發(fā)布時(shí)間：2021-03-05 07:05

　　光合效率是影響水稻產(chǎn)量的重要因素。在本實(shí)驗(yàn)室前期研究中,克隆到兩個(gè)水稻高光效基因NRPC1（negative regulator of photosynthesis and chloroplast development 1）和NRPC2（negative regulator of photosynthesis and chloroplast development 2）,通過(guò)酵母雙雜實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)NRPC1與GLK1和GLK2都發(fā)生互作,NRPC2也與GLK1和GLK2發(fā)生相互作用。在此基礎(chǔ)上,通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得glk1glk2突變體、glk1glk2nrpc1突變體和GLK1/GLK2過(guò)表達(dá)材料,將其與NRPC材料進(jìn)行雜交,對(duì)獲得的材料進(jìn)行葉綠素含量測(cè)定及光合相關(guān)基因的表達(dá)分析,確定NRPC與GLK之間的上下游關(guān)系,闡明兩者對(duì)葉綠體發(fā)育和葉綠素合成的調(diào)控機(jī)制;利用RNA-Seq及生物信息學(xué)分析,篩選出受NRPC1基因調(diào)控的下游基因,結(jié)合定量分析檢測(cè)下游相關(guān)基因的表達(dá)量。首先,構(gòu)建GLK1/GLK2的CRISPR/Cas9敲除和過(guò)表達(dá)載體,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù),獲得glk1glk2突變體、glk... 

【文章來(lái)源】：浙江師范大學(xué)浙江省

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

植物光系統(tǒng)I的結(jié)構(gòu)模型

2.2 光系統(tǒng) II光系統(tǒng) II 是多亞基膜復(fù)合物，位于堆積的革蘭氏類囊體區(qū)域[4,62]，藍(lán)藻中的PSII 超復(fù)合物包括 RC 蛋白 PsbA(D1)和 PsbD(D2)，天線亞基 PsbB(CP47)和PsbC(CP43)，膜內(nèi)在小亞基(PsbE，PsbF，PsbH-M，PsbN，PsbX，PsbY，PsbZ 和PsbYcf12)和 3 個(gè)外在亞基(PsbO，PsbU 和 PsbV)(圖 1.2)。

3.3 glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體光合相關(guān)基因表達(dá)及葉綠體觀察對(duì) glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體株系進(jìn)行葉綠素合成及光合相關(guān)基因的定量表達(dá)分析表明，與野生型相比，nrpc1 突變體表達(dá)量顯著高于野生型，但是在 glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體中表達(dá)量遠(yuǎn)低于野生型(圖 2.4A)。通過(guò)電鏡切片技術(shù)觀察葉綠體發(fā)育情況，發(fā)現(xiàn)在葉肉細(xì)胞中，與野生型相比，glk1glk2 和圖 2.3 野生型、nrpc1、glk1glk2 和 glk1glk2nrpc1 突變體表型及葉綠素含量Fig.2.3 WT, nrpc1, glk1/glk2 and glk1/glk2/nrpc1 mutant phenotypes and chlorophyll contentA：成熟期植株；B：葉綠素 a(Chla)，葉綠素 b(Chlb)和類胡蘿卜素(Car)含量；*表示葉綠素含量與野生型顯著不同，t 檢驗(yàn)，*P<0.05，**P<0.01。A: mature plants;B: leaf chlorophyll a(Chla), b(Chlb) and carotenoid content;*Indicates that the chlorophylcontent is significantly different from the WT, t-test,*P<0.05,**P<0.01.WT nrpc1 glk1glk2 glk1glk2nrpc1


本文編號(hào)：3064790