番茄灰霉病是導致番茄果實減產(chǎn)、品質下降的重要病害之一。利用拮抗酵母菌替代或降低化學殺菌劑的使用對番茄采后病害防治具有廣闊的應用前景。本實驗通過離體對峙、顯微觀察及活體應用等方法,對實驗室篩選出的一株高效拮抗酵母菌的生物學特性、抑制灰霉菌機理以及在番茄果實應用中對灰霉病的控制等進行了研究,主要結果如下:1、通過離體和活體實驗,篩選出一株能夠有效防治番茄采后灰霉菌的拮抗酵母菌KD-16J,通過生理生化實驗和26S rDNA D1/D2區(qū)序列分析鑒定該株拮抗酵母可能為膜醭畢赤酵母;2、通過測定拮抗酵母菌KD-16J濃度和處理液對灰霉菌的菌絲生長量、菌落擴展、孢子萌發(fā)影響觀察其抑制效果,發(fā)現(xiàn)酵母細胞濃度越大,抑制效果越好,109CFU/mL處理下的灰霉菌落抑制率為85.53%,孢子萌發(fā)率高達100%;濾液處理的抑制率比熱殺死液高出14.67%,且遠低于酵母懸浮液處理;酵母細胞對灰霉菌具有接觸吸附作用的同時發(fā)現(xiàn)其分泌更多的胞外水解酶來破壞灰霉菌絲細胞壁,結合平板倒扣試驗證明拮抗酵母KD-16J菌株抑制灰霉菌生長的機理包括營養(yǎng)與空間競爭、直接寄生作用以及分泌了熱穩(wěn)定、熱不穩(wěn)定及揮發(fā)性的抑菌類物質;... 

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 灰霉菌的研究進展
        1.1.1 灰霉菌的生物學特性
        1.1.2 灰霉菌的主要危害
        1.1.3 灰霉菌的侵染過程及致病因子
        1.1.4 灰霉菌的主要防治研究現(xiàn)狀
    1.2 拮抗酵母菌的研究進展
        1.2.1 拮抗酵母對果蔬采后病害的防治效果
        1.2.2 拮抗酵母菌對果蔬采后病害的防治機理
        1.2.3 拮抗酵母菌的商業(yè)化應用
        1.2.4 拮抗酵母的商業(yè)化面臨的問題及未來的發(fā)展前景
    1.3 番茄的概述
        1.3.1 番茄采后貯藏保鮮的研究現(xiàn)狀
        1.3.2 番茄采后貯藏保鮮的評價指標
    1.4 研究目的、意義和主要內容
        1.4.1 研究目的及意義
        1.4.2 主要研究內容
2 材料與方法
    2.1 實驗材料與儀器設備
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 儀器設備
        2.1.3 主要試劑
    2.2 拮抗酵母菌的培養(yǎng)及菌懸液的制備
        2.2.1 酵母菌的活化
        2.2.2 酵母菌懸液的制備
    2.3 病原菌的培養(yǎng)及孢子懸浮液的制備
        2.3.1 灰霉菌的活化與保藏
        2.3.2 灰霉菌孢子懸浮液的制備
    2.4 拮抗酵母菌的篩選及鑒定
        2.4.1 拮抗酵母菌的細胞形態(tài)學觀察
        2.4.2 拮抗酵母菌的群體形態(tài)學觀察
        2.4.3 拮抗酵母菌的離體抑菌效果比較
        2.4.4 拮抗酵母菌的活體抑菌效果比較
        2.4.5 拮抗酵母菌的生理生化特征鑒定
        2.4.6 拮抗酵母菌的DNA序列分析鑒定
    2.5 拮抗酵母對灰霉菌的抑制效果及抑菌機理的研究
        2.5.1 生長曲線的測定
        2.5.2 平板拮抗實驗
        2.5.3 拮抗酵母對灰霉菌絲相對生長量的影響
        2.5.4 不同濃度拮抗酵母對菌絲擴展的影響
        2.5.5 不同濃度拮抗酵母對孢子萌發(fā)的影響
        2.5.6 拮抗酵母的不同處理液對灰霉菌抑制效果的影響
        2.5.7 拮抗酵母對灰霉菌抑制作用的顯微鏡觀察
        2.5.8 拮抗酵母胞外水解酶的分泌情況
        2.5.9 拮抗酵母揮發(fā)性代謝物質對灰霉菌的抑制效果
