ZmHDA101是玉米去乙酰轉(zhuǎn)移酶家族的重要成員之一,其作用的分子機(jī)制尚未明確。為了明確ZmHDA101與TPL/TPRs蛋白之間的互作關(guān)系,本研究利用Gateway技術(shù),構(gòu)建了ZmHDA101、TPL/TPRs的酵母雙雜交載體AD/BD-ZmHDA101、AD/BD-AtTPL、AD/BD-AtTPR1、AD/BD-AtTPR2、AD/BD-AtTPR3和AD/BD-AtTPR4;利用酵母雙雜交技術(shù),分析了ZmHDA101與TPL/TPRs蛋白之間的互作關(guān)系。結(jié)果發(fā)現(xiàn),共同轉(zhuǎn)化了ZmHDA101與TPL/TPRs組合的酵母均能在-Leu/-Trp、-Leu/-Trp/-His和-Leu/-Trp/-His+3-AT培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng),而轉(zhuǎn)化了對(duì)照組合的酵母不能在-Leu/-Trp/-His或-Leu/-Trp/-His+3-AT培養(yǎng)基上正常生長(zhǎng),表明ZmHDA101與AtTPL、AtTPR1、AtTPR2、AtTPR3和AtTPR4在酵母細(xì)胞中均能夠直接互作。研究結(jié)果為闡明ZmHDA101在玉米生長(zhǎng)發(fā)育和抵抗生物/非生物脅迫中的功能及其調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。

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【部分圖文】：

圖3 ZmHDA101、TPL/TPRs的自激活活性檢測(cè)

對(duì)ZmHDA101、TPL/TPRs的自激活活性進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)化了BD-ZmHDA101、BD-AtTPL、BD-AtTPR1、BD-AtTPR2、BD-AtTPR3、BD-AtTPR4和空載體BD的酵母均能夠在-Trp培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好，表明酵母轉(zhuǎn)化成功；轉(zhuǎn)化了BD-At....

圖4 Zm HDA101與TPL/TPRs的酵母雙雜交結(jié)果

利用酵母雙雜交技術(shù)，檢測(cè)ZmHDA101與TPL/TPRs蛋白之間的互作關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，共同轉(zhuǎn)化了ZmHDA101與TPL/TPRs組合（AD-ZmHDA101+BD-AtTPL、BD-ZmHDA101+AD-AtTPL、AD-ZmHDA101+BD-A....

圖4 Zm HDA101與TPL/TPRs的酵母雙雜交結(jié)果

圖4ZmHDA101與TPL/TPRs的酵母雙雜交結(jié)果3結(jié)論與討論

圖1 ZmHDA101基因的酵母雙雜交載體構(gòu)建

使用ZmHDA101基因的特異性引物擴(kuò)增獲得ZmHDA101(1554bp）的基因片段（圖1A），回收目的片段后將其與入門載體pBM27連接，轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，菌落PCR鑒定獲得與目的片段大小一致的單一條帶（圖1B），進(jìn)一步測(cè)序鑒定后獲得ZmHDA101基因的入門載體p....

本文編號(hào)：4047708