為明確小麥條銹菌Puccinia striiformis f. sp. tritici效應(yīng)子Hasp8的功能,以小麥條銹菌CYR31侵染水源11小麥葉片的cDNA為模板,通過PCR技術(shù)擴增獲得Hasp8基因的完整編碼區(qū)序列,采用qRTPCR技術(shù)測定Hasp8基因的表達情況,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)馬鈴薯X病毒（potato virus X,PVX）瞬時表達體系在煙草上驗證Hasp8基因是否能夠抑制由Bax蛋白誘導(dǎo)的細胞壞死,將Hasp8基因構(gòu)建到pCAMBIA1302載體用于在煙草上瞬時表達Hasp8進行亞細胞定位以明確該效應(yīng)蛋白的作用空間;并將Hasp8基因構(gòu)建到p EDV6載體上用于熒光假單胞菌Pseudomonas fluorescens介導(dǎo)的瞬時表達系統(tǒng)以明確該效應(yīng)蛋白是否能夠抑制病原相關(guān)分子模式引發(fā)的免疫反應(yīng)和效應(yīng)蛋白誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)。結(jié)果表明,Hasp8基因編碼117個氨基酸,N端含22 aa的信號肽;qRT-PCR結(jié)果顯示,Hasp8基因在小麥條銹菌CYR31侵染小麥水源11的早期上調(diào)表達。煙草瞬時表達Hasp8基因能夠抑制由Bax誘導(dǎo)的細胞壞死;煙草上亞細胞定位發(fā)現(xiàn)效應(yīng)子Hasp8... 

【文章頁數(shù)】：9 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 小麥條銹菌Hasp8基因克隆與序列分析
        1.2.2 Hasp8表達特征分析
        1.2.3 效應(yīng)子Hasp8的亞細胞定位
        1.2.4 Hasp8抑制BAX誘導(dǎo)的細胞程序性死亡
        1.2.5 細菌三型分泌系統(tǒng)介導(dǎo)的小麥瞬時轉(zhuǎn)化
    1.3 數(shù)據(jù)分析
2 結(jié)果與分析
    2.1 小麥條銹菌Hasp8預(yù)測含有信號肽
    2.2 Hasp8在小麥條銹菌侵染小麥過程中誘導(dǎo)表達
    2.3 效應(yīng)子Hasp8定位于煙草中細胞質(zhì)和細胞核
    2.4 效應(yīng)子Hasp8抑制BAX誘導(dǎo)的細胞壞死
    2.5 效應(yīng)子Hasp8抑制小麥的PTI反應(yīng)
    2.6 效應(yīng)子Hasp8抑制小麥的ETI反應(yīng)
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
[1]小麥條銹菌有性生殖與毒性變異的研究進展[J]. 趙杰,鄭丹,左淑霞,王龍,黃麗麗,康振生.  植物保護學(xué)報. 2018(01)



本文編號：3663299