根結(jié)線蟲(Root-knotnematodes,RKNs)是一種重要的植物寄生線蟲,能夠侵染5500多種植物,給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。利用寄主抗性、生防真菌是防治南方根結(jié)線蟲經(jīng)濟(jì)有效的途徑。在世界范圍內(nèi),能夠克服抗線蟲基因(Mi-,Me3)的南方根結(jié)線蟲毒性種群在許多作物種植地都有發(fā)現(xiàn),效應(yīng)子在植物寄生性線蟲與寄主的分子互作中起著關(guān)鍵作用。在自然條件下R基因的持久性與非毒性效應(yīng)子的產(chǎn)生、變異及丟失緊密相關(guān),鑒定根結(jié)線蟲效應(yīng)子,揭示其對(duì)寄主免疫抑制機(jī)理、致病機(jī)制,對(duì)于發(fā)現(xiàn)新的殺線蟲藥物靶標(biāo)及抗性基因的持久利用具有重要意義。本研究包括兩部分:第一部分以南方根結(jié)線蟲為研究對(duì)象,篩選和鑒定非毒性、Me3毒性種群特異的效應(yīng)子;第二部分研究以植物內(nèi)生菌交枝頂孢為研究對(duì)象,揭示其對(duì)南方根結(jié)線蟲的生防機(jī)制。研究結(jié)果如下:南方根結(jié)線蟲非毒性群體、Me3毒性群體特異效應(yīng)子的篩選及功能鑒定1.對(duì)南方根結(jié)線蟲非毒性群體(Avir)、Me3毒性種群(Vir)進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,通過比較兩個(gè)近等基因系的轉(zhuǎn)錄組,共發(fā)現(xiàn)1863個(gè)差異表達(dá)基因,其中Avir中1330個(gè)、Vir中533個(gè);利用SignalP v4....

【文章頁數(shù)】：113 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２．１?ｐＧＲ１０７表達(dá)載體構(gòu)建示意圖??Ｆｉｇ．?２．１?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＧＲ１０７?ｖｅｃｔｏｒ??

ＡＳＹ－Ｍｉｎｃ０３８６７質(zhì)粒，回收目的基因酶切片段；Ｃ／ａ?Ｉ－Ｓａ／Ｉ酶切ｐＧＲ１回收線性載體片段；Ｔ４?ＤＮＡ連接酶連接（體系如下表），１６°Ｃ連接過轉(zhuǎn)化入大腸桿菌ＴｏｐｌＯ感受態(tài)細(xì)胞，涂布到含有卡那霉素的ＬＢ平板上，培養(yǎng)１６ｈ；挑取克隆，ＰＣＲ和測(cè)序鑒定獲得陽性克隆，構(gòu)建....

圖２．２?ｐＥＤＶ表達(dá)載體構(gòu)建示意圖??

圖２．２?ｐＥＤＶ表達(dá)載體構(gòu)建示意圖??Ｆｉｇ．?２．２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＥＤＶ?ｖｅｃｔｏｒ??２．２．１１．２谷枯菌注射??（１）谷枯菌感受態(tài)細(xì)胞參考農(nóng)桿菌感受態(tài)細(xì)胞制作方法，將上述構(gòu)建好的載體??電擊轉(zhuǎn)化入谷枯菌，涂布到含有慶大霉素（５〇ｎｇ／ｍ....

圖２．３?ｐＴＶ－Ｍｉｎｃ０３８６７沉默載體示意圖??Ｆｉｇ．?２．３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＴＶ－Ｍｉｎｃ０３８６７?ｖｅｃｔｏｒ??

５’—?Ｈｉｎｄ?ＩＩＩ?ＡｖｒＲＰＳ４?Ｓａｉｌ?—＾—?ＢａｍＢｌ?ＨＡ?咖ＲＩ?—?３．，??ｐＥＤＶ載體簡圖??圖２．２?ｐＥＤＶ表達(dá)載體構(gòu)建示意圖??Ｆｉｇ．?２．２?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＥＤＶ?ｖｅｃｔｏｒ??２．２．１１．２谷枯菌注射??（１....

圖２．４ｐＳＵＣ２－Ｍｉｎｃ０３８６７表達(dá)載體示意圖??Ｆｉｇ．?２．４?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＳＵＣ２－Ｍｉｎｃ０３８６７?ｖｅｃｔｏｒ??

?Ｍｉｎｃ０３８６７?—?ｐ??圖２．３?ｐＴＶ－Ｍｉｎｃ０３８６７沉默載體示意圖??Ｆｉｇ．?２．３?Ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｐＴＶ－Ｍｉｎｃ０３８６７?ｖｅｃｔｏｒ??２．２．１２．２農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化??采用電擊轉(zhuǎn)化的方法，將構(gòu)建正確的基因沉默載體轉(zhuǎn)化至農(nóng)桿菌ＧＶ....

本文編號(hào)：3903564