普通大薊馬對多殺菌素的抗性監(jiān)測及抗性機理初探
發(fā)布時間:2022-12-09 20:24
普通大薊馬Megalurothrips usitatus (Bagnall),屬纓翅目Thysanoptera薊馬亞族 Thripina (Stephens) Priesner 大薊馬屬 Megalurothrips Bagnall,是一種非常重要的農(nóng)林業(yè)害蟲。在馬來西亞,普通大薊馬是為害杧果的最主要的害蟲之一,危害嚴(yán)重,防治困難,給馬來西亞芒果產(chǎn)業(yè)造成了巨大損失。在非洲和印度等地,普通大薊馬嚴(yán)重危害當(dāng)?shù)囟箍谱魑?多年來一直未能得到有效防治。在我國海南省,普通大薊馬是重要經(jīng)濟作物豇豆的最主要的害蟲,嚴(yán)重影響豇豆品質(zhì),給農(nóng)戶增產(chǎn)增收造成了很大的影響。目前針對該害蟲主要的防治方法為化學(xué)防治,其中多殺菌素是當(dāng)家農(nóng)藥品種之一。由于多殺菌素的大量使用,普通大薊馬對其抗性問題急需研究。本論文主要分為四個部分:第一部分為普通大薊馬敏感種群的建立和抗性種群的篩選;第二部分為普通大薊馬對多殺菌素的抗性監(jiān)測;第三部分為普通大薊馬對多殺菌素抗性機制研究;第四部分為普通大薊馬抗性治理。主要試驗結(jié)果如下:(1)本文通過室內(nèi)夏威夷敏感種群的引進與篩選,采用豆管藥膜法建立了普通大薊馬對多殺菌素的室內(nèi)敏感毒力基線,其...
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 引言
1.1 普通大薊馬及其危害
1.2 薊馬抗藥性研究現(xiàn)狀
1.3 多殺菌素概述
1.3.1 多殺菌素
1.3.2 多殺菌素抗藥性研究現(xiàn)狀
1.4 昆蟲抗藥性與消化道細菌多樣性的關(guān)系
1.5 試驗方法簡介
1.5.1 AccQ·Tag高效液相色譜法
1.5.2 微生物多樣性測序技術(shù)
1.6 研究內(nèi)容
1.7 目的意義
2 材料與方法
2.1 試驗藥品
2.2 儀器設(shè)備
2.3 普通大薊馬對多殺菌素敏感毒力基線的建立
2.3.1 供試?yán)ハx
2.3.2 室內(nèi)生物測定方法
2.3.3 數(shù)據(jù)處理與分析
2.4 普通大薊馬田間種群對多殺菌素的抗性監(jiān)測
2.4.1 供試?yán)ハx
2.4.2 室內(nèi)生物測定方法
2.4.3 數(shù)據(jù)處理與分析
2.5 普通大薊馬對多殺菌素抗性機理研究
2.5.1 酶活測定
2.5.2 普通大薊馬對多殺菌素抗性與游離氨基酸的關(guān)系
2.5.3 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群消化道細菌多樣性測定
2.6 普通大薊馬不同種群親緣關(guān)系鑒定
2.6.1 供試?yán)ハx
2.6.2 DNA提取
2.6.3 PCR擴增與測序
2.6.4 PCR產(chǎn)物回收與純化
2.6.5 質(zhì)粒連接
2.6.6 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化及白斑篩選
2.6.7 轉(zhuǎn)化子檢測
2.6.8 測序
2.6.9 數(shù)據(jù)處理
2.7 替代藥劑研究與篩選
2.7.1 普通大薊馬對乙基多殺菌素敏感毒力基線建立及抗性監(jiān)測
2.7.2 5種揮發(fā)性小分子化合物室內(nèi)篩選
2.7.3 田間藥效試驗
3 結(jié)果與分析
3.1 普通大薊馬敏感種群的建立
3.1.1 不同齡期的形態(tài)觀察
3.1.2 敏感毒力基線的建立
3.2 普通大薊馬田間種群對多殺菌素的抗性監(jiān)測結(jié)果
3.2.1 2015年抗性監(jiān)測結(jié)果
3.2.2 2016年抗性監(jiān)測結(jié)果
3.3 普通大薊馬對多殺菌素抗性與酶活的關(guān)系
3.3.1 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群體內(nèi)SOD活力變化
3.3.2 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群體內(nèi)CAT活力變化
3.3.3 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群體內(nèi)GST活力變化
3.4 游離氨基酸檢測結(jié)果
3.4.1 不同種群體內(nèi)氨基酸豐度與抗性的關(guān)系
3.4.2 氨基酸含量與抗性的關(guān)系
3.5 普通大薊馬消化道細菌多樣性結(jié)果
3.5.1 消化道細菌總DNA提取及檢測結(jié)果
3.5.2 消化道細菌16sRNA基因PCR擴增結(jié)果
3.5.3 OTU分析
3.5.4 Alpha多樣性分析
3.5.5 Beta多樣性分析
