山核桃干腐病(Botryosphaeria dothidea)是浙江重要經(jīng)濟(jì)樹(shù)種山核桃樹(shù)的最主要病害,導(dǎo)致超過(guò)90%的山核桃樹(shù)發(fā)病,對(duì)當(dāng)?shù)卦斐闪司薮蟮慕?jīng)濟(jì)損失。目前針對(duì)該病的防治還以戊唑醇和苯醚甲環(huán)唑等化學(xué)農(nóng)藥為主,盡管這些化學(xué)農(nóng)藥可以有效控制山核桃干腐病,但同時(shí)也存在增加真菌耐藥性和環(huán)境污染等諸多問(wèn)題,因此開(kāi)發(fā)一個(gè)新的防治山核桃干腐病的植物源農(nóng)藥迫在眉睫�？鄥A是一種從苦參中提取的喹諾里西啶類(lèi)生物堿,在防治植物真菌病害方面具有廣闊的應(yīng)用前景,然而由于苦參堿對(duì)植物病原真菌的抗真菌活性及其抗真菌機(jī)制尚不明確,阻礙了苦參堿制劑的開(kāi)發(fā)和實(shí)際應(yīng)用。鑒于此,本研究測(cè)定了苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌的抗真菌活性,并進(jìn)一步通過(guò)探討苦參堿對(duì)真菌細(xì)胞膜、呼吸代謝和轉(zhuǎn)錄組的影響,闡述其作用機(jī)制,最后通過(guò)研究苦參堿對(duì)抗真菌農(nóng)藥的增效作用,篩選出具有田間應(yīng)用潛力的組方,為苦參堿在林業(yè)上的應(yīng)用和推廣打下堅(jiān)實(shí)理論基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下:1.采用菌絲體生長(zhǎng)速率法測(cè)定了苦參堿對(duì)7種林業(yè)病原真菌的抑真菌活性,并以最敏感的山核桃干腐病病原菌為研究對(duì)象,進(jìn)一步研究苦參堿對(duì)其孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)的抑制作用。結(jié)果顯示:苦參堿對(duì)山核...

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 植物源農(nóng)藥研究進(jìn)展
        1.1.1 植物源殺蟲(chóng)劑
        1.1.2 植物源抗真菌劑
        1.1.3 植物源除草劑、生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑
    1.2 生物堿研究進(jìn)展
        1.2.1 生物堿抗腫瘤活性
        1.2.2 生物堿抗炎活性
        1.2.3 生物堿抗真菌活性
        1.2.4 生物堿抗病毒活性
    1.3 苦參堿的研究進(jìn)展
        1.3.1 苦參堿抗真菌活性
        1.3.2 苦參堿殺蟲(chóng)活性
        1.3.3 苦參堿調(diào)節(jié)植物生長(zhǎng)活性
        1.3.4 苦參堿抗癌活性
        1.3.5 苦參堿作用機(jī)制
    1.4 山核桃干腐病研究進(jìn)展
    1.5 轉(zhuǎn)錄組學(xué)在藥物研究中的應(yīng)用
        1.5.1 新一代測(cè)序技術(shù)
        1.5.2 轉(zhuǎn)錄組技術(shù)在抗真菌活性研究中的應(yīng)用
    1.6 本研究的目的和意義
2 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌的離體抑菌活性測(cè)定
    2.1 試驗(yàn)材料
        2.1.1 試驗(yàn)藥物及儀器
        2.1.2 試驗(yàn)菌種
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 馬鈴薯固體培養(yǎng)基的配置
        2.2.2 帶藥培養(yǎng)基的配置
        2.2.3 真菌的活化
        2.2.4 苦參堿對(duì)林業(yè)病原真菌的抑真菌活性的測(cè)定
        2.2.5 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌孢子萌發(fā)的影響
        2.2.6 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌生物量的影響
        2.2.7 苦參堿的抑真菌作用時(shí)間
        2.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 苦參堿對(duì)7種植物病原真菌的抑菌效果觀察
        2.3.2 苦參堿對(duì)6種病原真菌的抑真菌活性
        2.3.3 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌孢子萌發(fā)的影響
        2.3.4 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌生長(zhǎng)量的影響
        2.3.5 苦參堿的抑真菌作用時(shí)間
    2.4 本章小結(jié)
3 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌細(xì)胞膜的影響
    3.1 試驗(yàn)材料
        3.1.1 試驗(yàn)藥物及儀器
        3.1.2 主要試劑配置
        3.1.3 試驗(yàn)試劑盒
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 帶藥培養(yǎng)基的配置
        3.2.2 山核桃干腐病病原菌樣品的準(zhǔn)備
        3.2.3 倒置顯微鏡觀察
        3.2.4 掃描電鏡觀察
        3.2.5 透射電鏡觀察
        3.2.6 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌細(xì)胞膜通透性的影響
        3.2.7 總脂質(zhì)含量測(cè)定
        3.2.8 丙二醛含量測(cè)定
        3.2.9 活性氧含量測(cè)定
        3.2.10 蛋白質(zhì)含量測(cè)定
        3.2.11 保護(hù)酶活性測(cè)定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 倒置顯微鏡觀察苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲形態(tài)的影響
        3.3.2 掃描電鏡觀察苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲形態(tài)的影響
