發(fā)布時(shí)間：2022-01-24 02:19

　　益生菌在畜禽養(yǎng)殖業(yè)中有著廣泛應(yīng)用,而在特種養(yǎng)殖動(dòng)物中,特別是蛇類(lèi)養(yǎng)殖中鮮見(jiàn)研究報(bào)道。為了探究益生菌對(duì)蛇的影響,本課題篩選出益生菌,以人工養(yǎng)殖的王錦蛇為研究對(duì)象,進(jìn)行了為期42天的喂養(yǎng)試驗(yàn),為益生菌在蛇類(lèi)養(yǎng)殖業(yè)中的推廣應(yīng)用奠定理論基礎(chǔ)。從4株益生菌中挑選到1株經(jīng)異常毒性檢查、安全性檢查、消化液耐受和藥敏試驗(yàn)符合要求的益生菌,以表型特征檢查和16s rDNA序列測(cè)定的方法鑒定細(xì)菌。采用單因素變量法和正交試驗(yàn)優(yōu)化培養(yǎng)獲得益生菌液,按1mL/100g體重的劑量給試驗(yàn)蛇灌服108cfu/mL的益生菌液,分別采集糞樣和血樣,進(jìn)行腸道菌群、蛋白質(zhì)、白細(xì)胞等生理生化指標(biāo)測(cè)定,結(jié)果如下:1.篩選到的符合要求的益生菌為地衣芽孢桿菌。2.地衣芽孢桿菌優(yōu)化培養(yǎng)基組方為蛋白胨10g/L、牛肉膏15g/L、酵母粉3g/L、磷酸二氫鉀2g/L,最佳培養(yǎng)條件為37℃,pH7.2,搖床轉(zhuǎn)速200rpm,培養(yǎng)10h。3.灌服了益生菌的試驗(yàn)組王錦蛇的腸道大腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌含量比對(duì)照組低,腸道糞腸球菌含量比對(duì)照組高,糞便蛋白質(zhì)的含量比對(duì)照組低;與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組王錦蛇血液中總膽紅素、丙二醛的含量、谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性均降低... 

【文章來(lái)源】：廣西大學(xué)廣西壯族自治區(qū) 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：85 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－１細(xì)菌鑒定結(jié)果??Ｆｉｕｒｅ?２－１?Ｂａｃｔｅｒｉａｌ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｒｅｓｕｌｔｓ??

益生菌的篩選及其對(duì)王錦蛇影響的初步研究??②號(hào)菌ＰＣＲ產(chǎn)物經(jīng)電泳后在凝膠成像系統(tǒng)觀察發(fā)現(xiàn)，在１５００ｂｐ處有明顯的??條帶，如圖２－２所示，菌株的１６ＳｒＲＮＡ基因相關(guān)序列見(jiàn)附錄。將測(cè)序得到的序??列登錄ＮＣＢＩ進(jìn)行同源性比對(duì)，發(fā)現(xiàn)②號(hào)菌為地衣芽孢桿菌，與多株己經(jīng)鑒定的??地衣芽孢桿菌（登陸號(hào)ＮＲ１１８９９６．１，ＮＲ０７４９２３．１?和ＮＲ１１６０２３．１）同源性達(dá)到９９％。??圖２－２②號(hào)菌ＰＣＲ產(chǎn)物電泳圖??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ?ｍａｐ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔ?ｏｆ?Ｎｏ．?２??在圖２－２中Ｍ為Ｍａｒｋｅｒ２０００，２是②號(hào)菌，陰為空白對(duì)照??Ｉｎ?Ｆｉｇｕｒｅ?２－２，?Ｍ?ｉｓ?Ｍａｒｋｅｒ２０００，?２?ｉｓ?Ｎｏ．?２，?ａｎｄ?ｎｅｇａｔｉｖｅ?ｉｓ?ａ?ｂｌａｎｋ?ｃｏｎｔｒｏｌ．??２．５分析與討論??本試驗(yàn)所用的４株細(xì)菌雖然是在某益生菌產(chǎn)品上分離得到的優(yōu)勢(shì)菌株，但產(chǎn)??品是否被污染以及菌株在保存過(guò)程中是否出現(xiàn)變異具備了毒性還不得而知。李月??丹等人研究發(fā)現(xiàn)，往小鼠腹腔內(nèi)注射蠟樣芽胞桿菌，雖未引起小鼠死亡，但??是可以從肺臟和腦組織中分離到蠟樣芽孢桿菌，說(shuō)明這株細(xì)菌存有安全隱患；陳??懷濤［１１２］發(fā)現(xiàn)地衣芽孢桿菌也存在安全問(wèn)題

３．４結(jié)果??３．４．１地衣芽孢桿菌最適無(wú)機(jī)鹽??如圖３－１所示，益生菌在添加了?４號(hào)無(wú)機(jī)鹽即磷酸二氫鉀的培養(yǎng)基發(fā)酵６ｈ??后菌液〇Ｄ６（Ｍ）最大為０．６６，添加無(wú)機(jī)鹽為氯化鈉、氯化鈣和硫酸鎂的菌液ＯＤ＿??均小于０．６６，說(shuō)明這株地衣芽孢桿菌的最適無(wú)機(jī)鹽為鱗酸二氫鉀。??０．７０??０．６０?ｔ〇．６６??〇５〇?ｍｓ＾?０５５??０．５１??雙?０４０?ｍ?＾０－４３?爨：－）ｍｗ??－?０．４０??Ｉ。３。圓圓繼Ｐ．丨隱到■菌液①值??Ｈ?ＨＩ?Ｂ??Ｈｉ?ＩＨ??〇．〇〇??氯化鈉?氯化鈣?硫酸鎂磷酸二氫鉀氪化鉀??無(wú)機(jī)鹽種類(lèi)??圖３－１無(wú)機(jī)鹽對(duì)地衣芽孢桿菌生長(zhǎng)的影??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１?Ｅｆｆｅｃｔ?ｏｆ?ｉｎｏｒｇａｎｉｃ?ｓａｌｔｓ?ｏｎ?ｔｈｅ?ｇｒｏｗｔｈ?ｏｆ?Ｂ．Ｌ??３．４．２地衣芽孢桿菌體外培養(yǎng)最適條件??從圖３－２可以看出，在一定范圍內(nèi)隨著轉(zhuǎn)速的增加，菌液的ＯＤ６（Ｗ值也隨著??增加；當(dāng)搖床的轉(zhuǎn)速為２００ｒｐｍ時(shí)ＯＤ６ＱＱ值達(dá)到最大，隨著轉(zhuǎn)速的再增加菌液的??〇Ｄ６（Ｋ）值呈現(xiàn)下降趨勢(shì)；所以該菌體外培養(yǎng)的最佳轉(zhuǎn)速為２００ｒｐｍ。??２

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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[8]產(chǎn)共軛亞油酸乳酸菌對(duì)DSS誘導(dǎo)小鼠結(jié)腸炎的改善作用[D]. 王俊通.江南大學(xué) 2016
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