樹錦雞兒（Caragana arborescens（Amm.）Lam.）枯枝病是在樹錦雞兒枝干上發(fā)現(xiàn)的一種新病害,需明確該病害的病原菌,了解其發(fā)生和侵染,并制定相應的防治措施。本文依據(jù)柯赫氏法則,對該病害進行了分離、純化、接種和再分離確定病原菌,并結(jié)合形態(tài)學和分子生物學鑒定出了該病害的病原菌;隨后對其進行了培養(yǎng)特性研究,確定最適生長條件;測定了該病原菌接種后引起的樹錦雞兒枝條皮層內(nèi)主要防御酶的變化;在對1～5年生的樹錦雞兒枝條內(nèi)生真菌群落分離鑒定基礎上,選取4株生防菌對病原菌進行室內(nèi)對峙培養(yǎng),篩選出具有最優(yōu)生防潛力的菌株;采用8種常見低毒殺菌劑對該病原菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制效果進行測定,并選出最佳藥劑。這些研究為該病害的防控奠定了基礎。主要研究結(jié)果如下:1、樹錦雞兒枯枝病病原菌的確定:采用單孢分離和組織分離的方法分離得到疑似病原菌的菌株S1,用燒傷、劃傷、無傷三種方法接種健康3～5年生水培枝條,30d后僅燒傷接種表現(xiàn)出典型癥狀。選擇燒傷接種進行野外接種試驗,發(fā)現(xiàn)野外接種的發(fā)病時間較室內(nèi)接種的短,且發(fā)病率高達83.3%。經(jīng)形態(tài)學鑒定和rDNA-ITS序列分析表明引起該病害的病原菌S1... 

【文章來源】：東北林業(yè)大學黑龍江省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２樹錦雞兒枯枝病的癥狀??Ｆｉｇ．２－２?Ｔｈｅ?ｓｙｍｐｔｏｍｓ?ｏｆ?Ｃａｒａｇａｎａ?ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ?（Ａｍｍ．）?Ｌａｍ．?ｂｒａｎｃｈ?ｂｌｉｇｌｉｔ??

?毛樣菌絲，每個子座上產(chǎn)生１？３個半透明的孔口，隨著分生孢子器的成熟，顏色逐漸加??深，成熟后變?yōu)槌赛S色，直徑０．６０？１．６８?＿（ｎ＝３０），個別直徑達到３．５?ｍｍ（圖２－３：?ｉ）。??另外，從菌絲的分支上也可以產(chǎn)生分生孢子，產(chǎn)孢細胞瓶梗形，（６．２？１６．０）?ｐｍｘ（１．７￣３．０）??ｐｍ（ｎ＝３０）。分生孢子頂生或側(cè)生，單細胞，無色，與自然寄主上產(chǎn)生的分生孢子形狀相??同，（４．２？５＿５）ｐｍｘ（ｌ．ｌ？２．１）叫ｉ（ｎ＝５０）（圖２－３：ｆ）。分生孢子２４ｈ左右開始萌發(fā)，從兩頭分??別長出芽管（圖２－３：?ｈ）。ＰＤ液體培養(yǎng)基２５°Ｃ搖培３？４?ｄ后搖培液變渾濁，鏡檢發(fā)現(xiàn)菌絲??上開始分枝并產(chǎn)生分生孢子，產(chǎn)孢細胞瓶梗樣，７?ｄ后鏡檢，４００倍鏡下一個視野中孢子??超過２００個，但菌絲量很少，整個視野中幾乎全是孢子。??根據(jù)病原菌的形態(tài)特征和培養(yǎng)特性初步鑒定該菌為樹錦雞子座叢赤殼菌??｛Ｓｔｒｏｍａｔｏｎｅｃｔｒｉａ?ｃａｒａｇａｎａｅ）?〇??＿１１八??－?ｖｙ??＿??圖２－３樹錦雞子座叢赤殼菌（＆??Ｆｉｇ．２－３?Ｓｔｒｏｍａｔｏｎｅｃｔｒｉａ?ｃａｒａｇａｎａｅ?（Ｈｏｈｎ．）?Ｊａｋｌｉｔｓｃｈ?＆?Ｖｏｇｌｍａｙｒ．??ａ、ｂ．分生孢子器；ｃ．分生孢子器切片；ｄ、ｅ．分生孢子器中產(chǎn)生的分生孢子梗（標本Ｓｃ－１）；?ｆ．菌絲??上產(chǎn)生的分生孢子和分生孢子梗；ｇ．分生孢子；ｈ．萌發(fā)的孢子；ｉ．菌落形態(tài)特征（ＰＤＡ培養(yǎng)基）。??對比該菌原始資料［２８］，研究標本的形態(tài)特征與原始描述基本相同。在原始描述中該??菌的無性型在自然寄主上產(chǎn)生的子座大小為０．３？０．９?ｍｍ

