灰霉病是當(dāng)前設(shè)施蔬菜生產(chǎn)中的的重大威脅。遼寧省一直以來都是我國的蔬菜的種植大省,在遼寧全省范圍內(nèi)對灰霉病進(jìn)行研究和防控,對保障蔬菜的正常生產(chǎn)和維護(hù)農(nóng)民利益具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。本論文以番茄灰霉病為主要研究對象,調(diào)查檢測了遼寧省地區(qū)番茄灰霉病病菌對腐霉利的抗藥性現(xiàn)狀,而后以對腐霉利產(chǎn)生抗藥性的番茄灰霉病病菌菌株為試驗(yàn)素材,鑒別抗性菌株與敏感菌株之間生物學(xué)特性上的差異性,并對抗性分子機(jī)制進(jìn)行了研究,尋找分子水平上的差異性,并最終依據(jù)這種差異性,利用LAMP方法,建立了快速檢測番茄灰霉病病菌對腐霉利的抗藥性的分子檢測技術(shù),為實(shí)現(xiàn)田間抗藥性的監(jiān)測與管理提供一定的技術(shù)手段。遼寧省各地區(qū)番茄灰霉病菌對腐霉利的抗性菌株已較為普遍,抗藥性呈現(xiàn)加重趨勢。從遼寧省盤錦、葫蘆島、朝陽、丹東、法庫、阜新、普蘭店、沈陽等八個地區(qū)采集分離的115株番茄灰霉病菌菌株中,抗性菌株96株,抗性頻率83.48%。沈陽、盤錦、葫蘆島、朝陽四個地區(qū)的抗性頻率都高達(dá)90%以上。而且,在盤錦和阜新各檢測發(fā)現(xiàn)1株高抗菌株。遼寧省不同地區(qū)間番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性有所差異,但系統(tǒng)聚類分析表明,遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性與菌...

【文章頁數(shù)】：86 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 番茄灰霉病致病菌研究進(jìn)展(文獻(xiàn)綜述)
    1.1 番茄灰霉病菌概述
        1.1.1 番茄灰霉病菌發(fā)生規(guī)律和侵染循環(huán)
        1.1.2 番茄灰霉病菌危害癥狀
    1.2 番茄灰霉病菌致病機(jī)理
        1.2.1 番茄灰霉病菌致病相關(guān)酶和基因
        1.2.2 番茄灰霉病菌致病相關(guān)毒素
        1.2.3 番茄灰霉病病菌致病過程的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑
    1.3 番茄灰霉病病菌防治研究
        1.3.1 化學(xué)防治
        1.3.2 生物防治
    1.4 番茄灰霉病病菌抗藥性研究
        1.4.1 灰葡萄孢抗藥性發(fā)生概況
        1.4.2 灰葡萄孢對二甲酰亞胺類殺菌劑的抗藥性
    1.5 番茄灰霉病病菌抗藥性菌株的快速檢測
    1.6 論文立題依據(jù)和設(shè)計(jì)思路
第二章 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性現(xiàn)狀
    2.1 試驗(yàn)材料
    2.2 試驗(yàn)方法
        2.2.1 菌株的分離純化
        2.2.2 含藥培養(yǎng)基的配制
        2.2.3 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感性的測定
        2.2.4 番茄灰霉病菌對腐霉利抗性指數(shù)的測定及其抗性水平的劃分
    2.3 結(jié)果與分析
        2.3.1 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的敏感性及抗性指數(shù)測定
        2.3.2 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性水平、頻率及分布
        2.3.3 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性水平的系統(tǒng)聚類分析
    2.4 本章小結(jié)
第三章 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性菌株的生物學(xué)特性研究..
    3.1 試驗(yàn)材料
    3.2 試驗(yàn)方法
        3.2.1 番茄灰霉病菌菌絲生長對溫度敏感性的測定
        3.2.2 番茄灰霉病菌菌絲生長速率的測定
        3.2.3 番茄灰霉病菌產(chǎn)孢量與孢子萌發(fā)率的測定
        3.2.4 番茄灰霉病菌微觀形態(tài)的觀察
        3.2.5 番茄灰霉病菌致病力的測定
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感及抗性菌株菌絲生長對溫度的敏感性
        3.3.2 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感及抗性菌株的菌絲生長速率
        3.3.3 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感及抗性菌株的產(chǎn)孢量與孢子萌發(fā)率
        3.3.4 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感及抗性菌株的微觀形態(tài)
        3.3.5 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感及抗性菌株的致病力
    3.4 本章小結(jié)
第四章 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性機(jī)制研究
    4.1 試驗(yàn)材料
    4.2 試驗(yàn)方法
        4.2.1 番茄灰霉病菌DNA的提取
        4.2.2 番茄灰霉病菌BcOS1基因片段的PCR引物設(shè)計(jì)
        4.2.3 番茄灰霉病菌BcOS1基因片段的PCR反應(yīng)條件
        4.2.4 番茄灰霉病菌BcOS1基因片段的測序及分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 番茄灰霉病菌BcOS1基因片段的PCR擴(kuò)增與測序
        4.3.2 番茄灰霉病菌對腐霉利敏感及抗性菌株的BcOS1基因片段分析
    4.4 本章小結(jié)
第五章 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利抗藥性菌株的LAMP快速檢測體系的建立
    5.1 試驗(yàn)材料
    5.2 試驗(yàn)方法
        5.2.1 番茄灰霉病菌DNA的提取
        5.2.2 引物設(shè)計(jì)
        5.2.3 LAMP反應(yīng)體系條件優(yōu)化
        5.2.4 LAMP反應(yīng)體系的確立和驗(yàn)證
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 LAMP引物特異性檢測
        5.3.2 LAMP反應(yīng)體系的優(yōu)化
        5.3.3 LAMP反應(yīng)體系的確立及驗(yàn)證
    5.4 本章小結(jié)
第六章 結(jié)論與討論
    6.1 結(jié)論
        6.1.1 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利的抗藥性現(xiàn)狀
        6.1.2 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利抗藥性菌株的生物學(xué)特性研究
        6.1.3 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利抗藥性機(jī)制研究
        6.1.4 遼寧省番茄灰霉病菌對腐霉利抗藥性菌株的LAMP快速檢測體系的建立
    6.2 討論
        6.2.1 關(guān)于遼寧省番茄灰霉病病菌對腐霉利抗藥性的討論
        6.2.2 關(guān)于抗藥性菌株LAMP快速檢測體系建立的討論
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表論文情況



本文編號：3743981