蠶蛹自古就是滋補(bǔ)強(qiáng)身,溫和脾腎的食品,具有很高的營養(yǎng)和藥用價(jià)值。蠶蛹中含有豐富的蛋白質(zhì)和人體必需的氨基酸、維生素及微量元素,是一種優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)原料。我國每年可產(chǎn)新鮮蠶蛹70萬噸以上,大多當(dāng)作動(dòng)物飼料處理,并未得到合理的利用。研究表明蛋白質(zhì)經(jīng)酶的降解可產(chǎn)生大量小分子肽段,而人類攝食蛋白質(zhì)經(jīng)消化道的酶作用后,大多也是以低肽形式消化吸收。其中有些多肽片段能顯著改善肌體的生命活動(dòng),如促進(jìn)消化吸收,增強(qiáng)免疫力,調(diào)節(jié)激素分泌等,這些多肽被稱為生物活性肽。為了拓展蠶蛹利用途徑,以蠶蛹作為蛋白原料制備生物活性肽。本文采用堿處理法提取蠶蛹蛋白,分別對其進(jìn)行超微粉碎和超聲波粉碎處理,并結(jié)合堿性蛋白酶酶解的方法獲得酶解液;之后以促小鼠脾細(xì)胞增殖能力為指標(biāo),經(jīng)葡聚糖凝膠層析法分離蠶蛹蛋白免疫肽;高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用鑒定免疫肽的氨基酸序列;小鼠脾淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)和體外抗氧化試驗(yàn)驗(yàn)證其生物學(xué)活性;體外模擬胃腸道實(shí)驗(yàn)評價(jià)該免疫肽對胃腸道酶的耐受性;通過檢測其對小鼠脾細(xì)胞免疫相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá),探索蠶蛹蛋白免疫肽的作用機(jī)制。取得如下研究結(jié)果:蠶蛹進(jìn)行石油醚脫脂后,采用堿提取法獲得蠶蛹蛋白,分別經(jīng)堿性蛋白酶酶解,超微粉碎-... 

【文章來源】：江蘇科技大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 生物活性肽
        1.1.2 生物活性肽的分類
        1.1.3 生物活性肽的制備
    1.2 蠶蛹蛋白活性肽的研究進(jìn)展
        1.2.1 蠶蛹蛋白活性肽的制備方法
        1.2.2 蠶蛹蛋白活性肽的分離純化方法
        1.2.3 蠶蛹蛋白活性肽在食品工業(yè)中的應(yīng)用
        1.2.4 蠶蛹蛋白活性肽在醫(yī)藥中的應(yīng)用
        1.2.5 蠶蛹蛋白活性肽應(yīng)用中存在的問題
    1.3 本研究的目的與意義
第2章 蠶蛹蛋白酶解液的制備
    2.1 前言
    2.2 試驗(yàn)材料與儀器設(shè)備
        2.2.1 材料與試劑
        2.2.2 試驗(yàn)儀器與設(shè)備
    2.3 試驗(yàn)方法
        2.3.1 蠶蛹基本組成及含量測定
        2.3.2 蠶蛹蛋白質(zhì)的制備
        2.3.3 蠶蛹蛋白酶解液的制備
        2.3.4 酶解液濃度測定
        2.3.5 小鼠脾淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 蠶蛹基本成分測定
        2.4.2 不同酶解液對小鼠脾淋巴細(xì)胞的作用效果
    2.5 本章小結(jié)
第3章 蠶蛹蛋白免疫肽的分離純化與結(jié)構(gòu)鑒定
    3.1 前言
    3.2 試驗(yàn)材料與儀器設(shè)備
        3.2.1 試驗(yàn)材料
        3.2.2 試驗(yàn)儀器與設(shè)備
    3.3 試驗(yàn)方法
        3.3.1 多肽的分離篩選
        3.3.2 多肽濃度測定
        3.3.3 小鼠脾淋巴細(xì)胞實(shí)驗(yàn)
        3.3.4 液相色譜分析
        3.3.5 氨基酸序列測定
    3.4 結(jié)果與討論
        3.4.1 超聲波-酶解組主要組分分離純化及氨基酸序列鑒定
        3.4.2 超微-酶解組主要組分分離純化及氨基酸序列鑒定
    3.5 本章小結(jié)
第4章 蠶蛹蛋白免疫肽功能性分析
    4.1 前言
    4.2 試驗(yàn)材料與儀器設(shè)備
        4.2.1 試驗(yàn)材料
        4.2.2 試驗(yàn)儀器與設(shè)備
    4.3 試驗(yàn)方法
        4.3.1 多肽溶液濃度的測定
        4.3.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞試驗(yàn)
        4.3.3 蠶蛹蛋白免疫肽對胃腸道酶耐受性測定
        4.3.4 蠶蛹蛋白免疫肽活性鑒定
        4.3.5 蠶蛹蛋白免疫肽體外抗氧化活性測定
    4.4 結(jié)果與討論
        4.4.1 免疫肽對人體胃腸道酶耐受性測定結(jié)果
        4.4.2 蠶蛹蛋白免疫肽活性鑒定結(jié)果
        4.4.3 免疫肽抗氧化能力測定結(jié)果
    4.5 本章小結(jié)
第5章 蠶蛹蛋白免疫肽作用機(jī)制初探
    5.1 前言
    5.2 試驗(yàn)材料與儀器設(shè)備
        5.2.1 試驗(yàn)材料
        5.2.2 試驗(yàn)儀器與設(shè)備
    5.3 試驗(yàn)方法
        5.3.1 多肽溶液濃度的測定
        5.3.2 小鼠脾淋巴細(xì)胞試驗(yàn)
        5.3.3 小鼠脾淋巴細(xì)胞總RNA的提取
        5.3.4 RNA濃度及純度的測定
        5.3.5 RNA完整性測定
        5.3.6 消化殘余DNA
        5.3.7 cDNA的合成
        5.3.8 熒光定量PCR檢測
    5.4 結(jié)果與討論
        5.4.1 RNA 濃度、純度及完整性測定結(jié)果
        5.4.2 免疫相關(guān)細(xì)胞因子表達(dá)量差異
    5.5 本章小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3644950