本文通過中華散尾鬼筆的基礎研究,包括分類地位、分布、毒性等的報道,分析了其在微生物源農(nóng)藥中的應用可行性,對野外采集的中華散尾鬼筆進行ITS序列分析及N-J系統(tǒng)發(fā)育樹的構建,確定了中華散尾鬼筆的分類地位,并且對其進行了組織分離純化培養(yǎng);篩選最優(yōu)培養(yǎng)基并優(yōu)化培養(yǎng)基的配方,然后采用生長速率法和抑制孢子萌發(fā)法進行抑菌活性研究。ITS序列分析及N-J系統(tǒng)發(fā)育樹的構建結果表明:采集到的真菌屬于籠頭菌科,親緣關系接近竹蓀屬真菌,結合傳統(tǒng)形態(tài)學描述,確定為散尾鬼筆屬真菌中華散尾鬼筆。中華散尾鬼筆的培養(yǎng)試驗結果表明:中華散尾鬼筆最佳培養(yǎng)基配方為,馬鈴薯200g、葡萄糖 20g、蛋白胨 3g、無機鹽溶液(KH2PO4 1g、K2HPO4 1g、MgSO4 0.5g、CaCl20.05g、KCl 0.5g、FeSO4 0.0lg、NaN03 0.5g 溶于 1OOOmL 蒸餾水)10mL、瓊脂 15g、pH=5;中華散尾鬼筆的最佳培養(yǎng)溫度為20℃;在以上培養(yǎng)條件下,中華散尾鬼筆的凈生長量為0.64cm/d。中華散尾鬼筆的抑菌活性研究試驗結果表明:培養(yǎng)液和培養(yǎng)液的粗提物對供試的三種林木病原菌均有抑菌活性。培養(yǎng)...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 大型有毒真菌生物活性的研究概況
        1.1.1 大型有毒真菌的種類及特性
        1.1.2 大型有毒真菌活性物質(zhì)的應用
    1.2 中華散尾鬼筆的研究概況
        1.2.1 中華散尾鬼筆的種類及分布
        1.2.2 中華散尾鬼筆的生長特性
        1.2.3 中華散尾鬼筆的應用
    1.3 ITS序列的研究概述
        1.3.1 rDNA-ITS序列的基本原理
        1.3.2 ITS序列在真菌分類上的應用
        1.3.3 ITS序列在其他領域的應用
    1.4 研究的目的及意義
2 基于ITS的中華散尾鬼筆的分類地位研究
    2.1 供試材料
        2.1.1 試驗材料
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要儀器
    2.2 試驗方法與步驟
        2.2.1 基因組DNA提取
        2.2.2 PCR擴增
        2.2.3 凝膠電泳
        2.2.4 產(chǎn)物回收
        2.2.5 序列比對及系統(tǒng)發(fā)育樹的構建
    2.3 中華散尾鬼筆采集地概況
    2.4 結果與分析
        2.4.1 傳統(tǒng)形態(tài)學描述
        2.4.2 PCR擴增結果
        2.4.3 ITS序列測序結果
        2.4.4 ITS序列比對結果
        2.4.5 N-J系統(tǒng)發(fā)育樹
    2.5 本章小結
3 中華散尾鬼筆的組織分離與培養(yǎng)
    3.1 供試材料
        3.1.1 試驗材料
        3.1.2 主要試劑
        3.1.3 主要儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 培養(yǎng)基的配制
        3.2.2 中華散尾鬼筆的組織分離
        3.2.3 中華散尾鬼筆培養(yǎng)基的篩選
        3.2.4 中華散尾鬼筆培養(yǎng)基的優(yōu)化
        3.2.5 中華散尾鬼筆培養(yǎng)基pH值的優(yōu)化
        3.2.6 中華散尾鬼筆培養(yǎng)溫度的優(yōu)化
    3.3 結果與分析
        3.3.1 各種培養(yǎng)基對中華散尾鬼筆生長的影響
        3.3.2 中華散尾鬼筆的最適培養(yǎng)基
        3.3.3 碳源對中華散尾鬼筆生長的影響
        3.3.4 氮源對中華散尾鬼筆生長的影響
        3.3.5 無機鹽離子濃度對中華散尾鬼筆生長的影響
        3.3.6 pH值對中華散尾鬼筆生長的影響
        3.3.7 培養(yǎng)溫度對中華散尾鬼筆生長的影響
    3.4 本章小結
4 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液及其液粗提物抑菌活性
    4.1 供試材料
        4.1.1 試驗材料
        4.1.2 主要試劑
        4.1.3 主要儀器
    4.2 試驗方法
        4.2.1 液體培養(yǎng)基的配制
        4.2.2 中華散尾鬼筆的液體培養(yǎng)
        4.2.3 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液的制備
        4.2.4 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液粗提物的制備
        4.2.5 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液的抑菌活性研究
        4.2.6 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液粗提物的抑菌活性研究
        4.2.7 尖孢鐮刀菌孢子的懸浮液的制備
        4.2.8 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液對尖孢鐮刀菌孢子萌發(fā)的影響
        4.2.9 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液粗提物對尖孢鐮刀菌孢子萌發(fā)的影響
    4.3 結果與分析
        4.3.1 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液的抑菌活性
        4.3.2 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液粗提物的抑菌活性
        4.3.3 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液對尖孢鐮刀菌孢子萌發(fā)的影響
        4.3.4 中華散尾鬼筆培養(yǎng)液粗提物尖孢鐮刀菌孢子萌發(fā)的影響
    4.4 本章小結
結論與討論
參考文獻
附錄
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
致謝



本文編號：3799002