        3.3.3 透射電鏡觀察苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲超微結(jié)構(gòu)的影響
        3.3.4 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌細(xì)胞膜通透性的影響
        3.3.5 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)總脂質(zhì)含量的影響
        3.3.6 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)丙二醛含量的影響
        3.3.7 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)活性氧含量的影響
        3.3.8 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)蛋白質(zhì)含量的影響
        3.3.9 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌保護(hù)酶的影響
    3.4 本章小結(jié)
4 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌呼吸代謝的影響
    4.1 試驗(yàn)材料
        4.1.1 試驗(yàn)儀器
        4.1.2 試驗(yàn)試劑盒
        4.1.3 試驗(yàn)菌種
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 帶藥培養(yǎng)基的配置
        4.2.2 山核桃干腐病病原菌樣品的準(zhǔn)備
        4.2.3 ATP含量測(cè)定
        4.2.4 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌呼吸代謝的影響
        4.2.5 三羧酸循環(huán)相關(guān)酶活性的測(cè)定
        4.2.6 糖酵解過(guò)程相關(guān)酶活性的測(cè)定
        4.2.7 ATP酶活性測(cè)定
        4.2.8 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌線粒體呼吸作用的影響
        4.2.9 線粒體復(fù)合體Ⅰ、Ⅲ活性的測(cè)定
        4.2.10 魚(yú)藤酮對(duì)苦參堿處理后山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)活性氧含量的影響
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)ATP含量的影響
        4.3.2 苦參堿對(duì)呼吸代謝的影響
        4.3.3 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌三羧酸循環(huán)的影響
        4.3.4 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌糖酵解過(guò)程的影響
        4.3.5 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)ATP酶活性的影響
        4.3.6 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌線粒體呼吸作用的影響
        4.3.7 苦參堿對(duì)山核桃干腐病病原菌線粒體復(fù)合體Ⅰ、Ⅲ活性的影響
        4.3.8 魚(yú)藤酮對(duì)苦參堿處理后山核桃干腐病病原菌菌絲體內(nèi)活性氧含量的影響
    4.4 本章小結(jié)
5 苦參堿抑制山核桃干腐病病原菌的轉(zhuǎn)錄組分析
    5.1 試驗(yàn)材料
        5.1.1 試驗(yàn)儀器
        5.1.2 主要試劑
        5.1.3 試驗(yàn)菌種
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 轉(zhuǎn)錄組樣品的制備
        5.2.2 山核桃干腐病病原菌總RNA的提取及其質(zhì)量鑒定
        5.2.3 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的測(cè)序及其質(zhì)量控制
        5.2.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序數(shù)據(jù)的組裝及評(píng)估
        5.2.5 基因功能注釋
        5.2.6 基因表達(dá)量分析
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 山核桃干腐病病原菌RNA的質(zhì)量檢測(cè)
        5.3.2 測(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制
        5.3.3 測(cè)序結(jié)果組裝
        5.3.4 Unigene功能注釋
        5.3.5 差異表達(dá)分析
        5.3.6 轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的深入比較分析
    5.4 本章小結(jié)
6 苦參堿對(duì)殺菌劑抗山核桃干腐病病原菌的增效作用
    6.1 試驗(yàn)材料
        6.1.1 試驗(yàn)儀器
        6.1.2 試驗(yàn)試劑
        6.1.3 試驗(yàn)菌種
    6.2 試驗(yàn)方法
        6.2.1 化學(xué)農(nóng)藥單劑對(duì)山核桃干腐病病原菌抑菌效果測(cè)定
        6.2.2 八種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)山核桃干腐病病原菌的毒力回歸方程和IC₅₀值
        6.2.3 苦參堿與8種化學(xué)農(nóng)藥間的增效作用試驗(yàn)
        6.2.4 苦參堿與甲基托布津的聯(lián)合毒力測(cè)定
    6.3 結(jié)果與分析
        6.3.1 八種化學(xué)農(nóng)藥對(duì)山核桃干腐病病原菌的毒力回歸方程和IC₅₀值
        6.3.2 最佳復(fù)配組合的篩選
        6.3.3 苦參堿與甲基托布津最佳復(fù)配比例的篩選
    6.4 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
附件



本文編號(hào)：3844430