硫營(yíng)養(yǎng)影響水稻與PXO99互作機(jī)理的分析
發(fā)布時(shí)間:2022-12-06 03:20
水稻白葉枯病是由革蘭氏陰性黃單孢菌水稻變種(Xantgomonas oryzae pv.Oryzae,Xoo)所引起的一種細(xì)菌性病害,細(xì)菌通常從水孔或傷口侵入水稻,沿葉脈維管束產(chǎn)生灰白色病斑。水稻遭受白葉枯病后,一般減產(chǎn)10%以上,嚴(yán)重時(shí)甚至絕收,是僅次于稻瘟病的水稻第二大病害。許多含硫化合物參與了植物抵抗各種病蟲(chóng)害的過(guò)程,并且在水稻苗期施用硫酸銨較硝銨、尿素和碳銨更能提高稻苗的抗病能力,因此推測(cè)水稻硫代謝與其抗病能力密切相關(guān)。Xa21為水稻白葉枯病PXO99的抗性基因,PXO99中含Ax21無(wú)毒因子,其與Xa21互作誘導(dǎo)水稻產(chǎn)生抗性。本文中,我們主要以CX621B(轉(zhuǎn)入Xa21基因的轉(zhuǎn)基因水稻)和D62B(未轉(zhuǎn)入Xa21基因)兩種不同的水稻作為材料研究水稻的抗PXO99情況。通過(guò)不同硫營(yíng)養(yǎng)梯度處理水稻,用PXO99進(jìn)行侵染接種葉片,測(cè)量葉片的病斑長(zhǎng)度,發(fā)現(xiàn)在0-0.5mM時(shí),隨著硫濃度的升高,病斑長(zhǎng)度逐漸升高;在3.3-10mM時(shí),隨著硫濃度的進(jìn)一步升高,病斑長(zhǎng)度逐漸降低。而在外源茉莉酸或其生物合成抑制劑存在下,對(duì)于CX621B,高濃度硫酸鹽下的病斑長(zhǎng)度降低至0.5mM病斑長(zhǎng)度的50...
【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻(xiàn)綜述
第一章 硫?qū)χ参锟共⌒缘难芯窟M(jìn)展
1 硫營(yíng)養(yǎng)與植物抗病性的關(guān)系
2 Xa21與白葉枯菌(Xoo)之間的關(guān)系
3 含硫化合物與植物抗病性的關(guān)系
第二章 植物激素對(duì)植物抗病性的研究進(jìn)展
1 植物激素研究進(jìn)展
1.1 JA(茉莉酸)/SA(水楊酸)/ET(乙烯)信號(hào)途徑
1.2 ABA(脫落酸)
第三章 本課題研究目的及意義
技術(shù)路線(xiàn)
第二部分 研究?jī)?nèi)容
第一章 硫營(yíng)養(yǎng)在Xa21轉(zhuǎn)基因水稻抗PX099中的生理作用分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 分子生物學(xué)試劑與生化試劑
2.2 菌株與載體
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 水稻白葉枯菌PX099培養(yǎng)和洗滌
2.4 轉(zhuǎn)基因水稻CX621B與野生型水稻D62B培養(yǎng)和生理分析
2.4.1 轉(zhuǎn)基因水稻CX621B與野生型水稻D62B萌發(fā)與培養(yǎng)
2.5 轉(zhuǎn)基因水稻(CX621B)和野生型水稻(D62B)的生理檢測(cè)
2.5.1 水稻葉片中葉綠素的提取
2.5.2 水稻葉片中木質(zhì)素的提取
2.5.3 水稻葉片中谷胱甘肽(GSH)的提取
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 兩種水稻(CX621B和D62B)病斑長(zhǎng)度的測(cè)量
3.2 兩種水稻(CX621B和D62B)生理測(cè)定
3.2.1 不同的硫酸鹽濃度對(duì)葉綠素含量的檢測(cè)
3.2.3 不同的硫酸鹽濃度對(duì)水稻木質(zhì)素含量的檢測(cè)
3.2.5 不同硫酸鹽梯度處理對(duì)水稻葉片中GSH含量的影響
4 討論
第二章 硫營(yíng)養(yǎng)在Xa21轉(zhuǎn)基因水稻抗PX099中相關(guān)激素表達(dá)分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 酶與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)材料
2.3 水稻葉片總RNA的提取
2.4 反轉(zhuǎn)錄
2.5 RT-PCR引物構(gòu)建與篩選
2.6 RT-PCR擴(kuò)增條件及程序
2.7 水稻內(nèi)源JA、ABA響應(yīng)基因的篩選與SA的檢測(cè)
2.7.1 外源JA(茉莉酸)和ABA(脫落酸)處理水稻
2.7.2 水稻內(nèi)源SA(水楊酸)含量檢測(cè)
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 脫落酸響應(yīng)基因的篩選
3.1.1 蛋白質(zhì)同源性比對(duì)
3.1.2 OsRD22轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
3.1.3 OsLEA7轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
