美國白蛾Hyphantria cunea(Drury),屬鱗翅目(Lepidoptera)、燈蛾科(Arctiidae)、白蛾屬(Hyphantria),是一種重要的入侵害蟲,對我國森林資源和農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)造成重大危害。幾丁質(zhì)脫乙酰酶(Chitin deacetylase,CDA)屬糖酯酶4家族,是一種幾丁質(zhì)胞外修飾酶,參與昆蟲體內(nèi)幾丁質(zhì)代謝。本研究以美國白蛾為研究對象,分析幾丁質(zhì)脫乙酰酶的生化特性和生物學(xué)功能,為開發(fā)新型生防靶標(biāo)提供理論依據(jù)。具體研究結(jié)果如下:1.利用RACE-PCR技術(shù),結(jié)合美國白蛾中腸轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)庫,分離克隆了hccda1(KF975504)、hccda2a(KT781841)、hccda2b(KT781842)和hccda4(KX822766)基因。開放閱讀框分別為1632 bp、1629 bp、1611 bp和1494 bp,編碼543、542、536和497個氨基酸,預(yù)測蛋白分子量為62 kDa、61 kDa、61 kDa和56 kDa,等電點為4.75、5.20、5.27和5.11,N-端包含信號肽序列,含有多個N-糖基化位點以及5個保守基序。HcCDA1、Hc...

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圖1-1RNA干擾作用機(jī)制Fig.1-1MechanismofactionofRNAinterference

圖1-1RNA干擾作用機(jī)制Fig.1-1MechanismofactionofRNAinterference.2.2昆蟲dsRNA的導(dǎo)入方法目前，將dsRNA導(dǎo)入昆蟲體內(nèi)主要包括注射、浸泡和飼喂三種方法。其中，注射法是為常用的導(dǎo)入方法，該方法精確度高、干....

圖1-2免疫熒光技術(shù)的操作流程

美國白蛾幾丁質(zhì)脫乙酰酶HcCDAs的生化特性分析及功能研究roticavirgiferavirgiferaLeconte）自身基因的dsRNA在抗蟲作物中表達(dá)，取得良好0]。目前，RNAi技術(shù)在實驗室操作已經(jīng)很成熟，在田間應(yīng)用的可行性還有待進(jìn)一免疫熒光技術(shù)疫熒光技....

圖2-1hcactin基因的PCR擴(kuò)增Fig.2-1PCRamplificationofhcactingene

美國白蛾幾丁質(zhì)脫乙酰酶HcCDAs的生化特性分析及功能研究結(jié)果與分析1hcactin基因的克隆與原核表達(dá).1hcactin基因的克隆以合成的cDNA第一鏈為模板，設(shè)計引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到大小約為600bp的hca段（圖2-1-A），測序，NCB....

圖2-2hcactin基因核苷酸序列及推測的氨基酸序列

22圖2-2hcactin基因核苷酸序列及推測的氨基酸序列Fig.2-2Nucleotidesequenceanddeducedaminoacidsequenceofhcactingene起始密碼子ATG和終止密碼子TAA分別用“=”標(biāo)示，肌動蛋....

本文編號：3920931