發(fā)布時間：2024-05-12 05:00

　　近年來黃櫨枯萎病在我國華北多地發(fā)生,引起葉片萎蔫,甚至全株死亡,已造成嚴重的經(jīng)濟和生態(tài)效益損失。黃櫨枯萎病的病原為大麗輪枝菌(Verticillium dahliae Kleb.),是一種土傳性植物病原真菌。大麗輪枝菌形成的微菌核是一種抗逆性極強的休眠結(jié)構(gòu),在侵染循環(huán)中發(fā)揮非常重要的作用,因此,闡明微菌核形成機制對揭示黃櫨枯萎病發(fā)病規(guī)律和制定有效防治措施具有重要的理論意義和實踐價值。該病原菌Kss1-MAPK信號途徑的Vd Ste11和Vd Ste7已被證實調(diào)控微菌核形成和致病過程,而VdKss1的生物學(xué)功能尚不明確。本研究采用功能基因組學(xué)研究方法開展了黃櫨枯萎病菌VdKss1的生物學(xué)功能分析。主要結(jié)果如下:1.黃櫨枯萎病菌VdKss1影響分生孢子的形成:VdKss1的缺失不會影響生物量,但會導(dǎo)致分生孢子的產(chǎn)量增多和氣生菌絲減少。2.黃櫨枯萎病菌VdKss1調(diào)控黑色素化微菌核的形成:敲除VdKss1導(dǎo)致了病原菌微菌核結(jié)構(gòu)的缺陷,微菌核變小,且黑色素的積累明顯減少。3.黃櫨枯萎病菌VdKss1敲除突變體喪失致病性:VdKss1的缺失導(dǎo)致突變體不能形成侵染結(jié)構(gòu),無法穿透賽璐玢膜和洋蔥表皮組...

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1MAPK信號通路示意圖

K（MAPkinasekinasekinase）、MAPKK又稱MAP2K（MAPkinasekinase）和MAPK組成的級聯(lián)信號通路（圖1-1），通過蛋白激酶上保守的絲氨酸/蘇氨酸殘基的磷酸化和去磷酸化進行信息的級聯(lián)傳遞(Widmannetal.,1999)。被活化的MAPK....

圖3-1常見病原真菌中Kss1基因系統(tǒng)發(fā)育分析

結(jié)果與分析213結(jié)果與分析3.1VdKss1的鑒定與敲除3.1.1VdKss1的鑒定和生物信息學(xué)分析通過基因同源搜索，在大麗輪枝菌的基因組數(shù)據(jù)庫JGI（https://genome.jgi.doe.gov/Verda1/Verda1.home.html）中發(fā)現(xiàn)一個與酵母Kss1同....

圖3-2VdKss1的敲除和突變體的篩選A.Split-marker的基因敲除方法；B.DNA水平PCR篩選突變體；C.cDNA水平PCR驗證突變體Fig.3-2DeletionofVdKss1andidentificationofthegenedeletionmutantsA.Split-markermethodfordeletionofVdKss1;B.ScreeningofVdKss1mutantsbygenomicPCR;

黃櫨枯萎病菌VdKss1的功能研究22水平的PCR篩選，結(jié)果顯示：在21和84號轉(zhuǎn)化子中，基因內(nèi)部引物不能擴增出條帶；而外部引物在21和84號轉(zhuǎn)化子DNA中擴增出大小為1950bp的條帶，條帶長度大于野生型DNA中擴增出的條帶，說明21和84號轉(zhuǎn)化子的基因組中的VdKss1基因已....

圖3-3VdKss1對黃櫨枯萎病菌菌落形態(tài)的影響

結(jié)果與分析233.2VdKss1參與調(diào)控菌絲生長和微菌核形成3.2.1VdKss1調(diào)控黃櫨枯萎病菌的菌落形態(tài)為了探索VdKss1對黃櫨枯萎病菌的基礎(chǔ)形態(tài)是否存在調(diào)控作用，對所獲得的基因敲除突變體進行了細致的形態(tài)學(xué)方面的觀察。圖3-3VdKss1對黃櫨枯萎病菌菌落形態(tài)的影響A.野生....

本文編號：3970900