棉花抗蟲相關(guān)基因GhJMTs的克隆及功能鑒定
發(fā)布時(shí)間：2023-04-01 02:32
茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)和茉莉酸(jasmonic acid,JA)是廣泛存在于植物中的植物激素,在調(diào)節(jié)植物生長、生殖發(fā)育以及植物防御害蟲等生命活動中發(fā)揮著重要作用。茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶(jasmonic acid carboxyl methyltransferases,JMT)以S-腺苷-蛋氨酸(S-adenosyladenyl-L-methionine,SAM)為甲基供體,能夠催化茉莉酸生成茉莉酸甲酯,屬于SABATH轉(zhuǎn)甲基酶家族,在植物防御中發(fā)揮著重要作用。目前,JMT基因已經(jīng)在擬南芥Arabidopsis thaliana、水稻Oryza sativa和番茄Solanum lycopersicum等多種植物中被分離鑒定,但是棉花Gossypium hirsutum中關(guān)于JMT基因的研究未曾見報(bào)道。本研究克隆獲得陸地棉轉(zhuǎn)甲基酶基因GhJMT1和GhJMT2,并通過原核表達(dá)和體外酶促反應(yīng)研究了它們的體外功能,初步探索該基因在棉花-棉鈴蟲Helicoverpa armigera-中紅側(cè)溝繭蜂Microplitis mediator三級營養(yǎng)間的作用,主要研究內(nèi)...
【文章頁數(shù)】：70 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【文章目錄】：
常見縮略詞
中文摘要
Abstract
1 引言
1.1 蟲害誘導(dǎo)的植物揮發(fā)物
1.1.1 蟲害誘導(dǎo)的植物揮發(fā)物的基本特性
1.1.2 蟲害誘導(dǎo)的植物揮發(fā)物的生物學(xué)功能
1.2 植物SABATH轉(zhuǎn)甲基酶研究進(jìn)展
1.2.1 植物中的SABATH轉(zhuǎn)甲基酶
1.2.2 植物SABATH轉(zhuǎn)甲基酶的種類
1.2.3 植物SABATH轉(zhuǎn)甲基酶的生物學(xué)功能
1.3 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶的生化特性
1.4 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶介導(dǎo)的信號途徑
1.4.1 JA信號途徑
1.4.2 SA信號途徑
1.5 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶在植物生長中的作用
1.6 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶在植物抗蟲性中的作用
1.7 本研究的目的及意義
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 供試植物
2.1.2 供試?yán)ハx
2.1.3 主要試劑
2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 植物處理
2.2.2 GhJMT1-2的克隆與序列分析
2.2.3 GhJMT1-2活性鑒定
2.2.4 揮發(fā)物收集
2.2.5 揮發(fā)物鑒定
2.2.6 棉花GhJMT1-2轉(zhuǎn)甲基酶的表達(dá)譜分析
2.2.7 棉鈴蟲及其天敵的電生理反應(yīng)
2.2.8 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
3.1 GhJMT1和GhJMT2的克隆與序列分析
3.1.1 GhJMT1和GhJMT2的基因克隆
3.1.2 GhJMT1和GhJMT2序列分析
3.1.3 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3.2 GhJMT1和GhJMT2酶活性鑒定
3.2.1 GhJMT1和GhJMT2的原核表達(dá)
3.2.2 GhJMT1和GhJMT2的體外酶活性鑒定
3.3 激素誘導(dǎo)棉花揮發(fā)物的鑒定與分析
3.4 棉花GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
3.4.1 激素誘導(dǎo)GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
3.4.2 蟲害誘導(dǎo)GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
3.5 棉鈴蟲及其天敵的觸角電位反應(yīng)
3.5.1 棉鈴蟲及其天敵中紅側(cè)溝繭蜂對茉莉酸甲酯的觸角電位反應(yīng)
3.5.2 棉鈴蟲及其天敵中紅側(cè)溝繭蜂對植物揮發(fā)物的觸角電位反應(yīng)
4 討論
4.1 棉花GhJMT1和GhJMT2的克隆與序列分析
4.2 棉花茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶GhJMT1和GhJMT2的活性鑒定
4.3 激素處理下?lián)]發(fā)物的釋放以及GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
4.4 GhJMT1和GhJMT2介導(dǎo)的寄主植物-害蟲-天敵昆蟲三級營養(yǎng)相互作用
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
攻讀學(xué)位期間發(fā)表論文情況
本文編號：3776286
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【學(xué)位級別】：碩士
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Abstract
1 引言
1.1 蟲害誘導(dǎo)的植物揮發(fā)物
1.1.1 蟲害誘導(dǎo)的植物揮發(fā)物的基本特性
1.1.2 蟲害誘導(dǎo)的植物揮發(fā)物的生物學(xué)功能
1.2 植物SABATH轉(zhuǎn)甲基酶研究進(jìn)展
1.2.1 植物中的SABATH轉(zhuǎn)甲基酶
1.2.2 植物SABATH轉(zhuǎn)甲基酶的種類
1.2.3 植物SABATH轉(zhuǎn)甲基酶的生物學(xué)功能
1.3 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶的生化特性
1.4 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶介導(dǎo)的信號途徑
1.4.1 JA信號途徑
1.4.2 SA信號途徑
1.5 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶在植物生長中的作用
1.6 茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶在植物抗蟲性中的作用
1.7 本研究的目的及意義
2 材料與方法
2.1 實(shí)驗(yàn)材料
2.1.1 供試植物
2.1.2 供試?yán)ハx
2.1.3 主要試劑
2.1.4 儀器設(shè)備
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
2.2.1 植物處理
2.2.2 GhJMT1-2的克隆與序列分析
2.2.3 GhJMT1-2活性鑒定
2.2.4 揮發(fā)物收集
2.2.5 揮發(fā)物鑒定
2.2.6 棉花GhJMT1-2轉(zhuǎn)甲基酶的表達(dá)譜分析
2.2.7 棉鈴蟲及其天敵的電生理反應(yīng)
2.2.8 數(shù)據(jù)處理
3 結(jié)果與分析
3.1 GhJMT1和GhJMT2的克隆與序列分析
3.1.1 GhJMT1和GhJMT2的基因克隆
3.1.2 GhJMT1和GhJMT2序列分析
3.1.3 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
3.2 GhJMT1和GhJMT2酶活性鑒定
3.2.1 GhJMT1和GhJMT2的原核表達(dá)
3.2.2 GhJMT1和GhJMT2的體外酶活性鑒定
3.3 激素誘導(dǎo)棉花揮發(fā)物的鑒定與分析
3.4 棉花GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
3.4.1 激素誘導(dǎo)GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
3.4.2 蟲害誘導(dǎo)GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
3.5 棉鈴蟲及其天敵的觸角電位反應(yīng)
3.5.1 棉鈴蟲及其天敵中紅側(cè)溝繭蜂對茉莉酸甲酯的觸角電位反應(yīng)
3.5.2 棉鈴蟲及其天敵中紅側(cè)溝繭蜂對植物揮發(fā)物的觸角電位反應(yīng)
4 討論
4.1 棉花GhJMT1和GhJMT2的克隆與序列分析
4.2 棉花茉莉酸轉(zhuǎn)甲基酶GhJMT1和GhJMT2的活性鑒定
4.3 激素處理下?lián)]發(fā)物的釋放以及GhJMT1和GhJMT2的表達(dá)譜分析
4.4 GhJMT1和GhJMT2介導(dǎo)的寄主植物-害蟲-天敵昆蟲三級營養(yǎng)相互作用
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
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