3.5.6 不同種群消化道細菌群落物種組成分析
3.5.7 消化道細菌多樣性與抗性相關(guān)性分析
3.5.8 部分細菌(以屬為分類單位)與普通大薊馬對多殺菌素抗性的關(guān)系
3.6 不同種群親緣關(guān)系鑒定
3.6.1 PCR產(chǎn)物檢測
3.6.2 遺傳距離計算及系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
3.7 替代藥劑篩選
3.7.1 普通大薊馬對乙基多殺菌素的敏感毒力基線的建立及抗性監(jiān)測
3.7.2 5種揮發(fā)性小分子化合物對普通大薊馬室內(nèi)生測結(jié)果
3.7.3 田間藥效試驗結(jié)果分析
4 討論
4.1 普通大薊馬對多殺菌素敏感毒力基線建立與抗性監(jiān)測
4.2 普通大薊馬對多殺菌素的抗性機理研究
4.2.1 普通大薊馬對多殺菌素抗性與酶活的關(guān)系
4.2.2 普通大薊馬對多殺菌素抗性與游離氨基酸的關(guān)系
4.2.3 普通大薊馬對多殺菌素抗性與消化道細菌多樣性的關(guān)系
4.2.4 解毒酶、游離氨基酸及消化道細菌互作與抗性的關(guān)系
4.3 普通大薊馬不同種群親緣關(guān)系
4.4 普通大薊馬防治替代藥劑的研究與篩選
5 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]昆蟲腸道微生物多樣性研究進展[J]. 魯迎新,劉彥群,李群,夏潤璽,王歡. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(11)
[2]Effect of heat shock on the susceptibility of Frankliniella occidentalis(Thysanoptera:Thripidae) to insecticides[J]. ZHANG Bin,ZUO Tai-qiang,LI Hong-gang,SUN Li-juan,WANG Si-fang,ZHENG Chang-ying,WAN Fang-hao. Journal of Integrative Agriculture. 2016(10)
[3]海南地區(qū)豆大薊馬田間種群的抗藥性監(jiān)測[J]. 唐良德,趙海燕,付步禮,韓云,閆凱莉,邱海燕,劉奎,吳建輝,李鵬. 環(huán)境昆蟲學(xué)報. 2016(05)
[4]海南省香蕉黃胸薊馬田間種群的抗藥性監(jiān)測[J]. 付步禮,劉俊峰,邱海燕,唐良德,林軍,曾東強,謝藝賢,劉奎. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2016(02)
[5]沃爾巴克氏體與淡色庫蚊溴氰菊酯抗性關(guān)系初步研究[J]. 洪善超,呂園,方福謹(jǐn),朱昌亮. 中國血吸蟲病防治雜志. 2014(06)
[6]不同藥劑對三亞地區(qū)豇豆上普通大薊馬的毒力[J]. 肖春雷,劉勇,吳青君,張友軍,吳乾興,袁廷慶,羅豐,萬三連,孔祥義. 植物保護. 2014(06)
[7]西花薊馬田間種群對常用殺蟲劑的抗性現(xiàn)狀及防治對策[J]. 王圣印,張安盛,李麗莉,門興元,周仙紅,翟一凡,劉永杰,魏書軍,于毅. 昆蟲學(xué)報. 2014(05)
[8]昆蟲內(nèi)共生菌及其功能研究進展[J]. 楊義婷,郭建洋,龍楚云,劉懷,萬方浩. 昆蟲學(xué)報. 2014(01)
[9]普通大薊馬在海南豇豆上的空間分布型[J]. 范詠梅,童曉立,高良舉,王萌,柳志強,張宇,楊葉. 環(huán)境昆蟲學(xué)報. 2013(06)
[10]西花薊馬對多殺菌素的抗性生化機制研究[J]. 侯文杰,李飛,吳青君,徐寶云,張友軍. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(04)
博士論文
[1]氯氰菊酯降解菌株的篩選、鑒定、降解機制及應(yīng)用研究[D]. 張雋.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]南亞實蠅成蟲腸道微生物分子多樣性分析及引誘效果[D]. 駱米娟.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[2]斜紋夜蛾腸道細菌多樣性及其功能研究[D]. 藍波妙.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[3]褐紋甘蔗象腸道菌群的結(jié)構(gòu)及其對宿主營養(yǎng)分配的影響[D]. 方亞.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[4]毒死蜱降解菌的分離、鑒定以及聯(lián)合植物促生菌對土壤的改良[D]. 蔣秋悅.上海師范大學(xué) 2015
