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熱激轉(zhuǎn)錄因子(Hsf)與熱激蛋白基因(Hsp70、Hsp21、sHsp21)在蓮草直胸跳甲高溫耐受性中的作用

發(fā)布時間:2023-05-10 03:49
  空心蓮子草Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb是分布廣泛的惡性雜草,目前在我國南方大部分地區(qū)暴發(fā)危害。蓮草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)是空心蓮子草的專食性天敵,被很多國家引進,并取得一定成效。在我國亞熱帶地區(qū),蓮草直胸跳甲受溫度的影響很大。該跳甲在我國湖南省各空心蓮子草發(fā)生區(qū)盛夏高溫期-(8月-9月)種群驟減(李彥寧等,2011),導致控制對空心蓮子草效果急劇下降。然而,2009年釋放到海南省的蓮草直胸跳甲種群,目前在海南各省空心蓮子草發(fā)生區(qū)全年均能發(fā)生?梢,蓮草直胸跳甲在我國已經(jīng)出現(xiàn)了熱適應性分化。那么是什么提高了海南蓮草直胸跳甲高溫耐受能力呢?熱激蛋白的表達與生物體耐受性的產(chǎn)生有密切的關系,高溫條件下生物體產(chǎn)生的熱激蛋白可以保護機體免受外界的破壞。為了揭示熱激蛋白(Heat shock proteins,Hsps)基因在蓮草直胸跳甲高溫耐受性中的調(diào)控機理,本研究針對空心蓮子草天敵蓮草直胸跳甲在湖南長沙夏季種群崩潰、海南萬寧卻可常年發(fā)生這一現(xiàn)象,以湖南種群和海南種群為研究對象,采用高通量測序、熒光定量PCR等技術克...

【文章頁數(shù)】:78 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 空心蓮子草的簡述
        1.1.1 空心蓮子草的起源分布
        1.1.2 空心蓮子草入侵成災機理
        1.1.3 空心蓮子草的影響
        1.1.4 空心蓮子草的防治
    1.2 蓮草直胸跳甲的相關研究
        1.2.1 蓮草直胸跳甲概述
        1.2.2 蓮草直胸跳甲高溫耐受能力的研究
    1.3 熱激蛋白在昆蟲抗逆性中的研究
        1.3.1 熱激蛋白的劃分
        1.3.2 HSPs的作用
        1.3.3 Hsp基因的表達調(diào)控
    1.4 RNAI技術及在昆蟲學中的應用
        1.4.1 RNAi簡述
        1.4.2 RNAi的方法
    1.5 論文設計
        1.5.1 立題依據(jù)
        1.5.2 研究內(nèi)容
    1.6 技術路線
第二章 蓮草直胸跳甲HSP70的分析與功能驗證
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
        2.1.3 熱激蛋白 70(Hsp70)基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.1.4 熱激蛋白 70(Hsp70)基因的表達分析
        2.1.5 dsRNA模版的制備
    2.2 結果分析
        2.2.1 Hsp70基因的c DNA全長克隆分析
        2.2.2 Hsp70基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        2.2.3 Hsp70基因在不同溫度下的表達分析
        2.2.4 蓮草直胸跳甲Hsp70基因的功能驗證
    2.3 討論
第三章 蓮草直胸跳甲HSP21的分析與功能驗證
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗方法
        3.1.3 熱激蛋白 21(Hsp21)基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        3.1.4 熱激蛋白 21(Hsp21)基因的表達分析
        3.1.5 dsRNA模版的制備
    3.2 結果分析
        3.2.1 Hsp21基因的c DNA全長克隆分析
        3.2.2 Hsp21基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        3.2.3 Hsp21基因在不同溫度下的表達分析
        3.2.4 蓮草直胸跳甲Hsp21基因的功能驗證
    3.3 討論
第四章 蓮草直胸跳甲SHSP21的分析與功能驗證
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗方法
        4.1.3 小熱激蛋白 21(sHsp21)基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.1.4 小熱激蛋白 21(sHsp21)基因的表達分析
        4.1.5 dsRNA模版的制備
    4.2 結果分析
        4.2.1 sHsp21基因的c DNA全長克隆分析
        4.2.2 sHsp21基因的系統(tǒng)發(fā)育分析
        4.2.3 sHsp21基因在不同溫度下的表達分析
        4.2.4 蓮草直胸跳甲sHsp21基因的功能驗證
    4.3 討論
第五章 蓮草直胸跳甲HSF的分析與功能驗證
    5.1
        5.1.2 實驗方法
        5.1.3 熱激轉(zhuǎn)錄因子(Hsf)的表達分析
        5.1.4 dsRNA模版的制備
    5.2 結果分析
        5.2.1 蓮草直胸跳甲熱激轉(zhuǎn)錄因子的序列分析
        5.2.2 蓮草直胸跳甲熱激轉(zhuǎn)錄因子在不同溫度下的表達
        5.2.3 蓮草直胸跳甲Hsf基因的功能驗證
    5.3 討論
第六章 結果與討論
    6.1 結論
    6.2 討論
        6.2.1 蓮草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21和Hsf基因克隆及分析
        6.2.2 蓮草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21的發(fā)育分析
        6.2.3 蓮草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21和Hsf基因在不同溫度下的表達
        6.2.4 蓮草直胸跳甲Hsp70,Hsp21,sHsp21和Hsf基因功能驗證
    6.3 創(chuàng)新點
    6.4 問題與展望
參考文獻
致謝
作者簡歷



本文編號:3812969

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