家蠶是鱗翅目模式昆蟲,也是重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲,蠶絲具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,是很多地區(qū)農(nóng)民的主要收入來源。但是,家蠶病害的發(fā)生也給桑蠶業(yè)帶來了極大困擾,嚴(yán)重制約了蠶桑產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展。病毒病是蠶業(yè)生產(chǎn)上危害最大的疾病,其中家蠶核型多角體病毒（Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus,BmNPV）引起的血液型膿病危害最大,約占蠶病損失的70%,該病目前尚無法治療。因此從生產(chǎn)和安全方面來講,家蠶核型多角體病毒抗性基因的尋找和抗性品種的培育都是一項(xiàng)重要工作。本課題采用抗Bm NPV蠶品種華康2號一代雜交種來源的抗性品系A(chǔ)N、抗Bm NPV蠶品種野三元N中的抗性親本野BN和易感性品系C108作為研究材料,在明確供試蠶品種對BmNPV抵抗力的基礎(chǔ)上,構(gòu)建抗性遺傳分離群體,利用2b-RAD分析技術(shù),探索AN、野BN品種的BmNPV抗性遺傳機(jī)制,主要實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和結(jié)果如下:1.家蠶AN、野BN與C108品系的BmNPV抗性鑒定抗性品系A(chǔ)N在2齡起蠶Bm NPV多角體添食的半數(shù)致死濃度（LC50）為2.154×109個(gè)/m L、半數(shù)致死劑量（LD50）為1.436×107個(gè)/頭蠶。... 

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮寫
第1章 緒論
    1.1 引言
    1.2 BmNPV的研究概況
        1.2.1 Bm NPV的侵染過程
        1.2.2 Bm NPV感染癥狀
    1.3 家蠶抗BmNPV的研究進(jìn)展
        1.3.1 影響家蠶對Bm NPV抵抗性的因素
        1.3.2 蛋白水平上家蠶對Bm NPV抗性的研究進(jìn)展
        1.3.3 基因水品上家蠶抗Bm NPV的研究進(jìn)展
        1.3.4 家蠶對Bm NPV的抗性及遺傳規(guī)律研究
    1.4 RAD-seq技術(shù)與 2b-RAD技術(shù)的發(fā)展及應(yīng)用
        1.4.1 RAD-seq技術(shù)的發(fā)展
        1.4.2 2b-RAD技術(shù)及應(yīng)用
    1.5 本課題的研究目的、意義和方法
第2章 家蠶AN品系BmNPV抗性基因的 2b-RAD分析
    2.1 引言
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 常用溶液及緩沖液
    2.3 實(shí)驗(yàn)材料
        2.3.1 供試蠶品種（品系）
        2.3.2 遺傳材料組配方式
    2.4 實(shí)驗(yàn)方法
        2.4.1 Bm NPV多角體病毒制備接種及AN品系耐受檢驗(yàn)
        2.4.2 親本及遺傳分離群體病毒接種與取材
        2.4.3 家蠶基因組DNA提取
        2.4.4 2b-RAD建庫流程
        2.4.5 全基因組范圍SNP篩查和分型
        2.4.6 各染色體SNP標(biāo)記的BmNPV抗性關(guān)聯(lián)指數(shù)（SNP-index）與抗性貢獻(xiàn)率分析
    2.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.5.1 供試品種Bm NPV抗性鑒定與遺傳模式分析
        2.5.2 2b-RAD測序結(jié)果分析
        2.5.3 AN品系各染色體BmNPV抗性相關(guān)SNP-index分布及貢獻(xiàn)率
    2.6 討論
第3章 家蠶野BN品系BmNPV抗性基因的 2b-RAD分析
    3.1 引言
    3.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
    3.3 實(shí)驗(yàn)材料
        3.3.1 供試蠶品種（品系）
        3.3.2 遺傳材料組配方式
    3.4 實(shí)驗(yàn)方法
        3.4.1 Bm NPV多角體病毒制備接種及野BN品系耐受檢驗(yàn)
        3.4.2 遺傳分離群體病毒接種與取材
        3.4.3 家蠶基因組DNA提取
        3.4.4 2b-RAD建庫流程
        3.4.5 全基因組范圍SNP篩查和分型
        3.4.6 各染色體SNP標(biāo)記的BmNPV抗性關(guān)聯(lián)指數(shù)（SNP-index）與抗性貢獻(xiàn)率分析
    3.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.5.1 添毒濃度選擇
        3.5.2 2b-RAD測序結(jié)果分析
        3.5.3 家蠶野BN各染色體BmNPV抗性相關(guān)SNP-index分布及貢獻(xiàn)率
    3.6 討論
第4章 基于 2b-RAD技術(shù)的家蠶AN品系與野BN品系的抗BmNPV的差異化分析
    4.1 引言
    4.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器和試劑
    4.3 實(shí)驗(yàn)材料
    4.4 實(shí)驗(yàn)方法
    4.5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.5.1 基于 2b-RAD技術(shù)的各染色體抗性貢獻(xiàn)率分析
        4.5.2 基于高值SNP-index的標(biāo)記個(gè)數(shù)的差異分析
    4.6 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[5]高通量測序技術(shù)及其應(yīng)用[J]. 王興春,楊致榮,王敏,李瑋,李生才.  中國生物工程雜志. 2012(01)
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[7]野三元的品種性狀及繁育要點(diǎn)[J]. 宋世兵,鐘曉霞,李莉.  北方蠶業(yè). 2008(04)
[8]強(qiáng)健性多絲量蠶品種“野三元”的育成[J]. 吳陽春,錢平,何斯美.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(33)
[9]家蠶對核型多角體病的抗性及遺傳規(guī)律的研究[J]. 陳克平，林昌麒，姚勤.  蠶業(yè)科學(xué). 1996(03)
[10]家蠶對核型多角體病毒病抵抗性遺傳規(guī)律的研究[J]. 孟智啟.  蠶業(yè)科學(xué). 1982(03)

碩士論文
[1]利用RAD-seq測序構(gòu)建美洲黑楊×小葉楊高密度遺傳連鎖圖譜[D]. 王瑩.南京林業(yè)大學(xué) 2014



本文編號：3665115