由葡萄單軸霜霉[Plasmopara viticola（Berk dt Curtis）Berl.Et de Toni]引起的葡萄霜霉�。℅rape downy mildew）是葡萄種植業(yè)中危害最嚴重的病害之一;葡萄霜霉病是流行性病害,嚴重時可對葡萄產(chǎn)業(yè)造成毀滅性影響。目前,田間采用抗性品種、栽培技術(shù)、生物防治以及化學防治等手段來防治葡萄霜霉病,其中化學防治為最重要的防治手段,而羧酸酰胺類殺菌劑和甲氧基丙烯酸酯類是最近幾年我國使用最廣泛的殺菌劑�；瘜W藥劑的頻繁使用可能導(dǎo)致葡萄霜霉菌逐漸產(chǎn)生抗藥性,檢測和了解葡萄霜霉病菌株抗性頻率是指導(dǎo)田間化學藥劑科學使用的依據(jù)。本研究建立了檢測羧酸酰胺類殺菌劑和甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑抗性的分子方法—Taqman-MGB技術(shù),并應(yīng)用該方法對遼寧省、山西省、云南省、河北省、湖北省、山東省及湖南省7個省行政區(qū)的重要葡萄產(chǎn)區(qū)的葡萄霜霉菌進行了烯酰嗎啉和嘧菌酯的抗性頻率檢測,為該地區(qū)烯酰嗎啉和嘧菌酯的使用提供科學依據(jù)。主要研究結(jié)果如下:1.葡萄霜霉菌對烯酰嗎啉和嘧菌酯抗藥性分子檢測方法（Taqman-MGB）的建立根據(jù)葡萄霜霉病菌對烯酰嗎啉抗性的基因突變位點（纖維... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

對羧酸酰胺類殺菌劑具有抗性的葡萄霜霉菌纖維素合酶基因測序分析

的葡萄霜霉病菌。馬輝杰等人經(jīng)試驗檢測2006年法國抗性菌株的頻率高達80%，比10%，2006年檢測發(fā)現(xiàn)西班牙西北部抗嘧菌酯的菌株頻率達到30% 左右，同時，在北部地區(qū)的抗性菌株的頻率水平也較高，但在澳大利亞、德國和葡萄牙抗性菌株的很低（馬輝杰, 2010）。著抗嘧菌酯的菌株頻率的升高，抗性菌株的研究也備受關(guān)注。Grasso等人發(fā)現(xiàn)對Qo性的霜霉菌的細胞色素氧化酶b細胞基因的第143位密碼子初發(fā)生了單堿基替換，處編碼的甘氨酸由丙氨酸代替。之后，在對QoI類殺菌劑具有抗性的部分稻瘟菌的酶b基因的第129位密碼子處也發(fā)現(xiàn)了單堿基的替換，但并不是所有對QoI類殺菌劑菌都含有此位點的突變。在抗性的P pachyrhizi中只存在G143位點的突變，而在抗ix病原菌中發(fā)現(xiàn)了G143、Y132、168-H82三個位點的突變，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)所有的抗性色素氧化酶b基因中均含有G143位點的突變，第129位密碼子處的突變存在的頻率較143A與F129L是與QoI類殺菌劑抗性相關(guān)性最大的兩個突變（Kraiczy, 1996; S對G143A、F129L 和G137R位點所發(fā)生的堿基突變而導(dǎo)致的抗藥性進行了抗性倍究發(fā)現(xiàn)由G143A位點突變導(dǎo)致的抗藥性，其抗性倍數(shù)較高，基本都大于100倍，而7R位點突變而產(chǎn)生的抗藥性，其抗性倍數(shù)相對較低，一般在5～15倍，只有少數(shù)會10年馬輝杰等人對嘧菌酯產(chǎn)生抗藥性的黃瓜霜霉病菌進行試驗，結(jié)果顯示其抗藥位點突變所致。

對遼寧省北鎮(zhèn)市、山西省清徐縣、河北省威縣、山東省蓬萊市、湖北省公安縣、湖南省懷化市、云南省永仁縣7個地區(qū)近幾年防治霜霉病用藥情況進行了調(diào)查。根據(jù)表3.1及相關(guān)計算方法，推算得到所調(diào)查的各葡萄產(chǎn)區(qū)各年份每畝地使用烯酰嗎啉的劑量，見圖3.2。表3.1 農(nóng)藥使用劑量的計算Table 3.1 The calculation of the pesticide application amount年份：xxxx經(jīng)銷商 1：所有防治葡萄霜霉病農(nóng)藥名稱銷售數(shù)量（公斤）該農(nóng)藥畝使用劑量（克制劑/畝）銷售的農(nóng)藥使用畝次數(shù)藥劑中含烯酰嗎啉的量（%）該銷售部年銷售烯酰嗎啉量（公斤）Pesticide name forControlling GrapeDowny MildewSales volumes Acre dose of thepesticideAcre dose of the salespesticideThe amount ofdimethomorphcontained in the drugAnnual sales ofdimethomorph in thesales department50%烯酰嗎啉 K0 A0 K0×1000÷A0= N0 K0×N0=農(nóng)藥 1 K1 A1 K1×1000÷A1= N1 K1×N1=農(nóng)藥 2 K2 A2 K2×1000÷A2= N2 K2×N2=農(nóng)藥 3 K3 A3 K3×1000÷A3= N3 K3×N4=┋ ┋ ┋ ┋ ┋ ┋總計 ∑1∑2該產(chǎn)區(qū)每年防治葡萄霜霉病使用農(nóng)藥的次數(shù)：M 次/畝（為調(diào)查數(shù)據(jù)）

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
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本文編號：3626019