在Kennedy途徑中,甘油-3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶(GPAT)、溶血磷脂酸�；D(zhuǎn)移酶(LPAT)以及二酰甘油�；D(zhuǎn)移酶(DGAT)依次將脂肪酸組裝到甘油上,形成三酰甘油。DGAT是Kennedy途徑中僅有的限速酶,在不同器官如葉片、花瓣、果實(shí)、花粉囊以及發(fā)育的種子等中廣泛存在,且在發(fā)育的種子和花瓣中的活性較高。但是對于油菜DGAT基因家族的研究很少,尤其是尚未見關(guān)于BnDGAT3基因的報(bào)道。本研究以高、低含油量兩個(gè)甘藍(lán)型油菜品系為背景,通過同源比對,在油菜數(shù)據(jù)庫共發(fā)現(xiàn)6個(gè)同源片段,分別定位在A08和C08染色體上,其中A亞染色體上有4個(gè),分別命名為:BnDGAT3a、BnDGAT3ax1、BnDGAT3ax2、BnDGAT3ax3,C亞染色體組上有2個(gè),分別命名為:Bn DGAT3c-1、BnDGAT3c-2。通過同源克隆,本研究得到了一條A08染色體上長為1071bp的完整CDS,該基因共編碼356個(gè)氨基酸。通過對氨基酸序列進(jìn)行理化性質(zhì)分析可知:該蛋白為穩(wěn)定性蛋白,穩(wěn)定性指數(shù)為39.01,脂肪族氨基酸系數(shù)為74.41,蛋白表現(xiàn)為親水性,無跨膜結(jié)構(gòu),為非膜結(jié)合蛋白。通過對該片段進(jìn)行酵母和擬...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1三酰甘油合成途徑［5］Fig.1-1Synthesisoftriacylglycerol

調(diào)節(jié)油脂的積累，在Kennedy途徑中，各�；D(zhuǎn)移酶依次將脂肪酸組裝到而形成三酰甘油，若增加各�；D(zhuǎn)移酶：甘油-3-磷酸酰基轉(zhuǎn)移酶(GPAT)、酸�；D(zhuǎn)移酶(LPAT)以及二酰甘油�；D(zhuǎn)移酶(DGAT)的含量將有可能增的代謝作用，有利于提高油脂的含量。1植物三酰甘油組....

圖2-1WB06總RNA電泳圖

RNA（圖2-1），以物，擴(kuò)增出長度約其用連接酶連接到，獲得陽性重組子。名為BnDGAT3。

圖2-2BnDGAT3PCR電泳圖

提取甘藍(lán)型油菜WB06的總RNA（圖2-1），以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板，利用AtDGAT3基因同源序列設(shè)計(jì)的引物，擴(kuò)增出長度約為1000bp的基因片段（圖2-2）利用試劑盒純化回收該片段，將其用連接酶連接到T載體上，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受中，經(jīng)菌落PCR鑒....

圖2-3BnDGAT3菌落PCR鑒定電泳圖

提取甘藍(lán)型油菜WB06的總RNA（圖2-1），以反轉(zhuǎn)錄的cDNA為模板，利用AtDGAT3基因同源序列設(shè)計(jì)的引物，擴(kuò)增出長度約為1000bp的基因片段（圖2-2）利用試劑盒純化回收該片段，將其用連接酶連接到T載體上，轉(zhuǎn)化至大腸桿菌感受中，經(jīng)菌落PCR鑒....

本文編號：4019353