樹錦雞兒枯枝病病原菌Ｓ１的序列在ＧｅｎＢａｎｋ上進行了注冊，菌株號為ＭＧ１９０３４５。并??用菌株Ｓ１與ＢＬＡＳＴ結(jié)果中的近緣菌株構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹，結(jié)果表明Ｓ１與菌株５：??在同一分支上，親緣關(guān)系最近，可信度為１００（圖２－３）。??８４??ＩｊｕｈｖａｃｏｎｒｎｏｓｐｏｎｉＫＹ６Ｑ７５３９．１）??９４１??????Ｉｊｕｈｙａ?／？？ｒ／／？（ＫＹ６０７５４３－１）???ｉｊｕｈｙａ?ｖｉｔｅｉｉｉｎａ｛?ＫＹ６０７５３１．５???ｐ?Ｓｌ（ＭＣｆ?１９０３４５）????＾?＾?Ｓｔｒｏｍａｔｏｍｃｉｒｋｉ?ｃａｒａｇａｎａ＾?ＩＱ?１?１２２?８８＊?ｌ｜????Ｎｅｃｔｒｉａｃｅｉｅ?ｓｐ＊?（ＫＲ５２７Ｉ４８．１）??７５??Ｎｅｃｔｒｉａ?／＞￡ｆ／￡ｒｍ￡？＾＜ＫＲ９０９２０７．１）??９３?Ｈ?ｖｐｏｃｒｅａｋｓｓｐ．?＜?ＨＱ３２８０２６．１）??Ｂｋｍｅｃｔｒｉａ?ｏｃｈｒｏｋｕｃａ（ＥＸＷ３５５Ｓ，?Ｉ）??＼?１??圖２－３?ＳＩ菌株與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中的近緣菌株的系統(tǒng)發(fā)育樹??Ｆｉｇ．２－３?Ｐｈｙｌｏｇｅｎｅｔｉｃ?ｔｒｅｅ?ｏｆ?ｓｔｒａｉｎ?ＳＩ??２．４本章小結(jié)??本章試驗通過對樹錦雞兒枯枝病野生標本進行切片觀察并分離得到活體菌株ｓｉ，??根據(jù)柯赫氏法則進行接種和再分離確定了病原菌。結(jié)合對該菌株的培養(yǎng)特性、形態(tài)學鑒??定及ｒＤＮＡＩＴＳ序列分析鑒定此菌為樹錦雞子座叢赤殼菌（Ｓ．?ｃｆｌｒａｇｍｗ）。??致病性試驗則表明該病在無傷接種和劃傷接種的枝條上未產(chǎn)生明顯發(fā)病癥狀，只有??燒傷接種可大量發(fā)病

【參考文獻】：
期刊論文
[1]小葉錦雞兒化學成分及藥理作用研究進展[J]. 賀程,樸惠順.  延邊大學醫(yī)學學報. 2015(02)
[2]沈陽地區(qū)油松枝枯病病原菌的鑒定[J]. 王月,高國平,張瑤琪,周陽,王允,祁金玉.  西北林學院學報. 2015(03)
[3]青藏高原20種灌木抗旱形態(tài)和生理特征[J]. 邱權(quán),潘昕,李吉躍,王軍輝,馬建偉,杜坤.  植物生態(tài)學報. 2014(06)
[4]南方紅豆杉內(nèi)生真菌的分離鑒定及其細胞毒活性研究[J]. 張慶波,陳玉嬋,李浩華,潘清靈,王磊,李冬利,陶美華,章衛(wèi)民.  生物技術(shù)通報. 2013(01)
[5]錦雞兒屬植物化學成分及藥理活性研究新進展[J]. 杜慶波,蔡紅.  宿州學院學報. 2012(11)
[6]植物病害生物防治概述[J]. 李凱,袁鶴.  山西農(nóng)業(yè)科學. 2012(07)
[7]樹錦雞兒、檸條錦雞兒、小葉錦雞兒和鷹嘴豆干旱適應能力比較[J]. 方向文,李鳳民,張海娜,蔣志榮.  生態(tài)學報. 2011(09)
[8]一種適用于多數(shù)植物病原真菌的單孢分離方法[J]. 邱小燕,湯智鵬,張敏,荊海瑜.  安徽農(nóng)業(yè)科學. 2011(09)
[9]我國植物病害生物防治的現(xiàn)狀及發(fā)展策略[J]. 邱德文.  植物保護. 2010(04)
[10]我國害蟲化學防治現(xiàn)狀與發(fā)展策略[J]. 高希武.  植物保護. 2010(04)

博士論文
[1]南方紅豆杉內(nèi)生真菌多樣性、次生代謝產(chǎn)物及其與宿主的相關(guān)性研究[D]. 吳令上.第二軍醫(yī)大學 2012

碩士論文
[1]錦雞兒屬響應干旱脅迫的形態(tài)適應特征和生理機制的研究[D]. 周萌.蘭州大學 2016
[2]小葉錦雞兒化學成分及抗癌活性初步研究[D]. 賀程.延邊大學 2015
[3]水杉赤枯病發(fā)生規(guī)律及防治技術(shù)研究[D]. 匙明強.南京林業(yè)大學 2012
[4]檸條籽化學成分及生物活性研究[D]. 金桂林.第二軍醫(yī)大學 2011



本文編號：3609873