3.1.4 OsLTP4轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
3.2 茉莉酸響應(yīng)基因的篩選
3.3 CX621B和D62B葉片中激素水平的分析
3.3.1 CX621B和D62B中OsJAZ8相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平的測(cè)定
3.3.2 CX621B和D62B中OsRD22相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平的測(cè)定
3.4 不同的硫濃度條件下處理CX621B與D62B中SA的含量
3.5 不同的硫濃度條件Xa21的表達(dá)量
4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
本文編號(hào):3710952
【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻(xiàn)綜述
第一章 硫?qū)χ参锟共⌒缘难芯窟M(jìn)展
1 硫營(yíng)養(yǎng)與植物抗病性的關(guān)系
2 Xa21與白葉枯菌(Xoo)之間的關(guān)系
3 含硫化合物與植物抗病性的關(guān)系
第二章 植物激素對(duì)植物抗病性的研究進(jìn)展
1 植物激素研究進(jìn)展
1.1 JA(茉莉酸)/SA(水楊酸)/ET(乙烯)信號(hào)途徑
1.2 ABA(脫落酸)
第三章 本課題研究目的及意義
技術(shù)路線(xiàn)
第二部分 研究?jī)?nèi)容
第一章 硫營(yíng)養(yǎng)在Xa21轉(zhuǎn)基因水稻抗PX099中的生理作用分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 分子生物學(xué)試劑與生化試劑
2.2 菌株與載體
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 水稻白葉枯菌PX099培養(yǎng)和洗滌
2.4 轉(zhuǎn)基因水稻CX621B與野生型水稻D62B培養(yǎng)和生理分析
2.4.1 轉(zhuǎn)基因水稻CX621B與野生型水稻D62B萌發(fā)與培養(yǎng)
2.5 轉(zhuǎn)基因水稻(CX621B)和野生型水稻(D62B)的生理檢測(cè)
2.5.1 水稻葉片中葉綠素的提取
2.5.2 水稻葉片中木質(zhì)素的提取
2.5.3 水稻葉片中谷胱甘肽(GSH)的提取
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 兩種水稻(CX621B和D62B)病斑長(zhǎng)度的測(cè)量
3.2 兩種水稻(CX621B和D62B)生理測(cè)定
3.2.1 不同的硫酸鹽濃度對(duì)葉綠素含量的檢測(cè)
3.2.3 不同的硫酸鹽濃度對(duì)水稻木質(zhì)素含量的檢測(cè)
3.2.5 不同硫酸鹽梯度處理對(duì)水稻葉片中GSH含量的影響
4 討論
第二章 硫營(yíng)養(yǎng)在Xa21轉(zhuǎn)基因水稻抗PX099中相關(guān)激素表達(dá)分析
1 前言
2 材料與方法
2.1 酶與試劑
2.2 實(shí)驗(yàn)材料
2.3 水稻葉片總RNA的提取
2.4 反轉(zhuǎn)錄
2.5 RT-PCR引物構(gòu)建與篩選
2.6 RT-PCR擴(kuò)增條件及程序
2.7 水稻內(nèi)源JA、ABA響應(yīng)基因的篩選與SA的檢測(cè)
2.7.1 外源JA(茉莉酸)和ABA(脫落酸)處理水稻
2.7.2 水稻內(nèi)源SA(水楊酸)含量檢測(cè)
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1 脫落酸響應(yīng)基因的篩選
3.1.1 蛋白質(zhì)同源性比對(duì)
3.1.2 OsRD22轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
3.1.3 OsLEA7轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
3.1.4 OsLTP4轉(zhuǎn)錄表達(dá)分析
3.2 茉莉酸響應(yīng)基因的篩選
3.3 CX621B和D62B葉片中激素水平的分析
3.3.1 CX621B和D62B中OsJAZ8相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平的測(cè)定
3.3.2 CX621B和D62B中OsRD22相對(duì)轉(zhuǎn)錄水平的測(cè)定
3.4 不同的硫濃度條件下處理CX621B與D62B中SA的含量
3.5 不同的硫濃度條件Xa21的表達(dá)量
4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
本文編號(hào):3710952
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