水稻白葉枯病是由革蘭氏陰性黃單孢菌水稻變種（Xantgomonas oryzae pv.Oryzae,Xoo）所引起的一種細菌性病害,細菌通常從水孔或傷口侵入水稻,沿葉脈維管束產(chǎn)生灰白色病斑。水稻遭受白葉枯病后,一般減產(chǎn)10%以上,嚴重時甚至絕收,是僅次于稻瘟病的水稻第二大病害。許多含硫化合物參與了植物抵抗各種病蟲害的過程,并且在水稻苗期施用硫酸銨較硝銨、尿素和碳銨更能提高稻苗的抗病能力,因此推測水稻硫代謝與其抗病能力密切相關。Xa21為水稻白葉枯病PXO99的抗性基因,PXO99中含Ax21無毒因子,其與Xa21互作誘導水稻產(chǎn)生抗性。本文中,我們主要以CX621B（轉(zhuǎn)入Xa21基因的轉(zhuǎn)基因水稻）和D62B（未轉(zhuǎn)入Xa21基因）兩種不同的水稻作為材料研究水稻的抗PXO99情況。通過不同硫營養(yǎng)梯度處理水稻,用PXO99進行侵染接種葉片,測量葉片的病斑長度,發(fā)現(xiàn)在0-0.5mM時,隨著硫濃度的升高,病斑長度逐漸升高;在3.3-10mM時,隨著硫濃度的進一步升高,病斑長度逐漸降低。而在外源茉莉酸或其生物合成抑制劑存在下,對于CX621B,高濃度硫酸鹽下的病斑長度降低至0.5mM病斑長度的50... 

【文章頁數(shù)】：81 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一部分 文獻綜述
    第一章 硫?qū)χ参锟共⌒缘难芯窟M展
        1 硫營養(yǎng)與植物抗病性的關系
        2 Xa21與白葉枯菌(Xoo)之間的關系
        3 含硫化合物與植物抗病性的關系
    第二章 植物激素對植物抗病性的研究進展
        1 植物激素研究進展
            1.1 JA(茉莉酸)/SA(水楊酸)/ET(乙烯)信號途徑
            1.2 ABA(脫落酸)
    第三章 本課題研究目的及意義
    技術路線
第二部分 研究內(nèi)容
    第一章 硫營養(yǎng)在Xa21轉(zhuǎn)基因水稻抗PX099中的生理作用分析
        1 前言
        2 材料與方法
            2.1 分子生物學試劑與生化試劑
            2.2 菌株與載體
            2.3 實驗方法
                2.3.1 水稻白葉枯菌PX099培養(yǎng)和洗滌
            2.4 轉(zhuǎn)基因水稻CX621B與野生型水稻D62B培養(yǎng)和生理分析
                2.4.1 轉(zhuǎn)基因水稻CX621B與野生型水稻D62B萌發(fā)與培養(yǎng)
            2.5 轉(zhuǎn)基因水稻(CX621B)和野生型水稻(D62B)的生理檢測
                2.5.1 水稻葉片中葉綠素的提取
                2.5.2 水稻葉片中木質(zhì)素的提取
                2.5.3 水稻葉片中谷胱甘肽(GSH)的提取
        3 實驗結(jié)果
            3.1 兩種水稻(CX621B和D62B)病斑長度的測量
            3.2 兩種水稻(CX621B和D62B)生理測定
                3.2.1 不同的硫酸鹽濃度對葉綠素含量的檢測
                3.2.3 不同的硫酸鹽濃度對水稻木質(zhì)素含量的檢測
                3.2.5 不同硫酸鹽梯度處理對水稻葉片中GSH含量的影響
        4 討論
    第二章 硫營養(yǎng)在Xa21轉(zhuǎn)基因水稻抗PX099中相關激素表達分析
        1 前言
        2 材料與方法
            2.1 酶與試劑
            2.2 實驗材料
            2.3 水稻葉片總RNA的提取
            2.4 反轉(zhuǎn)錄
            2.5 RT-PCR引物構建與篩選
            2.6 RT-PCR擴增條件及程序
            2.7 水稻內(nèi)源JA、ABA響應基因的篩選與SA的檢測
                2.7.1 外源JA(茉莉酸)和ABA(脫落酸)處理水稻
                2.7.2 水稻內(nèi)源SA(水楊酸)含量檢測
        3 實驗結(jié)果
            3.1 脫落酸響應基因的篩選
                3.1.1 蛋白質(zhì)同源性比對
                3.1.2 OsRD22轉(zhuǎn)錄表達分析
                3.1.3 OsLEA7轉(zhuǎn)錄表達分析
                3.1.4 OsLTP4轉(zhuǎn)錄表達分析
            3.2 茉莉酸響應基因的篩選
            3.3 CX621B和D62B葉片中激素水平的分析
                3.3.1 CX621B和D62B中OsJAZ8相對轉(zhuǎn)錄水平的測定
                3.3.2 CX621B和D62B中OsRD22相對轉(zhuǎn)錄水平的測定
            3.4 不同的硫濃度條件下處理CX621B與D62B中SA的含量
            3.5 不同的硫濃度條件Xa21的表達量
        4 討論
結(jié)論與展望
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝



本文編號：3710952