黃瓜花葉病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)是經(jīng)濟(jì)危害最為嚴(yán)重的植物病毒之一。CMV屬于雀麥花葉病毒科(Bromoviridae)、黃瓜花葉病毒屬(Cucumovirus)的典型成員,其基因組由3條正義、單鏈的RNA組成。該病毒由其基因組RNA1和RNA2編碼的復(fù)制酶組分1a和RdRp蛋白通過(guò)招募寄主因子,在液泡膜上形成復(fù)制復(fù)合體(VRC,viral replication complex)進(jìn)行病毒的復(fù)制。研究至今,有關(guān)參與調(diào)控CMV復(fù)制的寄主因子的研究相當(dāng)有限。因此,鑒定和分析參與CMV復(fù)制的寄主因子對(duì)于解析CMV復(fù)制的分子機(jī)理具有一定的研究意義�；贑MV在液泡膜上復(fù)制的特性,本論文首先通過(guò)制備健康和CMV侵染的煙草原生質(zhì)體,進(jìn)而通過(guò)分離原生質(zhì)體中的液泡,成功獲得相當(dāng)量的液泡樣品。然后,通過(guò)超速離心富集液泡膜,利用LC/MS-MS技術(shù)對(duì)液泡膜蛋白進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。結(jié)果顯示:在Mock樣品中檢測(cè)到2種CMV樣品中未檢測(cè)到的寄主蛋白,而在CMV侵染的樣品中則檢測(cè)到35種病毒特異的寄主蛋白。蛋白種類(lèi)的增加很可能與病毒在液泡膜上復(fù)制有關(guān)。我們通過(guò)蛋白種類(lèi)的比較和多肽數(shù)目的...

【文章頁(yè)數(shù)】：60 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1正鏈RNA病毒的復(fù)制循環(huán)

圖1.1正鏈RNA病毒的復(fù)制循環(huán)Schematicinfectioncycleofpositive-senseR寄主蛋白因子能選擇性地結(jié)合病毒RNA，從而影響胞過(guò)程中需要精確的調(diào)節(jié)宿主生化途徑復(fù)制需要募集病毒基因組RNA，病毒和1.1)。參與病毒復(fù)制的寄主....

圖1.2CMV基因組結(jié)構(gòu)

的構(gòu)成及其功能為29nm的二十面體顆粒結(jié)構(gòu)，由180個(gè)亞單位RNA組成，其基因組包含3條正義單鏈RNAN端具有甲基轉(zhuǎn)移酶結(jié)構(gòu)域和C端具有解旋酶結(jié)亞基因組RNA4A編碼2b蛋白。2a蛋白為依賴(lài)ndentRNApolymerase,RdR....

圖2.2Western檢測(cè)病毒CP蛋白

圖2.2Western檢測(cè)病毒CP蛋白FIG2.2DetectingofvirusCPproteinsbyWesternb分離的結(jié)果，我們首先從Mock和CMV侵染的（圖2.3）。然后，通過(guò)超速離心對(duì)原生質(zhì)體速分離后的液泡分層情況如圖2.4....

圖2.5顯微鏡觀察分離的液泡FIG2.5ObservationofvacuoleunderMicroscope

圖圖2.5顯微鏡觀察分離的液泡FIG2.5ObservationofvacuoleunderMicroscope們利用煙草作為測(cè)試植物，通過(guò)農(nóng)桿菌注射的方法進(jìn)MV強(qiáng)毒株的侵染很可能會(huì)影響液泡的正常發(fā)育，因S-CMV侵染煙草。LS-CMV侵染煙草并沒(méi)有引起明顯的....

本文編號(hào)：3968435