[5]小菜蛾腸道共生菌多態(tài)性及與Bt協(xié)同作用研究[D]. 戴楠晶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]氨基酸營養(yǎng)添加對巴氏新小綏螨及其替代獵物腐食酪螨的影響[D]. 程成.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]香蕉花薊馬的抗藥性監(jiān)測及其生化機理初步研究[D]. 付步禮.廣西大學(xué) 2014
[8]白背飛虱體內(nèi)細菌多樣性及其與攜帶南方水稻黑條矮縮病毒能力的關(guān)系研究[D]. 康小影.浙江大學(xué) 2014
[9]中國薊馬科分類研究[D]. 張桂玲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003
本文編號:3715315
【文章頁數(shù)】:77 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
1 引言
1.1 普通大薊馬及其危害
1.2 薊馬抗藥性研究現(xiàn)狀
1.3 多殺菌素概述
1.3.1 多殺菌素
1.3.2 多殺菌素抗藥性研究現(xiàn)狀
1.4 昆蟲抗藥性與消化道細菌多樣性的關(guān)系
1.5 試驗方法簡介
1.5.1 AccQ·Tag高效液相色譜法
1.5.2 微生物多樣性測序技術(shù)
1.6 研究內(nèi)容
1.7 目的意義
2 材料與方法
2.1 試驗藥品
2.2 儀器設(shè)備
2.3 普通大薊馬對多殺菌素敏感毒力基線的建立
2.3.1 供試?yán)ハx
2.3.2 室內(nèi)生物測定方法
2.3.3 數(shù)據(jù)處理與分析
2.4 普通大薊馬田間種群對多殺菌素的抗性監(jiān)測
2.4.1 供試?yán)ハx
2.4.2 室內(nèi)生物測定方法
2.4.3 數(shù)據(jù)處理與分析
2.5 普通大薊馬對多殺菌素抗性機理研究
2.5.1 酶活測定
2.5.2 普通大薊馬對多殺菌素抗性與游離氨基酸的關(guān)系
2.5.3 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群消化道細菌多樣性測定
2.6 普通大薊馬不同種群親緣關(guān)系鑒定
2.6.1 供試?yán)ハx
2.6.2 DNA提取
2.6.3 PCR擴增與測序
2.6.4 PCR產(chǎn)物回收與純化
2.6.5 質(zhì)粒連接
2.6.6 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化及白斑篩選
2.6.7 轉(zhuǎn)化子檢測
2.6.8 測序
2.6.9 數(shù)據(jù)處理
2.7 替代藥劑研究與篩選
2.7.1 普通大薊馬對乙基多殺菌素敏感毒力基線建立及抗性監(jiān)測
2.7.2 5種揮發(fā)性小分子化合物室內(nèi)篩選
2.7.3 田間藥效試驗
3 結(jié)果與分析
3.1 普通大薊馬敏感種群的建立
3.1.1 不同齡期的形態(tài)觀察
3.1.2 敏感毒力基線的建立
3.2 普通大薊馬田間種群對多殺菌素的抗性監(jiān)測結(jié)果
3.2.1 2015年抗性監(jiān)測結(jié)果
3.2.2 2016年抗性監(jiān)測結(jié)果
3.3 普通大薊馬對多殺菌素抗性與酶活的關(guān)系
3.3.1 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群體內(nèi)SOD活力變化
3.3.2 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群體內(nèi)CAT活力變化
3.3.3 普通大薊馬敏感種群及多殺菌素抗性種群體內(nèi)GST活力變化
3.4 游離氨基酸檢測結(jié)果
3.4.1 不同種群體內(nèi)氨基酸豐度與抗性的關(guān)系
3.4.2 氨基酸含量與抗性的關(guān)系
3.5 普通大薊馬消化道細菌多樣性結(jié)果
3.5.1 消化道細菌總DNA提取及檢測結(jié)果
3.5.2 消化道細菌16sRNA基因PCR擴增結(jié)果
3.5.3 OTU分析
3.5.4 Alpha多樣性分析
3.5.5 Beta多樣性分析
3.5.6 不同種群消化道細菌群落物種組成分析
3.5.7 消化道細菌多樣性與抗性相關(guān)性分析
3.5.8 部分細菌(以屬為分類單位)與普通大薊馬對多殺菌素抗性的關(guān)系
3.6 不同種群親緣關(guān)系鑒定
3.6.1 PCR產(chǎn)物檢測
3.6.2 遺傳距離計算及系統(tǒng)發(fā)育樹構(gòu)建
3.7 替代藥劑篩選
3.7.1 普通大薊馬對乙基多殺菌素的敏感毒力基線的建立及抗性監(jiān)測
3.7.2 5種揮發(fā)性小分子化合物對普通大薊馬室內(nèi)生測結(jié)果
3.7.3 田間藥效試驗結(jié)果分析
4 討論
4.1 普通大薊馬對多殺菌素敏感毒力基線建立與抗性監(jiān)測