    2.6 拮抗酵母對番茄灰霉病的生防效果及誘導抗性研究
        2.6.1 拮抗酵母對番茄采后病害自然侵染的防效
        2.6.2 酵母懸浮液接種處理對番茄灰霉病接種侵染的防效
        2.6.3 酵母懸浮液噴施處理對番茄灰霉病接種侵染的防效
        2.6.4 拮抗酵母菌的不同接種時間對番茄灰霉病害的防治效果
        2.6.5 拮抗酵母菌在番茄果實傷口處生長動態(tài)的測定
        2.6.6 拮抗酵母處理對番茄果實POD活性的影響
        2.6.7 拮抗酵母處理對番茄果實PPO活性的影響
        2.6.8 拮抗酵母處理對番茄果實PAL活性的影響
        2.6.9 拮抗酵母處理對番茄果實兒丁質酶活性的影響
        2.6.10 拮抗酵母處理對番茄果實β-1,3葡聚糖酶活性的影響
    2.7 拮抗酵母處理對番茄果實生理品質的影響
        2.7.1 果實預處理
        2.7.2 硬度
        2.7.3 失重率
        2.7.4 可溶性固形物含量
        2.7.5 可滴定酸含量
        2.7.6 抗壞血酸含量
        2.7.7 呼吸強度
        2.7.8 總酚含量
    2.8 統(tǒng)計與分析
3 結果與討論
    3.1 拮抗酵母菌的篩選及鑒定
        3.1.1 拮抗酵母菌的細胞形態(tài)學觀察
        3.1.2 拮抗酵母菌的群體形態(tài)學觀察
        3.1.3 拮抗酵母菌的離體抑菌效果比較
        3.1.4 拮抗酵母菌的活體抑菌效果比較
        3.1.5 拮抗酵母菌的生理生化特征鑒定
        3.1.6 拮抗酵母菌的DNA序列分析鑒定
    3.2 拮抗酵母對灰霉菌的抑制效果及抑菌機理的研究
        3.2.1 生長曲線的測定
        3.2.2 平板拮抗實驗
        3.2.3 拮抗酵母對灰霉菌絲相對生長量的影響
        3.2.4 不同濃度拮抗酵母對菌絲擴展的影響
        3.2.5 不同濃度拮抗酵母對孢子萌發(fā)的影響
        3.2.6 拮抗酵母的不同處理液對灰霉菌抑制效果的影響
        3.2.7 拮抗酵母對灰霉菌抑制作用的顯微鏡觀察
        3.2.8 拮抗酵母胞外水解酶的分泌情況
        3.2.9 拮抗酵母揮發(fā)性代謝物質對灰霉菌的抑制效果
    3.3 拮抗酵母對番茄灰霉病的生防效果及誘導抗性研究
        3.3.1 拮抗酵母對番茄采后病害自然侵染的防效
        3.3.2 酵母懸浮液接種處理對番茄灰霉病接種侵染的防效
        3.3.3 酵母懸浮液噴施處理對番茄灰霉病接種侵染的防效
        3.3.4 拮抗酵母菌的不同接種時間對番茄灰霉病害的防治效果
        3.3.5 拮抗酵母菌在番茄果實傷口處生長動態(tài)的測定
        3.3.6 拮抗酵母處理對番茄果實POD活性的影響
        3.3.7 拮抗酵母處理對番茄果實PPO活性的影響
        3.3.8 拮抗酵母處理對番茄果實PAL活性的影響
        3.3.9 拮抗酵母處理對番茄果實兒丁質酶活性的影響
        3.3.10 拮抗酵母處理對番茄果實β-1,3葡聚糖酶活性的影響
    3.4 拮抗酵母處理對番茄果實生理品質的影響
        3.4.1 硬度
        3.4.2 失重率
        3.4.3 可溶性固形物含量
        3.4.4 可滴定酸含量
        3.4.5 抗壞血酸含量
        3.4.6 呼吸強度
        3.4.7 總酚含量
4 結論
5 展望
6 參考文獻
7 攻讀碩士學位期間發(fā)表論文情況
8 致謝


【參考文獻】：
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本文編號：3731102