肝臟和性腺)中營養(yǎng)物質(zhì)(蛋白質(zhì)、脂肪、氨基酸和脂肪酸)含量,通過對組織間和已報道的不同發(fā)育階段各組織間的營養(yǎng)物質(zhì)含量進行比較分析,初步鑒定出影響中華鱘性腺發(fā)育的關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)。然后,給中華鱘投喂不同脂肪水平飼料,通過定期檢測生長性能、性腺發(fā)育狀況、血清激素水平及生化指標、結(jié)合性腺轉(zhuǎn)錄組和血清代謝組分析來研究不同脂肪水平飼料對中華鱘性腺發(fā)育的影響以及脂肪對性腺發(fā)育的相關(guān)調(diào)節(jié)機制。主要研究結(jié)果如下:1.初步鑒定中華鱘性腺發(fā)育的關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì)用于試驗的中華鱘養(yǎng)殖在室外圓形水泥池中,全年養(yǎng)殖溫度在8℃到26℃,投喂率根據(jù)水溫控制在體重的0.2-1.5%,投喂70%的人工配合飼料和30%冰鮮魚,對性腺發(fā)育處于II期的3條雌魚與和3條雄魚分別取性腺、肌肉和肝臟組織進行營養(yǎng)物質(zhì)分析。結(jié)果表明:雌魚和雄魚性腺中的脂肪含量都顯著高于肌肉和肝臟中脂肪含量(P0.05),雌魚和雄魚性腺中的蛋白含量顯著低于肌肉中蛋白含量(P0.05);單不飽和脂肪酸(MUFA)含量在雌魚各組織中顯著高于雄魚(P0.05),而n-6系列多不飽和脂肪酸(n-6PUFA)含量在雌魚各組織中顯著低于雄魚(P0.05);在雌魚和雄魚各組織中,棕櫚酸(C16:0)和油酸(C18:1n9)含量分別是主要的飽和脂肪酸(SFA)和MUFA;亞油酸(C18:2n6)、花生四烯酸(C20:4n6,ARA)、亞麻酸(C18:3n3)和二十二碳六烯酸(DHA)這些多不飽和脂肪酸含量在雄魚性腺中顯著高于雌魚(P0.05)。ARA、二十碳五烯酸(EPA)和DHA在性腺中的含量較低,此外,將本實驗結(jié)果與發(fā)育處于III期和IV期的卵巢中的營養(yǎng)物質(zhì)含量對比分析發(fā)現(xiàn),發(fā)育處于II期中華鱘雌魚性腺中的脂肪含量及ARA、DHA組成含量相對較低,而這些多不飽和脂肪酸在性腺發(fā)育過程中有著重要的生理作用,說明魚體中的脂肪含量及脂肪酸組成對性腺發(fā)育起到關(guān)鍵作用,適當提高親魚脂肪營養(yǎng)來提供足夠的能量和必須需脂肪酸將有利于中華鱘性腺發(fā)育。2.不同脂肪水平飼料對中華鱘雌魚性腺發(fā)育影響給10齡左右、性腺發(fā)育處于II-的中華鱘分別投喂三種等氮(粗蛋白質(zhì)含量為46%)的不同脂肪水平(10%,14%和18%)的飼料,養(yǎng)殖24個月,分別在實驗期內(nèi)的第6、12、18、24個月時采集性腺、肌肉和血清樣品用于組織學分析和血清激素及生化分析,第18個月時進行血清代謝組和性腺轉(zhuǎn)錄組分析。結(jié)果表明:特定生長率(SGR)在10%組顯著高于18%組(P0.05);18%組卵母細胞直徑顯著增大且卵母細胞中含有大量的脂滴,18%組在第24個月時檢測到IV期卵粒;在第12和24個月時,肌肉中的脂滴含量在18%組相比較于10%和14%組顯著下降(P0.05);在12和18個月時,血清甘油三酯(TG)含量在18%組顯著高于10%和14%組(P0.05);在前三次取樣時,血清雌二醇(E2)含量在14%組中顯著高于10%和18%組(P0.05)。性腺轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)顯示三個組間有大量的差異基因,差異基因注釋到的主要代謝通路是花生四烯酸(ARA)代謝、萜類化合物生物合成、類固醇生物合成、卵巢類固醇激素合成;此外,性腺中涉及到卵母細胞生長基因(bmp15、gdf9)、脂滴累積相關(guān)基因(lpl、fatp4、fabp1)、卵黃生成相關(guān)基因(vtgr、ctsd、ctsb)、膽固醇合成相關(guān)基因(hmgcs、lss)、花生四烯酸(ARA)代謝相關(guān)基因(lox12、lox15、pge2)的mRNA表達量在18%組顯著高于其他兩組;代謝組與轉(zhuǎn)錄組結(jié)合分析結(jié)果表明14%脂肪水平飼料有利于類固醇激素合成,18%脂肪水平飼料促進了花生四烯酸代謝和膽固醇合成。因此,18%脂肪水平飼料有希望改善中華鱘雌魚性腺發(fā)育。本研究的結(jié)果表明:中華鱘體內(nèi)的脂肪儲存量對其性腺發(fā)育具有重要的作用,DHA、ARA是中華鱘性腺發(fā)育過程中的關(guān)鍵營養(yǎng)物質(zhì),會被選擇性保留在性腺中;18%脂肪水平飼料可以增強中華鱘雌魚體內(nèi)脂代謝、ARA代謝,促進卵母細胞中脂滴沉積和生長,有利于中華鱘雌魚性腺發(fā)育成熟。
【圖文】：

脂肪水平飼料對中華鱘生長、性腺發(fā)育及肌肉脂滴影 24 個月的養(yǎng)殖實驗后，L18 組中華鱘體重基本保持不變，其 S L14 組中華鱘體重隨著養(yǎng)殖實驗的延長而逐漸增加（表 3-3），高于 L18 組（圖 3-1）。表 3-3 飼料脂肪水平對中華鱘生長影響Table 3-3 Effect of dietary lipid levels on Chinese sturgeon growth performanroupAverage weight (kg)Initial 6 month 12 month 18 month 24 (n=24) 44.8±16.4 45.8±13.9 47.8±15.2 48.6±13.1 51 (n=24) 52.9±13.4 53.1±13.4 54.8±13.1 57.8±14.0 57 (n=24) 54.5±10.4 54.1±11.3 54.5±10.3 54.7±10.9 54表示用來稱重魚的尾數(shù)；數(shù)據(jù)用均值±標準差來表示；6 month, 12 month, 18 month始進行到 6、12、18 和 24 個月，，下面表格和圖中均是相同意思。resent the number of weigh fish for average weight in each group. Values are expressed asmonth, 12 month, 18 month, 24 month” is the time of trial initiate till to the month of 6he same means in following tables and figures.

圖 3-2 A) L18 組中成熟卵粒在三次取樣時發(fā)育變化情況。B)養(yǎng)殖到 24 個月時，三個處理組中性腺發(fā)育處于 II 的卵母細胞觀察。左下角圖標是組別-取樣時間；LD：脂滴；N：核仁。Fig. 3-2 A) The status of a mature egg in group L-18 at three sampling times. B) Histologicacharacteristics of oocytes with development at stage II at sample time of 24 month. “Uppecase-Number-Number” in left bottom of each image means: group of dietary lipid level and sample time of trial (12, 1and 24 represent the time of trial initiate till to the month of 12, 18 and 24, respectively); LD: lipid droplet; N: nucleoli.
【學位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S917.4

【參考文獻】

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本文編號：2632355