為了進(jìn)一步解析小麥與條銹菌(Puccinia striiformis f. sp.tritici,Pst)互作中的抗病分子機(jī)制,在小麥-條銹菌互作的cDNA文庫中分離得到一個(gè)編碼bZIP類轉(zhuǎn)錄因子的小麥抗病相關(guān)基因 TaTGA2.2。通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)以及病毒誘導(dǎo)的基因沉默技術(shù)(VIGS)對 TaTGA2.2的表達(dá)模式及其在小麥與條銹菌互作中的功能進(jìn)行了初步解析。結(jié)果表明,小麥 TaTGA2.2基因全長1 005 bp,編碼334個(gè)氨基酸,具有bZIP保守結(jié)構(gòu)域以及TGA轉(zhuǎn)錄因子類似結(jié)構(gòu)域。進(jìn)化樹分析發(fā)現(xiàn)TaTGA2.2與一粒小麥中TGA蛋白近緣。擬南芥原生質(zhì)體亞細(xì)胞定位發(fā)現(xiàn)TaTGA2.2分布在細(xì)胞核,酵母自激活實(shí)驗(yàn)表明TaTGA2.2蛋白N端具有轉(zhuǎn)錄激活活性。此外, TaTGA2.2受條銹菌誘導(dǎo)表達(dá),且非親和互作中的表達(dá)量較親和互作明顯增高。非生物脅迫處理中干旱、鹽以及外源激素水楊酸(SA)和脫落酸(ABA)也能誘導(dǎo) TaTGA2.2上調(diào)表達(dá)。VIGS沉默 TaTGA2.2基因后,發(fā)現(xiàn)接種條銹菌CYR23及...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 供試材料
    1.2 RNA 的提取與 cDNA 的合成
    1.3 TaTGA2.2基因的克隆
    1.4 序列分析
    1.5 表達(dá)模式分析
    1.6 亞細(xì)胞定位
    1.7 酵母自激活驗(yàn)證
    1.8 大麥條紋花葉病毒(Barley stripe mosaic virus,BSMV)介導(dǎo)的 TaTGA2.2基因沉默
2 結(jié)果與分析
    2.1 TaTGA2.2基因的克隆結(jié)果
    2.2 TaTGA2.2基因的序列分析
    2.3 TaTGA2.2的表達(dá)模式
    2.4 TaTGA2.2蛋白的亞細(xì)胞定位
    2.5 TaTGA2.2的酶母自激活驗(yàn)證結(jié)果
    2.6 TaTGA2.2基因沉默后的表型及分析
3 討 論



本文編號：3826042