蘋果莖溝病毒(Apple stem grooving virus,ASGV)、蘋果莖痘病毒(Apple stem pitting virus,ASPV)和蘋果褪綠葉斑病毒(Apple chlorototic leaf spot virus,ACLSV)是侵染梨的3種常見病毒,這些病毒在梨樹上經(jīng)常復合侵染,影響樹體的生長及產(chǎn)品質(zhì)量。此外,本實驗室前期利用深度測序從梨樹上鑒定并得到了一種新的歐洲山梣環(huán)斑病毒屬(Emaravirus)的病毒,受該病毒侵染的梨樹葉片呈現(xiàn)半透明的褪綠斑,將其暫命名為梨褪綠葉斑相關(guān)病毒(Pear chlorototic leaf spot-associated virus,PCLSaV),該病毒基因組是由5條負義單鏈RNA組成。本研究根據(jù)前期獲得的PCLSaV序列設(shè)計了不同引物,以建立有效的RT-PCR檢測技術(shù),用于梨離體植株與田間樣品的PCLSaV檢測。同時對3個梨品種的帶病毒與無病毒離體植株的生根效率以及移栽成活率等生長特性進行了比較。取得的主要結(jié)果如下:1.根據(jù)已獲得的PCLSaV基因組RNA3的序列設(shè)計了2套用于巢式RT-PCR(nRT-PCR)擴增的引物...

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【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略表語
第一章 文獻綜述
    1.1 侵染梨的常見病毒及其危害特點
        1.1.1 蘋果莖溝病毒
        1.1.2 蘋果莖痘病毒
        1.1.3 蘋果褪綠葉斑病毒
    1.2 Emaravirus屬病毒及分子特征
        1.2.1 Emaravirus屬病毒分類地位及病毒種類
        1.2.2 基因組結(jié)構(gòu)及分子特點
    1.3 PCLSaV的生物學特性及危害特點
        1.3.1 PCLSaV的生物學特性
        1.3.2 PCLSaV的危害特點
    1.4 病毒侵染對植物生長及生根的影響
        1.4.1 病毒侵染對植物生長的影響
        1.4.2 病毒侵染對植物生根的影響
    1.5 研究目的與意義
第二章 PCLSaV的 RT-PCR檢測技術(shù)建立與應用
    2.1 研究材料
        2.1.1 樣品來源
        2.1.2 主要試劑
    2.2 研究方法
        2.2.1 引物設(shè)計
        2.2.2 梨葉片的總RNA提取
        2.2.3 RT-PCR擴增
        2.2.4 瓊脂糖凝膠電泳
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 隨機引物反轉(zhuǎn)錄PCR及 nPCR檢測PCLSaV的效果
        2.3.2 特異引物反轉(zhuǎn)錄PCR及 nPCR檢測PCLSaV的效果
        2.3.3 不同反轉(zhuǎn)錄引物及檢測引物用于PCR和 nPCR檢測PCLSaV的效果比較
    2.4 小結(jié)與討論
第3章 梨離體植株P(guān)CLSaV的檢測
    3.1 研究材料
    3.2 主要試劑
    3.3 研究方法
        3.3.1 離體植株葉片采集
        3.3.2 梨葉片的總RNA提取
        3.3.3 檢測4 種病毒所用的引物
        3.3.4 RT-PCR檢測PCLSaV
        3.3.5 巢式多重RT-PCR檢測ASGV、ASPV和 ACLSV
        3.3.6 瓊脂糖凝膠電泳
    3.4 結(jié)果與分析
        3.4.1 巢式多重RT-PCR檢測梨離體植株的ASGV、ASPV和 ACLSV
        3.4.2 梨離體植株P(guān)CLSaV的巢式RT-PCR檢測
    3.5 討論
第四章 病毒對梨離體植株生根及移栽的影響
    4.1 研究材料
        4.1.1 材料來源
        4.1.2 主要試劑
    4.2 研究方法
        4.2.1 激素的配置
        4.2.2 MS培養(yǎng)基的配置
        4.2.3 生根培養(yǎng)基的配置
        4.2.4 離體植株的生根誘導
        4.2.5 煉苗與移栽
        4.2.6 數(shù)據(jù)分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 巴梨無毒與帶毒離體植株生根移栽效果的比較
            4.3.1.1 巴梨無毒與帶毒離體植株生根特性的觀察與比較
            4.3.1.2 巴梨無毒與帶毒離體植株移栽效果的比較
        4.3.2 紅茄梨無毒與帶毒離體植株生根移栽效果的比較
            4.3.2.1 紅茄梨無毒與帶毒離體植株生根效果的比較
            4.3.2.2 紅茄梨無毒與帶毒離體植株移栽效果的比較
        4.3.3 色爾克甫無毒與帶毒離體植株生根移栽效果的比較
            4.3.3.1 色爾克甫無毒與帶毒離體植株生根效果的比較
            4.3.3.2 色爾克甫無毒與帶毒離體植株移栽效果的比較
    4.4 討論
第五章 結(jié)論與展望
參考文獻
附錄
致謝



本文編號：3870701