異戊烯基焦磷酸異構(gòu)酶基因玉米遺傳轉(zhuǎn)化及后代性狀分析
發(fā)布時間:2023-12-11 19:47
玉米作為主要的糧食作物,在經(jīng)濟(jì)和農(nóng)業(yè)發(fā)展中占有重要地位。在環(huán)境問題日益突顯、市場競爭白熱化的背景下,傳統(tǒng)玉米育種與生產(chǎn)已不能滿足當(dāng)下社會發(fā)展的需要,因此,利用遺傳工程技術(shù)來改良現(xiàn)有玉米品質(zhì),培育新型的、具有優(yōu)良性狀的玉米品種有著巨大的經(jīng)濟(jì)效益和深刻的現(xiàn)實(shí)意義。類胡蘿卜素在生物機(jī)體中發(fā)揮著重要作用,既參與光復(fù)合體的光捕獲行為,保護(hù)植物免受光氧化損傷,又是重要植物激素脫落酸和維生素A的前體。本研究擬通過遺傳工程技術(shù)將外源基因LcIPI和Bar導(dǎo)入玉米中,豐富玉米營養(yǎng),增強(qiáng)玉米對非生物脅迫的抗性,加大玉米對除草劑草銨膦的耐受程度,降低雜草的競爭效應(yīng),從而提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率,為培育高類胡蘿卜素含量的玉米新品種奠定基礎(chǔ)。本研究采用成熟胚原位轉(zhuǎn)化法將LcIPI轉(zhuǎn)入玉米天塔五母本Hoo-108中,T1代幼苗分別用500 mg·L-1和750 mg·L-1的草銨膦溶液進(jìn)行篩選,PCR檢測后獲得18株T1代陽性植株,自交后收種。將T2代種子種植于海南,三葉期時用750 mg·L-1
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 類胡蘿卜素
1.1.1 類胡蘿卜素生物合成途徑
1.1.2 類胡蘿卜素生物合成途徑中關(guān)鍵酶及其基因
1.1.3 類胡蘿卜素生物合成的調(diào)控作用
1.1.4 類胡蘿卜素生物合成相關(guān)基因在植物基因工程中的應(yīng)用
1.2 轉(zhuǎn)基因玉米的研究現(xiàn)狀
1.2.1 玉米遺傳轉(zhuǎn)化方法
1.2.2 抗除草劑玉米的研究進(jìn)展
1.3 玉米農(nóng)藝性狀的研究進(jìn)展
1.4 本研究的目的、研究內(nèi)容與技術(shù)路線
1.4.1 研究目的
1.4.2 研究內(nèi)容
1.4.3 技術(shù)路線
第2章 玉米成熟胚原位轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因植株的獲得
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 質(zhì)粒和菌株
2.1.3 主要試劑的配制
2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 成熟胚原位轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因玉米的基本操作
2.2.2 轉(zhuǎn)基因植株的分子檢測
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 T0代轉(zhuǎn)基因植株的獲得
2.3.2 T1代轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測
2.3.3 T2代轉(zhuǎn)基因陽性植株種子的收獲
2.4 本章小結(jié)
第3章 轉(zhuǎn)基因玉米后代分子檢測及生理生化分析
3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 種植地點(diǎn)
3.1.3 試驗(yàn)過程
3.1.4 致謝
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 T2及T3代抗性植株的草銨膦篩選與PCR檢測
3.2.2 T3代陽性植株葉片光合速率的測定
3.2.3 T3代類胡蘿卜素總量的測定及高效液相色譜分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 T2代抗性植株的篩選及分子檢測
3.3.2 T2代轉(zhuǎn)基因陽性植株種子的收獲
3.3.3 T3代轉(zhuǎn)基因植株的篩選及分子檢測
3.3.4 T3代轉(zhuǎn)基因植株光合速率的測定
3.3.5 T3代轉(zhuǎn)基因植株葉片總類胡蘿卜素含量測定和HPLC分析
3.4 本章小結(jié)
第4章 轉(zhuǎn)基因玉米后代農(nóng)藝性狀分析
4.1 試驗(yàn)地點(diǎn)
