發(fā)布時間：2020-10-10 12:03

　　 微生物廣泛存在于自然環(huán)境中,其活動影響著土壤物質(zhì)轉(zhuǎn)化和植物生長,在農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中發(fā)揮重要作用。煙草是我國經(jīng)濟發(fā)展的重要支柱產(chǎn)業(yè),為避免化肥破壞利用傳統(tǒng)土壤和污染環(huán)境,發(fā)展以微生物農(nóng)業(yè)為核心的“白色農(nóng)業(yè)”十分重要。本試驗以傳統(tǒng)培養(yǎng)的方式分離、16SrDNA的方法鑒定延邊地區(qū)煙草內(nèi)生和根際細(xì)菌,研究品種與地區(qū)之間微生物的多樣性。以Salkowski比色法篩選出具有產(chǎn)IAA能力的促生菌株,并對其液體培養(yǎng)基進(jìn)行優(yōu)化,研究細(xì)菌間互作對煙草種子萌發(fā)和生長的影響,為掌握延邊地區(qū)可利用的促生菌及復(fù)合菌肥的研制,以改善土壤環(huán)境并培育更優(yōu)質(zhì)的煙草奠定基礎(chǔ)。研究主要結(jié)論如下:1、從汪清、和龍、延吉三個地區(qū)分離得到內(nèi)生與根際細(xì)菌共29個屬72株,其中棒狀桿菌屬(Corynebacterium)、不動桿菌屬(Acinetobacter)、沙雷氏菌屬(Serratia)、羅氏菌屬(Rofthiaaeria)、黃桿菌屬(Flavo6bacterfium)、羅丹桿菌屬(Rhodanobacter)僅在汪清地區(qū)中發(fā)現(xiàn),芽孢八疊球菌屬(Sporosarcina)、類節(jié)桿菌屬(Paernarrthrobacter)、短波單胞菌厲(Brevundimonas)僅在和龍地區(qū)中發(fā)現(xiàn),纖維微細(xì)菌屬(Cellloszimicrobium)、SpHingopyxis、類芽抱桿菌屬(Paenibacillus)、志賀氏菌屬(Shinellafusca)、庫克菌屬(AKocuria)、腸桿菌屬(Enterobacter)僅在延吉地區(qū)中發(fā)現(xiàn),芽抱桿菌屬(·Bacillus)、假單胞菌屬(Pseudomonas)在三個地區(qū)煙草與根際土壤中均有發(fā)現(xiàn),為優(yōu)勢菌屬,其中芽孢桿菌屬為最優(yōu)勢菌屬。2、從延邊地區(qū)煙草內(nèi)生和根際土壤分離的細(xì)菌中,具有產(chǎn)IAA能力的有28株,占總菌數(shù)的38.89%,芽孢桿菌屬為優(yōu)勢菌屬,其中菌株m10、m53、m60IAA的單位產(chǎn)量分別為 24.73mg L~(-1)、26.8mg·L~(-1)、22.mg·L~(-1)3、菌株m10、m53、m60分別在72h、24h和48h時IAA產(chǎn)量達(dá)到最大值;添加色氨酸的菌株產(chǎn)IAA含量與對照相比有顯著差異;菌株ml0、m53、m60的最適pH值分別為8、6、6;三個菌株的最適碳源均為淀粉,最適濃度分別為10g.L~(-1)、20g·L~(-1),10g·L~(-1);最適氮源前二者均為蛋白胨、m60為酵母粉,濃度分別為 5g·L~(-1)、20g·L~(-1)、20g·L~(-1);硫酸鎂濃度分別為 10g·L~(-1)、15g·L~(-1)、10g·L~(-1)。4、用響應(yīng)面法優(yōu)化菌株m10、m53、m60液體發(fā)酵培養(yǎng)基,IAA最佳產(chǎn)M的培養(yǎng)基條件如下,碳源濃度分別為11.92g·L~(-1)、19.95g·L~(-1)、15.76g·L~(-1);氮源濃度分別為 20.2g·L~(-1)、20.97g.L~(-1)、10.39g·L~(-1);MgS04 濃度分別為 10.38g·L~(-1)、15.37g·L-I、19.94g·L~(-1);pH 值分別為 7.93、6.16、6.11。三菌株在此條件下產(chǎn) IAA含量分別為 11.16g·L~(-1)、47.16mg·L~(-1)、16.47mg·L~(-1)。5、施用單一菌劑和混合菌劑均能促進(jìn)種子萌發(fā)和幼苗生長,與不施加促生菌的對照相比,種子發(fā)芽勢、發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)分別增加了 30.61%、8.36%、31.13%、36.9%,苗長和根長分別增加了 11.37%和57.11%,其中T6處理即菌株m53和m60混合施用對煙草種子和幼苗生長效果最好。
【學(xué)位單位】：延邊大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：S572
【部分圖文】：

