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重要檢疫性蛾類及乳白蟻DNA條形碼檢測技術(shù)研究與應(yīng)用

發(fā)布時間:2022-12-08 01:37
  外來有害生物種類的準(zhǔn)確鑒定是口岸植物檢疫工作中的重要環(huán)節(jié)?诎稒z疫工作中昆蟲鑒定目前主要依賴于形態(tài)學(xué)分類方法,但傳統(tǒng)的形態(tài)鑒定有些不足,如鑒定結(jié)果受主觀影響較大、昆蟲的卵或幼蟲等早期形態(tài)與殘缺蟲體難以鑒定等,嚴(yán)重影響了檢疫工作的準(zhǔn)確性和疫情檢出率,增加了檢疫性有害生物的傳入風(fēng)險。蛾類,隸屬于鱗翅目,大部分種類在幼蟲期可以危害林木、糧、棉、蔬菜、油料、藥材等各種農(nóng)林植物和儲藏物,常造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失,對我國農(nóng)林生產(chǎn)構(gòu)成了極大的威脅。近年來,隨著國際貿(mào)易的不斷發(fā)展,進(jìn)口貨物上特別是水果、干果、苗木等攜帶的蛾類種類急劇增長,全國各檢驗檢疫口岸截獲了大量的蛾類幼蟲、蛹和成蟲。對我國農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和森林生態(tài)環(huán)境的威脅正在不斷加劇。乳白蟻Coptotermes spp.作為檢疫性有害生物的一個重要類群,近十多年來在進(jìn)口原木中的截獲率呈現(xiàn)快速增加的趨勢,我國口岸植物檢疫部門歷年從進(jìn)口木材中截獲乳白蟻種類記錄占白蟻總數(shù)的1/3以上。然而,乳白蟻的分類鑒定的難題為世界分類專家所公認(rèn),由于形態(tài)趨同、生殖器退化,可做鑒定的形態(tài)特征很少,該屬在分類上比較混亂,種類鑒定難度大,同物異名和同名異物現(xiàn)象比較普遍。DNA條... 

【文章頁數(shù)】:91 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
致謝
摘要
abstract
第一章 緒論
    1 近年來我國口岸截獲的蛾類和乳白蟻的種類
        1.1 我國口岸截獲的蛾類種類
        1.2 我國口岸截獲乳白蟻種類
    2 有害生物檢測技術(shù)研究現(xiàn)狀及其趨勢
        2.1 有害生物檢測技術(shù)現(xiàn)狀
        2.2 分子生物學(xué)技術(shù)在昆蟲檢疫中的應(yīng)用
        2.3 有害生物檢測技術(shù)發(fā)展趨勢
    3 昆蟲DNA條形碼檢測技術(shù)研究
        3.1 DNA條形碼概念和原理
        3.2 DNA條形碼的選擇標(biāo)準(zhǔn)
        3.3 DNA條形碼評價方法
        3.4 DNA條形碼技術(shù)研究進(jìn)展
        3.5 DNA條形碼技術(shù)在植物檢疫中的應(yīng)用
    4 本研究的目的和意義
    5 主要研究內(nèi)容及預(yù)期目標(biāo)
    6 技術(shù)路線
第二章 基于COⅠ基因的美國白蛾分子檢測技術(shù)研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 供試蟲源
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 美國白蛾與近似種COⅠ基因的獲得
        3.2 美國白蛾COⅠ基因?qū)崟r熒光PCR體系的建立
        3.3 美國白蛾COⅠ基因熒光PCR靈敏度檢測
    4 小結(jié)和討論
第三章 口岸截獲檢疫性蛾類DNA條形碼技術(shù)研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 材料
        2.2 方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 DNA條形碼基因擴(kuò)增結(jié)果
        3.2 DNA條形碼分析結(jié)果
    4 討論
第四章 舞毒蛾不同地理種群COⅠ基因的遺傳差異和熒光定量檢測
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 供試?yán)ハx
        2.2 總DNA提取
        2.3 PCR擴(kuò)增和序列測定
        2.4 PCR熒光定量檢測
        2.5 COⅠ基因序列分析方法
    3 結(jié)果與分析
        3.1 舞毒蛾COⅠ基因的PCR擴(kuò)增和序列特征
        3.2 舞毒蛾不同地理種群COⅠ基因的差異
        3.3 不同地理種群遺傳分化
        3.4 TaqMan-MGB探針基因分型檢測
    4.討論
        4.1 舞毒蛾不同地理種群的遺傳分化
        4.2 TaqManMGB探針應(yīng)用于舞毒蛾不同地理種群的檢測
第五章 DNA條形碼技術(shù)在果園蛾類害蟲鑒定中的應(yīng)用
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 供試?yán)ハx
        2.2 DNA提取
        2.3 PCR擴(kuò)增和測序
        2.4 DNA序列數(shù)據(jù)的處理
    3 結(jié)果與分析
        3.1 DNA條形碼分析結(jié)果
        3.2 進(jìn)化樹構(gòu)建分析
    4 討論
第六章 乳白蟻屬Coptotermes遺傳變異研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 供試蟲樣
        2.2 DNA的提取
        2.3 PCR擴(kuò)增及檢測
        2.4 DNA序列數(shù)據(jù)的處理及分子系統(tǒng)樹構(gòu)建
    3 結(jié)果和分析
        3.1 COⅠ基因片段的擴(kuò)增和分析
        3.2 COⅡ基因片段的擴(kuò)增和分析
        3.3 16S rRNA基因片段的擴(kuò)增和分析
        3.4 ITS基因片段的擴(kuò)增和分析
        3.5 遺傳距離分析
        3.6 分子系統(tǒng)樹構(gòu)建與分析
    4 討論
第七章 基于COⅡ和ITS基因序列特征的乳白蟻分子鑒定技術(shù)研究
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 供試蟲樣
        2.2 DNA模板的制備
        2.3 特異性引物及探針設(shè)計
        2.4 熒光PCR反應(yīng)體系的建立及優(yōu)化
        2.5 靈敏度檢測
    3 結(jié)果與分析
        3.1 實時熒光PCR反應(yīng)體系的建立
        3.2 實時熒光PCR的特異性驗證
        3.3 熒光PCR靈敏度檢測
    4 討論
第八章 全文總結(jié)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文和專利授權(quán)
參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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[3]中國乳白蟻屬分類修訂研究[D]. 丁俊杰.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]食品果實中不同地理種群舞毒蛾分子鑒定研究[D]. 林瑤.上海海洋大學(xué) 2013
[5]基于DNA條形碼技術(shù)的重樓正偽品鑒定方法研究[D]. 姜黎.瀘州醫(yī)學(xué)院 2013
[6]DNA條形碼技術(shù)在我國常見薊馬種類識別及西花薊馬傳播擴(kuò)散趨勢分析中的應(yīng)用[D]. 喬瑋娜.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[7]檢疫性乳白蟻系統(tǒng)發(fā)育及分子鑒定技術(shù)研究[D]. 權(quán)永兵.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[8]基于COI基因的蘋果蠹蛾地理種群遺傳差異分析及幼蟲快速分子鑒定[D]. 董昆.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010
[9]DNA條形碼候選序列在百合科植物鑒定中的應(yīng)用[D]. 吳春穎.北京林業(yè)大學(xué) 2009
[10]中國進(jìn)口貨物木質(zhì)包裝傳帶有害生物風(fēng)險分析報告[D]. 王益愚.北京林業(yè)大學(xué) 2007



本文編號:3713282

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