文山三七作為云南道地性藥材,在普遍發(fā)生“紫化(purpling)”的三七營養(yǎng)器官中,地上莖的紫化出現(xiàn)得最早,也最明顯,故紫化的地上莖成為探究三七花色苷合成和生態(tài)生理功能的首選器官。但是,三七一年生植株綠紫過渡地上莖上花色苷黃金分割式積累的原因和功能還尚不明確。本研究以一年生文山三七綠紫過渡莖為材料,主要研究花色苷、皂苷含量和F3H轉(zhuǎn)錄強度的縱向變化及其相關(guān)性,并用顯微組織化學(xué)法研究了云南文山三七一年生植株綠紫過渡地上莖各莖段花色苷和皂苷的組織定位,用分光光度法檢測了莖段的總花色苷(TAC)和總皂苷含量(TSC),用高效液相色譜檢測了莖段的皂苷單體含量,用熒光定量PCR法檢測了花色苷的結(jié)構(gòu)基因F3H的轉(zhuǎn)錄強度。主要研究結(jié)果如下:(1)在莖段中部橫截面上,花色苷主要定位在皮層薄壁組織外側(cè)的2層或2～3層細胞中此外,在厚角組織外側(cè)的1～2層細胞和表皮細胞中也有少量花色苷積累,但韌皮部、形成層、木質(zhì)部和髓中均無花色苷積累,莖的花色苷明顯富集于莖中上部的黃金分割點處,而皂苷主要定位在維管束中,其次為皮層薄壁組織,髓中則幾乎無皂苷積累。(2)各莖段的皂苷單體均主要為人參皂苷Rb1。從莖頂向莖基,莖段...

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

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摘要
Abstract
符號及縮寫語
1 引言
    1.1 三七綠紫過渡地上莖紫化特征的特殊性
        1.1.1 三七地上莖存在的紫化現(xiàn)象
        1.1.2 三七綠紫過渡地上莖的紫化存在著黃金分割式的分布
    1.2 F3H是高等植物花色苷生物合成結(jié)構(gòu)基因之一
        1.2.1 F3H在花色苷生物合成中的地位
        1.2.2 目前F3H的研究進展
    1.3 高等植物花色苷和皂苷含量的檢測方法
        1.3.1 高等植物花色苷含量的測定方法
        1.3.2 高等植物皂苷含量的測定方法
    1.4 基因轉(zhuǎn)錄水平檢測的經(jīng)典方法—實時熒光定量PCR
    1.5 研究內(nèi)容、意義和創(chuàng)新點、技術(shù)路線
        1.5.1 研究內(nèi)容和目標
        1.5.2 研究意義和創(chuàng)新點
        1.5.3 技術(shù)路線
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料采集與預(yù)處理
        2.1.2 主要試劑(盒)
    2.2 莖段花色苷和皂苷組織定位的檢測
    2.3 莖段總花色苷含量的測定
    2.4 莖段皂苷含量的測定
        2.4.1 莖段總皂苷含量的測定
        2.4.2 莖段皂苷單體含量的測定
    2.5 三七綠紫過渡莖植株地上莖不同莖段合成花色苷的結(jié)構(gòu)基因F3H轉(zhuǎn)錄強度的檢測
        2.5.1 三七綠紫過渡莖植株的總RNA含量檢測
        2.5.2 cDNA的合成
        2.5.3 三七花色苷合成途徑中結(jié)構(gòu)基因F3H引物的篩選及目的基因的擴增
        2.5.4 三七花色苷合成途徑中結(jié)構(gòu)基因F3H轉(zhuǎn)錄強度的檢測
    2.6 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 三七綠紫過渡地上莖花色苷和皂苷組織定位和積累量的縱向變化特征
        3.1.1 花色苷組織定位和積累量的縱向變化特征
        3.1.2 皂苷組織定位和積累量的縱向變化特征
    3.2 三七綠紫過渡地上莖總花色苷含量的縱向變化特征
    3.3 三七綠紫過渡地上莖皂苷含量的縱向變化特征
        3.3.1 總皂苷含量的變化特征
        3.3.2 皂苷單體含量的變化特征
    3.4 三七綠紫過渡地上莖花色苷和皂苷含量縱向變化的相關(guān)性特征
    3.5 三七綠紫過渡地上莖花色苷合成結(jié)構(gòu)基因F3H轉(zhuǎn)錄強度
        3.5.1 三七綠紫過渡地上莖總RNA的檢測
        3.5.2 三七綠紫過渡地上莖F3H片段的篩選及生物信息學(xué)分析
        3.5.3 三七綠紫過渡地上莖F3H轉(zhuǎn)錄強度的縱向變化特征
    3.6 三七綠紫過渡地上莖F3H轉(zhuǎn)錄強度和總花色苷含量縱向變化的相關(guān)性特征
4 討論
    4.1 三七綠紫過渡地上莖花色苷和皂苷組織定位和積累量縱向變化的差異性
    4.2 三七綠紫過渡地上莖花色苷和皂苷含量縱向變化的差異性
    4.3 三七綠紫過渡地上莖F3H轉(zhuǎn)錄強度和總花色苷含量縱向變化的差異性
5 結(jié)論
參考文獻
攻讀碩士期間論文發(fā)表情況和獲獎情況
致謝



本文編號：4019518