蝗綠僵菌（Metarhizium acridum）作為一種昆蟲(chóng)病原真菌,以孢子作為主要侵染單元感染蝗蟲(chóng),因此研究其產(chǎn)孢機(jī)制對(duì)生物農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)與應(yīng)用具有重要作用。絲狀真菌的產(chǎn)孢方式包括:正常產(chǎn)孢和微循環(huán)產(chǎn)孢,正常產(chǎn)孢是絲狀真菌最普遍的產(chǎn)孢方式,其產(chǎn)孢機(jī)制已闡明清楚。微循環(huán)產(chǎn)孢是真菌繞過(guò)菌絲階段的一種無(wú)性產(chǎn)孢方式,蝗綠僵菌可以誘導(dǎo)進(jìn)行微循環(huán)產(chǎn)孢,與正常產(chǎn)孢相比具有產(chǎn)孢速度快、產(chǎn)孢量大、孢子大小更為均一等優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái),關(guān)于環(huán)境因素及相關(guān)基因?qū)ξ⒀h(huán)產(chǎn)孢方式的影響進(jìn)行了研究,但相關(guān)基因之間的調(diào)控關(guān)系以及調(diào)控機(jī)制尚未報(bào)道。因此,本文從以下兩方面進(jìn)行研究:1.蝗綠僵菌微循環(huán)產(chǎn)孢相關(guān)基因之間調(diào)控關(guān)系的研究本實(shí)驗(yàn)室前期篩選了微循環(huán)產(chǎn)孢培養(yǎng)基（SYA）,構(gòu)建了蝗綠僵菌微循環(huán)產(chǎn)孢時(shí)期的均一化全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)和富集微循環(huán)產(chǎn)孢相關(guān)基因的差減文庫(kù),鑒定出7個(gè)基因（MaH1、MaCreA、MaAGA、MaPPT5、MaCpp、MaMmc、MaRcp）參與蝗綠僵菌正常產(chǎn)孢與微循環(huán)產(chǎn)孢的相互轉(zhuǎn)換,并篩選得到敲除菌株。本研究分別在正常產(chǎn)孢培養(yǎng)基（1/4 SDAY）和微循環(huán)產(chǎn)孢培養(yǎng)基（SYA）上培養(yǎng)并觀察各敲除菌株與WT菌... 

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【部分圖文】：

MaH1、MaPPT5、MaRcp對(duì)蝗綠僵菌產(chǎn)孢方式的影響

圖 2.3 各敲除菌株中的相對(duì)表達(dá)量分析（A）在 ΔMaPPT5（B）ΔMaRcp（C）ΔMaH1 菌株中各基因表達(dá)量的倍數(shù)變化。所有試驗(yàn)重復(fù)三次。**：差異極顯著，p < 0.01，*：差異顯著，p < 0.05。Fig.2.3 Fold changes of relative expression in mutant strains. (A) The Fold change inΔMaPPT5 (B) in ΔMaH1 and (C) in ΔMaRcp. Each trial repeated three times. Error bars arestandard deviations of three trials. **: extremely significant difference, p < 0.01, *:significantdifference, p < 0.05.② MaCreA、Macpp、MaAGA、MaMmc 之間的相互調(diào)控關(guān)系在 SYA 培養(yǎng)基上（Fig.2.2），ΔMaCreA、ΔMaCpp、ΔMaMmc、ΔMaAGA 菌株與 WT 菌株的產(chǎn)孢方式出現(xiàn)差異，WT 為微循環(huán)產(chǎn)孢，在 12h 開(kāi)始長(zhǎng)出產(chǎn)孢器官，而 ΔMacpp、ΔMaMmc 菌株為正常產(chǎn)孢，ΔMaCreA 長(zhǎng)有長(zhǎng)菌絲且不產(chǎn)孢，因此收集 WT、ΔMacpp、ΔMaMmc 菌株 12 h 時(shí)的孢子或菌絲，提取 RNA。ΔMaAGA 菌株在前期產(chǎn)孢方式與 WT 一致，均為微循環(huán)產(chǎn)孢，在 60 h 時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)菌絲，與WT 產(chǎn)孢方式開(kāi)始出現(xiàn)差異，因此收集 ΔMaAGA 菌株 60 h 時(shí)的孢子或菌絲，提取RNA。

18圖 2.4 各敲除菌株中的相對(duì)表達(dá)量分析）在 ΔMaCreA（B）ΔMaCpp（C）ΔMaAGA（D）ΔMaMmc 菌株中各基因表達(dá)量的倍數(shù)變化。所有試驗(yàn)重復(fù)三次。**：差異極顯著，p < 0.01；*：差異顯著，p < 0.05。g.2.4 Fold changes of relative expression in mutant strains. (A) The Fold change in ΔMaCreA(B) ΔMaCpp (C) in ΔMaAGA and（D）in ΔMaMmc. Each trial repeated three times. Error bars arestandard deviations of three trials . **: extremely significant difference, p < 0.01, *: significantdifference, p < 0.05.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)的蝗災(zāi)及防控對(duì)策[J]. 任炳忠,張雪.  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2013(02)
[2]生物農(nóng)藥的應(yīng)用現(xiàn)狀及前景展望[J]. 馬俊義,李盡哲,葉兆偉.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(04)
[3]國(guó)內(nèi)外蝗害治理技術(shù)現(xiàn)狀與展望[J]. 張龍.  應(yīng)用昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2011(04)
[4]綠僵菌微循環(huán)產(chǎn)孢基因Pyk的克隆及RNA干擾分析[J]. 徐飛,彭國(guó)雄,夏玉先.  微生物學(xué)通報(bào). 2011(06)
[5]金龜子綠僵菌致病的分子機(jī)理研究進(jìn)展[J]. 劉穎,殷從松.  貴州農(nóng)業(yè)科學(xué). 2010(10)
[6]綠僵菌的研究進(jìn)展[J]. 代鵬,宋妍,許天委,謝玉平,黃俊生.  熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué). 2005(02)
[7]飛蝗研究進(jìn)展[J]. 李春選,馬恩波.  昆蟲(chóng)知識(shí). 2003(01)
[8]蝗蟲(chóng)與蝗災(zāi)[J]. 林森.  科技致富向?qū)? 2002(09)
[9]國(guó)際蝗蟲(chóng)災(zāi)害的防治策略和技術(shù) :現(xiàn)狀與展望[J]. 郝樹(shù)廣,秦啟聯(lián),王正軍,康樂(lè),李鴻昌,陳永林,李典謨.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2002(04)
[10]我國(guó)蝗蟲(chóng)暴發(fā)成災(zāi)的現(xiàn)狀及其持續(xù)控制對(duì)策[J]. 王正軍,秦啟聯(lián),郝樹(shù)廣,陳永林,李鴻昌,李典謨.  昆蟲(chóng)知識(shí). 2002(03)



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