現(xiàn)代植物病毒學(xué)的發(fā)展歷經(jīng)了幾百年,新時代的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)要求越來越高,但是形勢卻趨于復(fù)雜。這要求植物病毒檢測手段以及操作方法要快速、靈敏、準(zhǔn)確與簡便。其中血清學(xué)檢測方法就是眾多檢測方法中的一種行之有效的檢測技術(shù)。本研究針對目前國內(nèi)發(fā)生較為頻繁的三種植物病毒病,利用病毒外殼蛋白原核表達(dá)的方法制備多克隆抗體,并建立了相應(yīng)的病毒檢測體系,以用于后續(xù)三種病毒的檢測鑒定工作。番茄褪綠病毒(Tomato chlorosis virus,ToCV)是長線形病毒科(Closteroviridae)毛形病毒屬(Crinivirus)的成員。其基因組是二分體線形正單鏈RNA,外殼蛋白基因位于RNA2上。ToCV寄主種類多種多樣且覆蓋范圍廣泛,全世界范圍內(nèi)都曾暴發(fā)流行,造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。由于其傳毒媒介的廣泛性,以及感病植株初始癥狀的不明顯,導(dǎo)致了其難以防治。鑒別ToCV的方法有多種,大致有目測法、RT-PCR檢測方法、組織印跡雜交法及血清學(xué)檢測方法。本研究利用山東壽光田間采集的病樣,利用RT-PCR的方法將擴增的病毒外殼序列與載體連接來構(gòu)建番茄褪綠病毒外殼蛋白基因表達(dá)載體,用原核表達(dá)純化過的重組蛋白作為抗原,多...

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＴｏＣＶＲＮＡｌ基因組結(jié)構(gòu)示意圖（２０）??

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圖２－ｌ?ＢＣＭＶ基因組結(jié)構(gòu)圖??：－

會產(chǎn)生一個比較大的多聚蛋白的前體，經(jīng)過加工就會形成功能多樣的成熟蛋白。從５＇??端至?３，端依次編碼?Ｐｌ、ＨＣ－Ｐｒｏ、Ｐ３、６Ｋ１、Ｃｌ、６Ｋ２、ＮＩａ－ＶＰｇ、ＮＩａ－Ｐｒｏ、Ｎｉｂ、ＣＰ??的蛋白，結(jié)果如圖２－１所示。??８??

圖３－１辣椒感病圖

以參考閣３－１所示。在一些植株上的嫩莖會出現(xiàn)有壞死條紋，癥狀有點像被ＰＢＮＶ感??染般。如若是番茄被感染，會出現(xiàn)的沾狀表觀葉片和果實上會Ｍｉ現(xiàn)褪綠和壞死斑。感??病的番茄會從生長尖端開始壞死，芽的部分開始壞死，癥狀如圖３－２所示，果實變色，??表面上有圓心環(huán)斑。??關(guān)＿??圖３－....

本文編號：3903542