鱗翅目昆蟲二化螟Chilo suppressalis（Walker）是水稻上主要的蛀莖害蟲,給我國水稻生產造成了巨大的損失。轉Bt基因水稻的研發(fā)為水稻鱗翅目害蟲防治帶來了新的策略,但也帶來了靶標害蟲潛在的抗性風險等問題。二化螟抗性問題是轉基因水稻生態(tài)安全評價重點關注的內容之一,也是制約轉基因水稻可持續(xù)應用的關鍵因素。目前,轉Bt基因水稻靶標害蟲二化螟對Bt殺蟲蛋白的抗性發(fā)展及抗性機理尚不明確。通過室內篩選建立二化螟Bt抗性品系,研究其抗性演化規(guī)律,探究二化螟抗性產生后適合度變化及其抗性產生的生化機理,可為靶標害蟲的抗性風險評價和抗性治理提供科學數據和理論依據,具有重要研究意義。目前,實驗室已經建立了成熟的二化螟室內飼養(yǎng)技術,并利用Cry1C殺蟲蛋白對二化螟敏感品系進行繼代汰選,獲得了 Cry1C耐受品系。在此基礎上,通過研究二化螟Cry1C耐受和敏感品系在不含Bt殺蟲蛋白的人工飼料上的適合度差異;并使用cry1C+cry14b、crylAb、cry1C三種轉基因抗蟲水稻及親本MH63水稻離體葉片飼喂二化螟兩個品系,比較兩品系在轉基因抗蟲水稻上的適合度差異;利用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELI... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：75 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－２技術路線圖??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｈｅ?ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ?ｒｏａｄｍａｐ??

經過連續(xù)４１代汰選，二化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系對ＣｒｙｌＣ殺蟲蛋白的ＬＤ５０從最初??的１．８５ｕｇ／ｇ上升到１６．６１ｕｇ／ｇ，相對于敏感品系，抗性倍數達到了?４２．５９倍（表２－１）。??從圖２－１可知，在１１代之前，二化螟對ＣｒｙｌＣ蛋白抗性發(fā)展緩慢，汰選１１代后，二??化螟ＣｒｙｌＣ耐受品系的抗性上升速度加快。??表２－１二化娛ＣｉｙｌＣ耐受品系抗性演化??Ｔａｂｌｅ２－１?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ?ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ?ｏｆ?Ｃ．?ｓｕｐｐｒｅｓｓａｌｉｓ?ＣｒｙｌＣ?ｔｏｌｅｒａｎｔ?ｓｔｒａｉｎ??汰選世代?Ｔｎ?ｒｑ，〇／Ｆｎ?斜鑾?抗性倍數??Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓ?：系?｝?Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ??ｓｅｌｅｃｔｅｄ?Ｓ＿Ｓ?獅社兕?ｒａｔｉｏ?（ＲＲ）??１６??

水稻（Ｐ＜０．０５），到成熟期，單價水稻ＣｒｙｌＣ蛋白表達量上升較快，顯??著高于雙價水稻（ＰＯ．０５）。??由圖３－２－Ｂ可知，ＣｒｙｌＡｂ蛋白在必水稻秧苗期表達量最高，為３．７５?ｕｇ／ｇ，??分蘗期和拔節(jié)期表達量略有下降，分別為３．４５?ｕｇ／ｇ、３．４６?ｕｇ／ｇ。水稻拔節(jié)之后ＣｒｙｌＡｂ??表達量下降幅度增大，成熟期表達量僅為２．２５ｕｇ／ｇ。在水稻中，ＣｒｙｌＡｂ??蛋白表達量逐漸降低，由秧苗期的５?ｕｇ／ｇ下降到成熟期的１．３?ｕｇ／ｇ。就相同生育期單、??雙價抗蟲水稻中表達量相比，在秧苗期，水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達量顯著??高于水稻（Ｐ＜０．０５）。在水稻分蘗期，單、雙價抗蟲水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達量??差異不顯著（Ｐ＞０．０５）。分蘗期過后，雙價抗蟲水稻ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達量大幅下降，??拔節(jié)期、揚花期和成熟期這３個生育期的ＣｒｙｌＡｂ蛋白表達量顯著低于單價水稻??（Ｐ＜０．０５）。??Ａ?＿ｃｘｙｉＣａ?水箱??１＇２?１?

【參考文獻】：
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本文編號：3599593