注：“Ｇ”代表根，？？？！”代表莖，“Ｙ”代表葉子??＊Ｇ＇?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?ｔｈｅ?ｒｏｏｔ．＊Ｊ＇?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?ｔｈｅ?ｓｔｅｍ，?＇Ｙ＇?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?ｔｈｅ?ｌｅａｖｅｓ??從圖２．１可以看出，從煙草不同組織分離出的內(nèi)生菌符合根＞莖＞葉的分布規(guī)??律，其中從根中分離出的內(nèi)生菌占總數(shù)的４９％，從莖中分離出的內(nèi)生菌占３０％，??葉占總數(shù)的２１％

應(yīng)見表４．３，結(jié)果表明，３株菌株間均不發(fā)生拮抗反應(yīng)，各菌株可以混合培養(yǎng)不??產(chǎn)生拮抗。??？?表３．３．菌株拮抗作用測試??Ｔａｂｌｅ４．３．?Ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ?ｔｅｓｔ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ??ｍｌＯ?ｍ５３?ｍ６０??ｍｌＯ?－?－??ｍ５３?＿?－??ｍ６０?－?－??注：表示有拮抗反應(yīng)；表示無拮抗反應(yīng)??３．５．４培養(yǎng)時間對菌株產(chǎn)ＩＡＡ能力的影響??由圖３．１可以看出，Ｔ２處理生長最快２４ｈ菌濃度即可達(dá)到最大值，Ｔ１次之??３６ｈ達(dá)到菌濃度最高值，而Ｔ３處理生長較為緩慢，即４８ｈ才能達(dá)到最大菌濃度，??Ｔ４？Ｔ５處理在６０ｈ后達(dá)到穩(wěn)定階段，混合菌培養(yǎng)菌濃度要大于單菌培養(yǎng)的菌濃度，??證明三株菌株之間有相互促進(jìn)生長的作用。??

ＰＨ值?ｐＨ值??圖３．４?ｐＨ值對菌株及組合產(chǎn)ＩＡＡ能力的影響??Ｆｉｇ．３．４?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｐＨ?ｏｎ?ＩＡＡ?ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ?ａｂｉｌｉｔｙ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?ａｎｄ?ｉｔｓ?ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ??３．?７．?７碳源對菌株產(chǎn)ＩＡＡ能力的影響??從圖３．５和圖３．６中可以看出，Ｔ１、Ｔ２、Ｔ３處理的最佳碳源為淀粉，Ｔ１處??理在Ｃ源濃度為ｌＯｇｌ－１時的產(chǎn)素含量顯著高于其他處理；Ｔ２處理在Ｃ源濃度為??ｌＯｇｉ－１時產(chǎn)素顯著高于其他處理；Ｃ源濃度對Ｔ３產(chǎn)素的影響不是很大，在１０、??１５、２０、２５８．１＾的濃度下產(chǎn)素?zé)o顯著差異。菌株混合培養(yǎng)組合處理中，Ｔ４處理??和Ｔ６處理的最佳碳源均為麥芽糖，分別在Ｃ源濃度為ｂｇ＇Ｌ－１和ａＯｇ?Ｌ－１的條件??下的產(chǎn)素顯著大于其他濃度；Ｔ５處理最佳碳源為淀粉，在Ｃ源濃度為ＩＳｇ?Ｌ－１??條件下產(chǎn)素顯著大于其他濃度，Ｔ５處理雖沒有其他組合產(chǎn)素多，但產(chǎn)素較組成??Ｔ５組合的單菌株產(chǎn)素要多；Ｔ７處理的最佳碳源為甘露醇，其產(chǎn)素能力受Ｃ源??濃度影響不顯著。??Ａ?ＱＴｌ?Ｒ?Ｅ３Ｔ４??ＨＴ２?２〇〇?？?Ｊ?Ｑ?�。�??８〇－?Ｃ?１?嘆日?�。�?國?ＳＴ６??Ｌ?｜?｜?Ｌ１５。－卜?ａ?ｂ?ＱＴ７??＾６０?＇?｜?Ｓ?ｄ?筆蘭?！】Ｊ?＿＿?？??今?＼?＼?｜?＿?Ｉ＇ｃｈ）?
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2835164