4.2 普通大薊馬對多殺菌素的抗性機理研究
4.2.1 普通大薊馬對多殺菌素抗性與酶活的關(guān)系
4.2.2 普通大薊馬對多殺菌素抗性與游離氨基酸的關(guān)系
4.2.3 普通大薊馬對多殺菌素抗性與消化道細菌多樣性的關(guān)系
4.2.4 解毒酶、游離氨基酸及消化道細菌互作與抗性的關(guān)系
4.3 普通大薊馬不同種群親緣關(guān)系
4.4 普通大薊馬防治替代藥劑的研究與篩選
5 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]昆蟲腸道微生物多樣性研究進展[J]. 魯迎新,劉彥群,李群,夏潤璽,王歡. 河南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2016(11)
[2]Effect of heat shock on the susceptibility of Frankliniella occidentalis(Thysanoptera:Thripidae) to insecticides[J]. ZHANG Bin,ZUO Tai-qiang,LI Hong-gang,SUN Li-juan,WANG Si-fang,ZHENG Chang-ying,WAN Fang-hao. Journal of Integrative Agriculture. 2016(10)
[3]海南地區(qū)豆大薊馬田間種群的抗藥性監(jiān)測[J]. 唐良德,趙海燕,付步禮,韓云,閆凱莉,邱海燕,劉奎,吳建輝,李鵬. 環(huán)境昆蟲學(xué)報. 2016(05)
[4]海南省香蕉黃胸薊馬田間種群的抗藥性監(jiān)測[J]. 付步禮,劉俊峰,邱海燕,唐良德,林軍,曾東強,謝藝賢,劉奎. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2016(02)
[5]沃爾巴克氏體與淡色庫蚊溴氰菊酯抗性關(guān)系初步研究[J]. 洪善超,呂園,方福謹(jǐn),朱昌亮. 中國血吸蟲病防治雜志. 2014(06)
[6]不同藥劑對三亞地區(qū)豇豆上普通大薊馬的毒力[J]. 肖春雷,劉勇,吳青君,張友軍,吳乾興,袁廷慶,羅豐,萬三連,孔祥義. 植物保護. 2014(06)
[7]西花薊馬田間種群對常用殺蟲劑的抗性現(xiàn)狀及防治對策[J]. 王圣印,張安盛,李麗莉,門興元,周仙紅,翟一凡,劉永杰,魏書軍,于毅. 昆蟲學(xué)報. 2014(05)
[8]昆蟲內(nèi)共生菌及其功能研究進展[J]. 楊義婷,郭建洋,龍楚云,劉懷,萬方浩. 昆蟲學(xué)報. 2014(01)
[9]普通大薊馬在海南豇豆上的空間分布型[J]. 范詠梅,童曉立,高良舉,王萌,柳志強,張宇,楊葉. 環(huán)境昆蟲學(xué)報. 2013(06)
[10]西花薊馬對多殺菌素的抗性生化機制研究[J]. 侯文杰,李飛,吳青君,徐寶云,張友軍. 應(yīng)用昆蟲學(xué)報. 2013(04)
博士論文
[1]氯氰菊酯降解菌株的篩選、鑒定、降解機制及應(yīng)用研究[D]. 張雋.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]南亞實蠅成蟲腸道微生物分子多樣性分析及引誘效果[D]. 駱米娟.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[2]斜紋夜蛾腸道細菌多樣性及其功能研究[D]. 藍波妙.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[3]褐紋甘蔗象腸道菌群的結(jié)構(gòu)及其對宿主營養(yǎng)分配的影響[D]. 方亞.福建農(nóng)林大學(xué) 2016
[4]毒死蜱降解菌的分離、鑒定以及聯(lián)合植物促生菌對土壤的改良[D]. 蔣秋悅.上海師范大學(xué) 2015
[5]小菜蛾腸道共生菌多態(tài)性及與Bt協(xié)同作用研究[D]. 戴楠晶.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[6]氨基酸營養(yǎng)添加對巴氏新小綏螨及其替代獵物腐食酪螨的影響[D]. 程成.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[7]香蕉花薊馬的抗藥性監(jiān)測及其生化機理初步研究[D]. 付步禮.廣西大學(xué) 2014
[8]白背飛虱體內(nèi)細菌多樣性及其與攜帶南方水稻黑條矮縮病毒能力的關(guān)系研究[D]. 康小影.浙江大學(xué) 2014
[9]中國薊馬科分類研究[D]. 張桂玲.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2003
本文編號:3715315
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