MYB轉(zhuǎn)錄因子在植物的生長發(fā)育和次生代謝調(diào)控中具有重要作用,然而蒲公英中MYB轉(zhuǎn)錄因子尚未見文獻(xiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)從丹東蒲公英中克隆獲得TaMYB59轉(zhuǎn)錄因子,對TaMYB59轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行初步研究評價(jià)。試驗(yàn)具體結(jié)果如下:1.克隆擴(kuò)增獲得了TaMYB59轉(zhuǎn)錄因子基因序列,開放閱讀框（ORF）大小為732bp,編碼243個(gè)蛋白質(zhì)的基因,命名為TaMYB59。該轉(zhuǎn)錄因子有保守結(jié)構(gòu)域R2和R3結(jié)構(gòu)域,是典型的R2R3-MYB家族基因的成員。2.利用qRT-PCR方法對TaMYB59基因表達(dá)量進(jìn)行初步探究,結(jié)果顯示:組織特異性分析結(jié)果顯示TaMYB59在丹東蒲公英中花部位的表達(dá)量最高。在鹽脅迫、水楊酸處理后TaMYB59基因表達(dá)量具有先增加后降低的趨勢,鹽脅迫處理3h后達(dá)與對照組相比提高了22倍,水楊酸處理后3h達(dá)到了14倍,而茉莉酸甲酯處理后,TaMYB59的相對表達(dá)量差異不顯著。3.利用生物信息學(xué)方法對TaMYB59基因進(jìn)行分析,構(gòu)建原核表達(dá)載體pCold-TaMYB59,SDS-PAGE確定獲得的TaMYB59重組蛋白大小為78KDa,與預(yù)測大小符合。對TaMYB59蛋白進(jìn)行亞細(xì)胞定位分析,構(gòu)建... 

【文章來源】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

proANSMYB順式作用元件串聯(lián)和mutant-ANS串聯(lián)Fig.1proANSMYBcis-actingelementseriesandmutant-ANSseries.

TaMYB59目的基因PCR鑒定Fig.2PCRidentificationofTaMYB59targetgene連接T載菌液陽性鑒定：將目的基因TaMYB59轉(zhuǎn)入載體進(jìn)行菌液PCR鑒定，如下圖

圖2 TaMYB59目的基因PCR鑒定CR identification of TaMYB59 ta目的基因TaMYB59轉(zhuǎn)入載體的片段，證明已經(jīng)將目的基

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：2935940