小茶尺蠖Ectropis obliqua和灰茶尺蛾Ectropis grisescens為茶尺蠖兩近緣種,是茶園中最主要的食葉類害蟲。由于二者在外觀形態(tài)、生物學(xué)習(xí)性方面極其相似,一直以來作為茶尺蠖一個(gè)種進(jìn)行田間防治。近年來,在茶園使用茶尺蠖核型多角體病毒(E.obliqua nucleopolyhedrovirus,EoNPV)進(jìn)行防治時(shí)出現(xiàn)不同地區(qū)防治效果差異性較大的現(xiàn)象,進(jìn)而研究明確茶尺蠖存在兩近緣種。本文使用三種不同濃度EoNPV處理小茶尺蠖和灰茶尺蛾,比較分析EoNPV對(duì)兩近緣種茶尺蠖致死率的差異,進(jìn)一步驗(yàn)證田間防治中EoNPV對(duì)小茶尺蠖和灰茶尺蛾的防治效果差異。同時(shí),采用濃度為1×10⁷ PIB/mL的EoNPV喂飼小茶尺蠖和灰茶尺蛾,檢測(cè)病毒粒子在兩近緣種茶尺蠖體內(nèi)增殖動(dòng)態(tài)的差異,以期探索EoNPV對(duì)兩近緣種茶尺蠖致死率差異原因。結(jié)合灰茶尺蛾感染EoNPV后的轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析,篩選免疫相關(guān)的抗菌肽基因,采用qPCR檢測(cè)兩近緣種茶尺蠖體內(nèi)抗菌肽基因表達(dá)差異,進(jìn)一步從抗菌肽基因表達(dá)的角度解釋EoNPV對(duì)兩近緣種茶尺蠖產(chǎn)生致死率差異的機(jī)理。通過以上實(shí)驗(yàn)本研究得...

【文章頁數(shù)】：53 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 昆蟲病毒入侵
    1.2 昆蟲的免疫機(jī)制
        1.2.1 細(xì)胞免疫
        1.2.2 體液免疫
    1.3 抗菌肽基因研究進(jìn)展
        1.3.1 抗菌肽分類
        1.3.2 抗菌功能研究
        1.3.3 昆蟲抗菌肽調(diào)控途徑研究
        1.3.4 果蠅和煙草天蛾體內(nèi)抗菌肽基因調(diào)控途徑
    1.4 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序技術(shù)在昆蟲免疫研究中的應(yīng)用
        1.4.1 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序在昆蟲研究中的應(yīng)用
        1.4.2 轉(zhuǎn)錄組在病毒與宿主互作之間的研究應(yīng)用
    1.5 兩近緣種茶尺蠖的研究概況
        1.5.1 兩近緣種茶尺蠖的發(fā)現(xiàn)與確定
        1.5.2 病毒與兩近緣種茶尺蠖互作研究
    1.6 研究目的與意義
    1.7 技術(shù)路線
第二章 EoNPV感染兩近緣種茶尺蠖的致死率差異
    2.1 材料與方法
        2.1.1 材料與試劑
        2.1.2 EoNPV室內(nèi)感染兩近緣種茶尺蠖的方法
        2.1.3 死亡率統(tǒng)計(jì)分析
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 不同濃度EoNPV對(duì)小茶尺蠖的致死率
        2.2.2 不同濃度EoNPV對(duì)灰茶尺蛾致死率
        2.2.3 EoNPV對(duì)兩近緣種茶尺蠖致死率的差異
        2.2.4 不同濃度EoNPV對(duì)兩近緣種茶尺蠖致死中時(shí)間
    2.3 結(jié)論與討論
        2.3.1 不同濃度EoNPV對(duì)小茶尺蠖致死率的差異
        2.3.2 不同濃度EoNPV對(duì)灰茶尺蛾致死率的差異
        2.3.3 同種濃度EoNPV對(duì)兩近緣種茶尺蠖致死率的差異
第三章 EoNPV感染兩近緣種茶尺蠖的體內(nèi)增殖動(dòng)態(tài)
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
        3.1.2 病毒處理兩近緣種茶尺蠖方法
        3.1.3 樣本組織總DNA提取
        3.1.4 定量PCR檢測(cè)病毒拷貝數(shù)
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 兩近緣種茶尺蠖基因組DNA提取結(jié)果
        3.2.2 EoNPV在兩近緣種茶尺蠖體內(nèi)的增殖動(dòng)態(tài)
    3.3 結(jié)論與討論
第四章 EoNPV感染后兩近緣種茶尺蠖抗菌肽基因表達(dá)分析
    4.1 材料與方法
        4.1.1 材料與試劑
        4.1.2 抗菌肽基因克隆
        4.1.3 進(jìn)化樹構(gòu)建與序列分析
        4.1.4 定量PCR
        4.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 抗菌肽基因克隆
        4.2.2 系統(tǒng)發(fā)育樹分析
        4.2.3 抗菌肽基因在兩近緣種茶尺蠖體內(nèi)表達(dá)差異
    4.3 結(jié)論與討論
第五章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡歷



本文編號(hào)：3745841