【摘要】：歐洲繳草(Valeriana oficinalis L.s.l.)以根及根莖入藥,具有鎮(zhèn)靜安神、解攣止痛、抗抑郁和抗腫瘤、抗心律失常和胃腸平滑肌解痙等藥理活性,近年來,隨著人們生活節(jié)奏的加快,生活壓力的增大,失眠、抑郁癥和腫瘤等疾病越來越多,對纈草提取物及其制劑的需求日益增加。但是野生纈草資源急劇下降,自然生長和人工栽培的纈草,根系生長緩慢,而活性成分主要存在于纈草的根系中。因此,利用組織培養(yǎng)技術(shù)大量繁殖歐洲纈草不定根,以其不定根作為藥材原材料是解決纈草提取物及其制劑供應不足問題的有效手段。本研究以歐洲纈草種子為材料培養(yǎng)無菌苗,以無菌苗的莖、葉為外植體誘導不定根,經(jīng)繼代和增殖后選擇粗細均勻的不定根探討生長素、培養(yǎng)基種類、pH、碳源種類、糖濃度、鹽濃度、總N濃度和總P濃度等因素對不定根懸浮培養(yǎng)的影響,得到不定根懸浮培養(yǎng)的優(yōu)化條件,初步建立不定根高效培養(yǎng)的體系,考察此體系下不定根的生長狀況以及纈草三酯、乙酰纈草三酯和纈草烯酸的含量,為進一步利用生物反應器獲得有效成分高產(chǎn)的歐洲纈草不定根系奠定基礎。研究結(jié)果表明:1、在不同消毒劑和消毒時間組合處理中,用4%的NaClO溶液浸10 min,種子無污染,發(fā)芽率最高達76%。2、歐洲纈草不定根誘導的理想條件是:外植體為莖段,培養(yǎng)基MS+0.5 mg·L-1 NAA。3、歐洲纈草不定根懸浮培養(yǎng)的理想條件是:2倍大量元素、48.46 mmol·L-1總N濃度、1.5mmo·L-1總P濃度的RCM培養(yǎng)基,添加蔗糖40g·L-1,NAA0.5 mg·L-1,pH=5.7,第28d宜收獲或繼代培養(yǎng)。4、理想體系下培養(yǎng)的正常不定根中3種有效成分的含量較高,纈草三酯為7.222mg·g-1,纈草烯酸為4.016mg·g-1,乙酰纈草三酯為0.355 mg·g-1,纈草烯酸的含量高于二年生栽培根。
【學位授予單位】：延邊大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S567.239
【圖文】：

逡逑根數(shù)最多但較細短（圖３－２－Ｆ）。從數(shù)據(jù)和圖片綜合來看，不論是外植體為莖段逡逑還是外植體為葉片，４號培養(yǎng)基生根率、總根數(shù)最高且不定根生長旺盛、粗長，逡逑與其它培養(yǎng)基均達到差異顯著性水平（Ｐ＜0．0５），說明４號培養(yǎng)基是ＮＡＡ誘導不逡逑定根的理想培養(yǎng)基

隨ＩＡＡ濃度的增加不定根生根率先降低后稍有增加，之后又大幅度降低，逡逑當ＩＡＡ濃度為０．０５邋ｍｇ＇Ｌ－１時，生根率最高，達８０．５６％，并且生根數(shù)較多，生長逡逑旺盛、不定根粗長（圖３－３－Ａ）；以葉為外植體時，隨ＩＡＡ濃度的增加不定根生逡逑根率先增加后降低

即邋ＭＳ＋０．０５邋ｍｇ．Ｌ－１邋ＩＡＡ。逡逑ＴＴ逡逑圖３－３不同濃度ＩＡＡ誘導的不定根（外植體為莖段）逡逑Ｆｉｇ．邋３－３邋Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ邋ｒｏｏｔｓ邋ｉｎｄｕｃｅｄ邋ｂｙ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ邋ＩＡＡ邋（ｅｘｐｌａｎｔｓ邋ａｒｅ邋ｓｔｅｍｓ）逡逑注：圖中大寫英文寧叼表示不同的生長素濃度ＡＯ．ＯＳｍｇ邋Ｌ／１邋：Ｂ０．１邋ｎｉｇ邋Ｌ－１邋ｉＣＣＵｍｇ邋Ｌ－１邋〖ＤＯ．Ｓｍｇ邋ｌ／ｈＥ邋１．０逡逑ｍｇ－Ｌ＊１邋：邋Ｆ邋２．０邋ｍｇ－Ｌ＇１邋0逡逑「ｒｒｎｎａ逡逑圖３－４不同濃度ＩＡＡ誘導的不定根（外植體為葉片）逡逑Ｆｉｇ．邋３－４邋Ａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓ邋ｒｏｏｔｓ邋ｉｎｄｕｃｅｄ邋ｂｙ邋ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ邋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ邋ｏｆ邋ＩＡＡ邋（ｅｘｐｌａｎｔｓ邋ａｒｅ邋ｌｅａｖｅｓ）逡逑丨外Ｐ大寫英文卞叮表小不同的生長素濃度ＡＯＭｎｉｇ邋Ｌ／１邋？丨ｍｇ邋Ｌ／１〔ＣＯＪｎｉｇ邋Ｌ－１邋：Ｉ）０．５ｍｇ邋Ｌ“：Ｅ邋１．０逡逑ｎｉｇ邋Ｉ邋＇＇邋；邋１：邋２．０邋ｍｇ邋１逡逑３．３．３不同丨ＢＡ濃度及外植體類型對歐洲纈草不定根誘導逡逑不同ＩＢＡ濃度與外植體類型對不定根誘導效果見表３－３，當以莖段為外植體逡逑T，隨ＩＢＡ濃度的增加不定根生根率呈逐漸降低的趨勢，當ＩＢＡ濃度為０．０５逡逑ｍｇ．Ｌ－１時，生根率最高，達８３．３３％，并且生根數(shù)多，不定根生長旺盛且粗長（圖逡逑３－５－Ａ），與其它濃度有極顯著性差異（Ｐ＜０．０１）；以葉為外植體時，隨ＩＢＡ濃度逡逑的增加不定根生根率先增加后降低，當ＩＡＡ濃度為０．１邋ｍｇ邋ｌ／１時，不定根生根率逡逑eA高

【參考文獻】

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本文編號：2804564