DNA甲基化是植物生長發(fā)育過程中的重要表觀遺傳修飾形式,調(diào)控基因組穩(wěn)定性和功能可逆性。對擬南芥的研究表明,由DNA去甲基化酶基因調(diào)控的甲基化水平在植物抗病防衛(wèi)中具有重要作用,但有關(guān)調(diào)控機制還有待深入研究。細菌性條斑病(簡稱細條病)是水稻的檢疫性病害。水稻的細條病抗性屬于水平抗性,目前對其抗性機理還知之甚少。本研究從DNA甲基化角度出發(fā),探索水稻去甲基化酶基因OsRos1在細條病抗性中的調(diào)控作用,以期加深對水稻細條病抗性遺傳基礎(chǔ)的了解,為深入研究OsRos1對細條病抗性的調(diào)控機制奠定基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:(1)基于水稻公共數(shù)據(jù)庫資源,利用生物信息學(xué)方法分析了OsRos1基因家族,發(fā)現(xiàn)其4個同源基因(OsRos1a,OsRos1b,OsRos1c和OsRos1d)都含有DNA糖基化酶結(jié)構(gòu)域和4Fe-4Se結(jié)構(gòu)域,均參與基因表達的表觀遺傳調(diào)控的生物學(xué)過程,在水稻幼苗、葉、花和種子中均有表達,其中OsRos1a和OsRos1c在水稻葉片中的表達較高,OsRos1b在葉片中表達量較低,而OsRos1d幾乎不表達。(2)利用qRT-PCR分析了OsRos1基因家族對細條病菌侵染的表達響應(yīng),結(jié)果發(fā)現(xiàn),...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１?ＶＫ００５－０１質(zhì)粒圖譜??Ｆｉｇ．?１?ＶＫ００５－０１?Ｐｌａｓｍｉｄ?ｐｒｏｆｉｌｅ??２．２．４?ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９介導(dǎo)的突變體鑒定??

達情況及對細條病侵染的響應(yīng)情況，選擇對細條病菌響應(yīng)明顯的??心／基因家族成員，并采用ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９系統(tǒng)將其敲除。從水稻數(shù)據(jù)庫中下??載相應(yīng)基因的ＣＤＳ序列，根據(jù)ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９基因敲除和編輯試劑盒（北京唯尚??立德生物科技有限公司，Ｃａｔａｌｏｇ．Ｎｏ．ＶＫ００５－....

圖２植物去曱基化酶ＲＯＳｌ的氨基酸序列聯(lián)配??Ｆｉｇ．?２?Ａｍｉｎｏ?ａｃｉｄ?ｓｅｑｕｅｎｃｅ?ａｌｉｇｎｍｅｎｔ?ｏｆ?ｄｅｍｅｔｈｙｌａｓｅ?ＲＯＳ１?ｉｎ?ｐｌａｎｔ??

ＡｆＨＮＧＴＭＰＴＰＮＳＴＰＬ?１５２３??ＯｓＲＯＳｌｃ?ＴＫＳＫＰ？ｒ－ＩＡ｜ｐＫＲＳＥ｜ＫＨＦＡＳＡＦＡＳＡＲＬＡＬＰＳＰＱＤＫＲＬｒａＫＳＮＱＦＤＦＯＴＧＴＭＰＴＰＫＳＴＰＬ?１０９Ｓ??ＯｓＲＯＳｌａ?ＴＫＳＫＰ＾ＷａＩｐＫＰＡｅＩｋＨＦＡＳＡＦＡＳＡＲＬＡＬＰＧＰＥＥ....

圖７?的突變類型??Ｆｉｇ．?７?Ｍｕｔａｔｉｏｎ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?６＾似／々??２０??

?結(jié)果￣分析???３．３基因敲除的突變類型??根據(jù)和的基因結(jié)構(gòu)設(shè)計ＣＲＴＳＰＲ／Ｃａｓ９基因敲除的靶點序??列（圖６）?，?６�。担罚克啤陌悬c序列（ＴＴＴＧＣＴＡＧＡＡＡＴＣＴＡＴＧＣ）位于該基因的??第一外顯子，的靶點序列（ＣＣＴＴＴＣＣＡＣＡＧＧＣＡＧＣＣＣ）位于該基因的....

圖８?Ｏｓｖ＾．ｒＡ．的突變類型??Ｆｉｇ．?８?Ｍｕｔａｔｉｏｎ?ｔｙｐｅｓ?ｏｆ?ＯｓＲｏｓＩｃ??

ＣＡＧＧＣＡＧＣＣＣＴＧＧＴＧＧＣＧ??突?Ｓ５０－３０?ＣＣＴＴ－?ＣＣＡＣＡＧＧＣＡＧＣＣＣＴＧＧＴＧＧＣＧ??變?Ｓ５０－３１?ＣＣＴＴ－?ＣＣＡＣＡＧＧＣＡＧＣＣＣＴＧＧＴＧＧＣＧ??５?Ｓ５０－３５?ＣＣＴＴ－?ＣＣＡＣＡＧＧＣＡＧＣＣＣＴＧＧＴＧＧＣＧ??Ｊ?Ｓ５０－....

本文編號：3894912