在蜜蜂社會(huì)里,工蜂和雄蜂是對(duì)蜂群社會(huì)組織和種群繁衍具有重要貢獻(xiàn)的兩個(gè)級(jí)型。工蜂和雄蜂分別是二倍體和單倍體,二者在遺傳上的差異決定了其生理發(fā)育和社會(huì)行為存在諸多生物學(xué)不同。胚胎發(fā)育期是蜜蜂生命周期中的關(guān)鍵時(shí)期,成年蜂的各種器官雛形都在胚胎期形成。雖然利用基于雙向電泳(2-DE)的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)工蜂和雄蜂胚胎期發(fā)育的分子基礎(chǔ)進(jìn)行初步探索,但只鑒定到105個(gè)蛋白質(zhì),僅覆蓋了7%的蜜蜂蛋白質(zhì)組(15323個(gè)蛋白質(zhì)),這在一定程度上限制了對(duì)胚胎發(fā)育分子基礎(chǔ)的客觀認(rèn)識(shí)。隨著質(zhì)譜分辨率、靈敏度和精確度技術(shù)的快速發(fā)展,其蛋白質(zhì)鑒定能力至少是2-DE蛋白質(zhì)組的20倍以上。蛋白質(zhì)組覆蓋深度對(duì)全面深入解析蜜蜂胚胎發(fā)育分子基礎(chǔ)至關(guān)重要。磷酸化是最為重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾之一,對(duì)蛋白質(zhì)功能具有重要調(diào)節(jié)作用,已被廣泛應(yīng)用到生命科學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域。但利用基于高分辨質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組和磷酸化蛋白質(zhì)組技術(shù)對(duì)工蜂和雄蜂胚胎發(fā)育分子基礎(chǔ)的研究還尚未進(jìn)行。本研究利用基于高分辨質(zhì)譜為主的shotgun蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法、非標(biāo)定量技術(shù)、IMAC(固相金屬離子親和色譜)和TiO₂磷酸化蛋白富集等技術(shù)以及蛋白質(zhì)相...

【文章頁(yè)數(shù)】：138 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 緒論
    1.1 工蜂和雄蜂的研究進(jìn)展
    1.2 蜜蜂的胚胎期發(fā)育
    1.3 蜜蜂蛋白質(zhì)組學(xué)的研究進(jìn)展
        1.3.1 蜜蜂級(jí)型分化
        1.3.2 工蜂勞動(dòng)分工
        1.3.3 蜜蜂組織器官
        1.3.4 蜜蜂分泌物
    1.4 研究目的及主要研究?jī)?nèi)容
        1.4.1 研究目的
        1.4.2 主要研究?jī)?nèi)容
第二章 蜜蜂工蜂胚胎發(fā)育期蛋白質(zhì)組分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 儀器設(shè)備
        2.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)流程
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.3 討論
        2.3.1 胚胎 24hr主要是提供能量促進(jìn)細(xì)胞增殖形成胚盤
        2.3.2 胚胎 48hr的主要任務(wù)是構(gòu)建器官的雛形
        2.3.3 胚胎 72hr進(jìn)一步完善器官雛形并完成背索閉合
    2.4 結(jié)論
第三章 蜜蜂雄蜂胚胎發(fā)育期蛋白質(zhì)組及其與工蜂的比較分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 儀器設(shè)備
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)流程
        3.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.2.1 雄蜂胚胎的蛋白質(zhì)組
        3.2.2 工蜂和雄蜂胚胎在 24hr的差異
        3.2.3 工蜂和雄蜂胚胎在 48hr的差異
        3.2.4 工蜂和雄蜂胚胎在 72hr的差異
        3.2.5 驗(yàn)證
        3.2.6 RNAi體系的構(gòu)建
    3.3 討論
        3.3.1 雄蜂胚胎發(fā)育過(guò)程與工蜂的模式基本類似
        3.3.2 工蜂和雄蜂不同的胚胎轉(zhuǎn)錄和翻譯機(jī)制
        3.3.3 工蜂和雄蜂胚胎形態(tài)結(jié)構(gòu)構(gòu)建的時(shí)間差異
        3.3.4 雄蜂胚胎提高骨架蛋白的表達(dá)以滿足其體型較大的需求
        3.3.5 工蜂和雄蜂胚胎采取了不同的抗氧化機(jī)制
    3.4 結(jié)論
第四章 蜜蜂工蜂胚胎發(fā)育期磷酸化蛋白質(zhì)組分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 儀器設(shè)備
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)流程
        4.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.3 討論
        4.3.1 工蜂胚胎發(fā)育的核心磷酸化蛋白質(zhì)
        4.3.2 工蜂胚胎發(fā)育各日齡特異表達(dá)的磷酸化蛋白質(zhì)
    4.4 結(jié)論
第五章 蜜蜂雄蜂胚胎發(fā)育期磷酸化蛋白質(zhì)組及其與工蜂的比較分析
    5.1 材料與方法
        5.1.1 儀器設(shè)備
        5.1.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)流程
        5.1.4 實(shí)驗(yàn)方法
    5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.2.1 雄蜂胚胎發(fā)育磷酸化蛋白組
        5.2.2 雄蜂與工蜂胚胎發(fā)育磷酸化蛋白質(zhì)組的差異
    5.3 討論
        5.3.1 雄蜂的胚胎發(fā)育
        5.3.2 工蜂和雄蜂胚胎發(fā)育的差異
    5.4 結(jié)論
第六章 結(jié)論及展望
    6.1 全文結(jié)論
    6.2 創(chuàng)新之處及新發(fā)現(xiàn)
    6.3 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3780698