鱗翅目昆蟲(chóng)二化螟Chilo suppressalis（Walker）是水稻上主要的蛀莖害蟲(chóng),給我國(guó)水稻生產(chǎn)造成了巨大的損失。轉(zhuǎn)Bt基因水稻的研發(fā)為水稻鱗翅目害蟲(chóng)防治帶來(lái)了新的策略,但也帶來(lái)了靶標(biāo)害蟲(chóng)潛在的抗性風(fēng)險(xiǎn)等問(wèn)題。二化螟抗性問(wèn)題是轉(zhuǎn)基因水稻生態(tài)安全評(píng)價(jià)重點(diǎn)關(guān)注的內(nèi)容之一,也是制約轉(zhuǎn)基因水稻可持續(xù)應(yīng)用的關(guān)鍵因素。目前,轉(zhuǎn)Bt基因水稻靶標(biāo)害蟲(chóng)二化螟對(duì)Bt殺蟲(chóng)蛋白的抗性發(fā)展及抗性機(jī)理尚不明確。通過(guò)室內(nèi)篩選建立二化螟B(niǎo)t抗性品系,研究其抗性演化規(guī)律,探究二化螟抗性產(chǎn)生后適合度變化及其抗性產(chǎn)生的生化機(jī)理,可為靶標(biāo)害蟲(chóng)的抗性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)和抗性治理提供科學(xué)數(shù)據(jù)和理論依據(jù),具有重要研究意義。目前,實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)建立了成熟的二化螟室內(nèi)飼養(yǎng)技術(shù),并利用Cry1C殺蟲(chóng)蛋白對(duì)二化螟敏感品系進(jìn)行繼代汰選,獲得了 Cry1C耐受品系。在此基礎(chǔ)上,通過(guò)研究二化螟Cry1C耐受和敏感品系在不含Bt殺蟲(chóng)蛋白的人工飼料上的適合度差異;并使用cry1C+cry14b、crylAb、cry1C三種轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻及親本MH63水稻離體葉片飼喂二化螟兩個(gè)品系,比較兩品系在轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻上的適合度差異;利用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（ELI... 

【文章來(lái)源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２技術(shù)路線圖??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏａｄｍａｐ??

經(jīng)過(guò)連續(xù)４１代汰選，二化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系對(duì)ＣｒｙｌＣ殺蟲(chóng)蛋白的ＬＤ５０從最初??的１．８５ｕｇ／ｇ上升到１６．６１ｕｇ／ｇ，相對(duì)于敏感品系，抗性倍數(shù)達(dá)到了?４２．５９倍（表２－１）。??從圖２－１可知，在１１代之前，二化螟對(duì)ＣｒｙｌＣ蛋白抗性發(fā)展緩慢，汰選１１代后，二??化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系的抗性上升速度加快。??表２－１二化娛ＣｉｙｌＣ耐受品系抗性演化??Ｔａｂｌｅ２－１?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｃ．?ｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ?ＣｒｙｌＣ?ｔｏｌｅｒａｎｔ?ｓｔｒａｉｎ??汰選世代?Ｔｎ?ｒｑ，〇／Ｆｎ?斜鑾?抗性倍數(shù)??Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ?：系?｝?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ??ｓｅｌｅｃｔｅｄ?Ｓ＿Ｓ?獅社兕?ｒａｔｉｏ?（ＲＲ）??１６??

水稻（Ｐ＜０．０５），到成熟期，單價(jià)水稻ＣｒｙｌＣ蛋白表達(dá)量上升較快，顯??著高于雙價(jià)水稻（ＰＯ．０５）。??由圖３－２－Ｂ可知，ＣｒｙｌＡｂ蛋白在必水稻秧苗期表達(dá)量最高，為３．７５?ｕｇ／ｇ，??分蘗期和拔節(jié)期表達(dá)量略有下降，分別為３．４５?ｕｇ／ｇ、３．４６?ｕｇ／ｇ。水稻拔節(jié)之后ＣｒｙｌＡｂ??表達(dá)量下降幅度增大，成熟期表達(dá)量?jī)H為２．２５ｕｇ／ｇ。在水稻中，ＣｒｙｌＡｂ??蛋白表達(dá)量逐漸降低，由秧苗期的５?ｕｇ／ｇ下降到成熟期的１．３?ｕｇ／ｇ。就相同生育期單、??雙價(jià)抗蟲(chóng)水稻中表達(dá)量相比，在秧苗期，水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達(dá)量顯著??高于水稻（Ｐ＜０．０５）。在水稻分蘗期，單、雙價(jià)抗蟲(chóng)水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達(dá)量??差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。分蘗期過(guò)后，雙價(jià)抗蟲(chóng)水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達(dá)量大幅下降，??拔節(jié)期、揚(yáng)花期和成熟期這３個(gè)生育期的ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達(dá)量顯著低于單價(jià)水稻??（Ｐ＜０．０５）。??Ａ?＿ｃｘｙｉＣａ?水箱??１＇２?１?

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3599593