4.2 試驗(yàn)過程
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 轉(zhuǎn)基因玉米陽性植株田間農(nóng)藝性狀的調(diào)查
4.3.2 室內(nèi)考種
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 轉(zhuǎn)基因玉米物候期和生育期的調(diào)查
4.4.2 轉(zhuǎn)基因植株生長性狀調(diào)查
4.4.3 轉(zhuǎn)基因植株穗部性狀調(diào)查
4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝
本文編號:3873253
【文章頁數(shù)】:65 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 文獻(xiàn)綜述
1.1 類胡蘿卜素
1.1.1 類胡蘿卜素生物合成途徑
1.1.2 類胡蘿卜素生物合成途徑中關(guān)鍵酶及其基因
1.1.3 類胡蘿卜素生物合成的調(diào)控作用
1.1.4 類胡蘿卜素生物合成相關(guān)基因在植物基因工程中的應(yīng)用
1.2 轉(zhuǎn)基因玉米的研究現(xiàn)狀
1.2.1 玉米遺傳轉(zhuǎn)化方法
1.2.2 抗除草劑玉米的研究進(jìn)展
1.3 玉米農(nóng)藝性狀的研究進(jìn)展
1.4 本研究的目的、研究內(nèi)容與技術(shù)路線
1.4.1 研究目的
1.4.2 研究內(nèi)容
1.4.3 技術(shù)路線
第2章 玉米成熟胚原位轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因植株的獲得
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 植物材料
2.1.2 質(zhì)粒和菌株
2.1.3 主要試劑的配制
2.1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 成熟胚原位轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因玉米的基本操作
2.2.2 轉(zhuǎn)基因植株的分子檢測
2.3 結(jié)果與分析
2.3.1 T0代轉(zhuǎn)基因植株的獲得
2.3.2 T1代轉(zhuǎn)基因植株的PCR檢測
2.3.3 T2代轉(zhuǎn)基因陽性植株種子的收獲
2.4 本章小結(jié)
第3章 轉(zhuǎn)基因玉米后代分子檢測及生理生化分析
3.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料
3.1.2 種植地點(diǎn)
3.1.3 試驗(yàn)過程
3.1.4 致謝
3.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.2.1 T2及T3代抗性植株的草銨膦篩選與PCR檢測
3.2.2 T3代陽性植株葉片光合速率的測定
3.2.3 T3代類胡蘿卜素總量的測定及高效液相色譜分析
3.3 結(jié)果與分析
3.3.1 T2代抗性植株的篩選及分子檢測
3.3.2 T2代轉(zhuǎn)基因陽性植株種子的收獲
3.3.3 T3代轉(zhuǎn)基因植株的篩選及分子檢測
3.3.4 T3代轉(zhuǎn)基因植株光合速率的測定
3.3.5 T3代轉(zhuǎn)基因植株葉片總類胡蘿卜素含量測定和HPLC分析
3.4 本章小結(jié)
第4章 轉(zhuǎn)基因玉米后代農(nóng)藝性狀分析
4.1 試驗(yàn)地點(diǎn)
4.2 試驗(yàn)過程
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 轉(zhuǎn)基因玉米陽性植株田間農(nóng)藝性狀的調(diào)查
4.3.2 室內(nèi)考種
4.4 結(jié)果與分析
4.4.1 轉(zhuǎn)基因玉米物候期和生育期的調(diào)查
4.4.2 轉(zhuǎn)基因植株生長性狀調(diào)查
4.4.3 轉(zhuǎn)基因植株穗部性狀調(diào)查
4.5 本章小結(jié)
第5章 結(jié)論與展望
5.1 結(jié)論
5.2 展望
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝
本文編號:3873253
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