發(fā)布時間：2023-10-29 15:33

　　家蠶質(zhì)型多角體病毒(Bombyx mori cypovirus,BmCPV)屬于呼腸弧病毒(reovirus)。BmCPV能感染家蠶中腸細(xì)胞引起質(zhì)型多角體病,導(dǎo)致蠶繭歉收。細(xì)胞自噬(autophagy)是真核生物通過分解代謝維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的一種生命現(xiàn)象,也是機(jī)體一種非常重要的保護(hù)和防御機(jī)制。目前為止,BmCPV感染與宿主防御機(jī)制的相互作用關(guān)系尚不明確。BmCPV感染與細(xì)胞自噬的研究對于理解病毒與宿主的相互作用機(jī)制有重要的意義。1.BmCPV感染可以誘導(dǎo)家蠶細(xì)胞發(fā)生自噬本研究通過透射電子顯微鏡(transmission electron microscope,TEM)觀察,研究了 BmCPV感染的家蠶中腸細(xì)胞的病理學(xué)變化,在感染細(xì)胞中觀察到自噬體樣的結(jié)構(gòu);LC3全稱為微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(microtubule-associated proteins light chain 3,MAP1LC3),可以標(biāo)記自噬體的形成,被用做自噬的標(biāo)記物。將指示自噬體形成的pIZ-EGFP-LC3質(zhì)粒轉(zhuǎn)染家蠶卵巢(B.mori ovarian,BmN)細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)BmCPV感染能明顯增加細(xì)胞內(nèi)自噬體的數(shù)量;W...

【文章頁數(shù)】：110 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 家蠶質(zhì)型多角體病毒的研究進(jìn)展
        1.1 家蠶質(zhì)型多角體病毒的危害
        1.2 家蠶質(zhì)型多角體病毒的結(jié)構(gòu)
        1.3 家蠶質(zhì)型多角體病毒的基因組和蛋白
    2 線粒體自噬研究進(jìn)展
        2.1 細(xì)胞自噬概述
        2.2 細(xì)胞自噬對于病毒感染是把雙刃劍
        2.3 線粒體自噬研究進(jìn)展
    3 研究目的與研究內(nèi)容
        3.1 研究的目的與意義
        3.2 研究內(nèi)容
        3.3 技術(shù)路線
    參考文獻(xiàn)
第二章 BmCPV感染誘導(dǎo)細(xì)胞自噬
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 試劑配制
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 電鏡觀察BmCPV感染家蠶中腸細(xì)胞病變
        3.2 BmCPV感染pIZ-EGFP-LC3處理BmN細(xì)胞的自噬體觀察
        3.3 家蠶ATG8 (LC3)蛋白抗體制備
        3.4 BmCPV感染BmN細(xì)胞LC3-Ⅱ蛋白水平的變化
        3.5 BmCPV感染家蠶中腸LC3-Ⅱ蛋白水平的變化
        3.6 BmCPV感染BmN細(xì)胞自噬相關(guān)基因表達(dá)水平的變化
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第三章 BmCPV感染誘導(dǎo)的自噬類型研究
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 試劑配制
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 BmCPV感染后電鏡觀察細(xì)胞線粒體形態(tài)的變化
        3.2 BmCPV感染BmN細(xì)胞線粒體自噬通路蛋白檢測
        3.3 Parkin和Drp-1基因沉默對細(xì)胞自噬的影響
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第四章 BmCPV誘導(dǎo)的細(xì)胞自噬與病毒增殖的關(guān)系
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 試劑配制
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 Rap和3-MA對BmN細(xì)胞的毒性
        3.2 Rap和3-MA處理對BmCPV感染引起自噬的影響
        3.3 Rap和3-MA處理對BmCPV增殖的影響
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
第五章 BmCPV感染誘導(dǎo)細(xì)胞自噬的關(guān)鍵病毒蛋白的鑒定
    1 引言
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2 試劑配制
        2.3 實(shí)驗(yàn)方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 pIZT-CS1-pIZT-CS10轉(zhuǎn)染pIZT-LC3-GFP-mCherry BmN細(xì)胞
        3.2 BmCPV VP4對自噬相關(guān)蛋白水平的影響。
    4 討論
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
附錄一 縮略詞表
附錄二 載體圖譜
附錄三 常用儀器
附錄四 qPCR原始數(shù)據(jù)
附錄五 抗體可用性分析
在校期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3858362