馬鈴薯枯萎病是馬鈴薯主要土傳真菌病害之一,已成為限制我國馬鈴薯產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的重要因素之一。菌株ZF128是本實驗室從馬鈴薯根際土壤分離篩選得到的一株對馬鈴薯枯萎病菌具有顯著抑制效果的生防細菌。經(jīng)生理生化、BIOLOG GENIII和系統(tǒng)發(fā)育樹分析,鑒定菌株ZF128為貝萊斯芽胞桿菌Bacillus velezensis。抑菌譜測定結(jié)果顯示,ZF128對5種病原真菌和5種病原細菌都具有顯著拮抗效果。光學(xué)顯微觀察發(fā)現(xiàn),菌株ZF128處理的病原菌菌絲生長受到抑制并出現(xiàn)膨脹變粗現(xiàn)象。發(fā)酵試驗表明,菌株ZF128在甘露醇培養(yǎng)基中發(fā)酵上清液對馬鈴薯枯萎病菌的抑制效果最好。盆栽試驗結(jié)果證明,接種菌株ZF128后馬鈴薯發(fā)病明顯減輕,防效為82.46%。此外,定殖和促生試驗表明,菌株ZF128能在馬鈴薯根際和根部有效定殖30d以上,處理組馬鈴薯株高、根長、地上部和地下部鮮重及葉綠素含量等指標均顯著高于對照組。綜上,菌株ZF128生防性狀優(yōu)良,是一株具有潛在應(yīng)用價值的芽胞桿菌。

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圖1 對峙菌絲形態(tài)觀察

菌株ZF128在LB培養(yǎng)基上形成乳白色、邊緣帶有褶皺的不規(guī)則近圓形菌落。生理生化測定結(jié)果表明，菌株ZF128為革蘭氏陽性菌，適宜生長溫度為28℃～37℃，在NaCl含量1%～8%均可以生長，有游動性。接觸酶、V-P、淀粉水解和明膠液化反應(yīng)為陽性，檸檬酸鹽利用和硝酸鹽還原反應(yīng)為陰....

圖2 菌株ZF128雙基因系統(tǒng)發(fā)育分析

以菌株ZF128基因組DNA為模板，分別擴增16SrDNA和gyrB基因片段，16SrDNA序列經(jīng)BLAST比對發(fā)現(xiàn)，ZF128與大多貝萊斯芽胞桿菌一致性較高；同時基于菌株16SrDNA和gyrB基因構(gòu)建雙基因系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果表明菌株ZF128與貝萊斯芽胞桿菌聚類....

圖3 貝萊斯芽胞桿菌ZF128不同培養(yǎng)基發(fā)酵液對馬鈴薯枯萎病菌抑制率比較

比較分析了ZF128在6種培養(yǎng)基中發(fā)酵上清液對尖孢鐮刀菌的抑制效果結(jié)果表明，與對照相比，添加發(fā)酵上清液的平板上尖孢鐮刀菌生長受到抑制，添加比例越高，菌絲受到抑制的程度越大。6種培養(yǎng)基中，以3種不同比例添加玉米粉+魚粉培養(yǎng)基發(fā)酵上清液后對尖孢鐮刀菌的抑制效果較差，抑制率低于20%；....

圖4 貝萊斯芽胞桿菌ZF128rif+在馬鈴薯根際土壤定殖動態(tài)

定殖試驗結(jié)果表明，ZF128rif+可以在馬鈴薯根際土壤和根部有效定殖。在根際土壤中的定殖量隨馬鈴薯生長期延長呈現(xiàn)逐漸降低的趨勢，接種1d定殖量最大，可達3.3×106cfu/g,7d后趨于穩(wěn)定，定殖量為1×105cfu/g（圖4）。在根部的定殖量呈現(xiàn)“先增后減”的趨勢，....

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