發(fā)布時(shí)間：2021-12-29 14:20

　　由于蜜蜂很容易將感官線索和糖水獎(jiǎng)勵(lì)聯(lián)系起來并產(chǎn)生記憶,這使其成為研究嗅覺-味覺學(xué)習(xí)的有力模型。但在蜜蜂中涉及味覺厭惡性學(xué)習(xí)的研究并不多,可能是因?yàn)闆]有建立良好的厭惡學(xué)習(xí)方法,因此本課題嘗試以蜜蜂為研究對(duì)象建立一個(gè)新型的條件性味覺厭惡學(xué)習(xí)模型。條件性味覺厭惡學(xué)習(xí)是動(dòng)物將偏愛的食物和引起內(nèi)部疾病的刺激配對(duì),從而引起動(dòng)物對(duì)喜愛的食物偏愛性降低的過程。在無脊柱動(dòng)物中,厭惡性學(xué)習(xí)如何影響關(guān)聯(lián)記憶,尤其是條件性刺激關(guān)聯(lián)的味覺記憶,尚不清楚。本課題主要研究蜜蜂的條件性味覺厭惡學(xué)習(xí)對(duì)嗅覺關(guān)聯(lián)記憶的影響及其神經(jīng)機(jī)制。首先,我們運(yùn)用巴普洛夫條件性嗅覺伸喙反應(yīng),訓(xùn)練蜜蜂將氣味（條件性刺激,CS）和果糖溶液（非條件性刺激,US）;然后蜜蜂進(jìn)行條件性味覺厭惡學(xué)習(xí),蜜蜂將觸角獲得的果糖刺激和采食奎寧溶液的消化后不適進(jìn)行配對(duì)或者不配對(duì)。結(jié)果表明,在嗅覺條件性實(shí)驗(yàn)結(jié)束23 h以后,將果糖刺激與奎寧消化后不適配對(duì)的蜜蜂降低了對(duì)果糖的應(yīng)答,并且也降低了蜜蜂對(duì)氣體的特異性記憶。此外,在條件性味覺厭惡學(xué)習(xí)結(jié)束以后,通過藥理學(xué)實(shí)驗(yàn),向蜜蜂的單眼注射了多巴胺受體阻斷劑和5-羥色胺（5-HT）受體阻斷劑。結(jié)果發(fā)現(xiàn)注射高劑量5-羥色... 

【文章來源】：福建農(nóng)林大學(xué)福建省

【文章頁(yè)數(shù)】：65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

被固定在塑料管中的蜜蜂個(gè)體Fig2-1Individualbeesharnessedinplastictubes

蜜蜂的新型厭惡性學(xué)習(xí)：通過條件性味覺厭惡減退氣味記憶13圖2-2實(shí)驗(yàn)流程圖Fig2-2Experimentalschedule.注：該部分實(shí)驗(yàn)開始于蜜蜂個(gè)體被固定后。蜜蜂首先被飼喂3μL1.5M的蔗糖溶液（F1）Notice:Theexperimentstartedwhenthebeeswerecapturedandharnessedinindividualtubes.theywerethenfedwith3μLof1.5Msucrosesolution(F1)如圖2-2所示，首先給被固定的蜜蜂飼喂3μL1.5M的蔗糖溶液，暗處理150min，以平衡所有蜜蜂的能量并保證蜜蜂有足夠的時(shí)間適應(yīng)環(huán)境。隨后將蜜蜂分為兩組，使用10μL移液槍給其中一組蜜蜂飼喂蒸餾水（n=44），而另一組蜜蜂飼喂奎寧（n=60），每次5μL，重復(fù)操作4次。前人結(jié)果表明在處于饑餓狀態(tài)下的蜜蜂受到蒸餾水或其它厭惡性物質(zhì)刺激時(shí)會(huì)主動(dòng)伸喙，并且能夠采食20μL溶液[48]。飼喂后，分別在第30min、60min、90min、120min、150min、180min、210min、240min時(shí)記錄每一組死亡蜜蜂的數(shù)量。飼喂過程中，蜜蜂在消化蒸餾水或奎寧后其行為沒有顯著差異。2.2.3數(shù)據(jù)處理和分析參考Bewick文獻(xiàn)中的生存曲線制作和分析方法[61]，本實(shí)驗(yàn)的蜜蜂生存率分析采用censored觀察法，記錄蜜蜂個(gè)體是否在觀察的時(shí)間點(diǎn)存活。根據(jù)Kaplan-Meier法計(jì)算每個(gè)觀察點(diǎn)的蜜蜂生存率，并建立Kaplan-Meier生存參數(shù)，定義在K時(shí)的生存率。用軟件Statistica13.0中的LogRank檢測(cè)來對(duì)比兩組差異（蒸餾水組和奎寧組）。在只比較兩個(gè)樣本的情況下，采用LogRank檢測(cè)計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)分?jǐn)?shù)，該標(biāo)準(zhǔn)分?jǐn)?shù)符合標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)（卡方）分布。

蜜蜂的新型厭惡性學(xué)習(xí)：通過條件性味覺厭惡減退氣味記憶15同理可得，蒸餾水組在各個(gè)觀察點(diǎn)的生存率第一階段（30min）0.954、第二階段（60min）0.818、第三階段（90min）0.681、第四階段（120min）0.613、第五階段（150min）0.545、第六階段（180min）0.477、第七階段（210min）0.454、第八階段（240min）0.431。再將獲得的存活率通過SigmaPlot10繪制成時(shí)間-生存率曲線，獲得生存曲線，見圖2-3。然后再使用Statistica13.0中的LRT對(duì)比兩組數(shù)據(jù)，進(jìn)行t檢驗(yàn)[61]，獲得Teststatis=2.21612P=0.02668。圖2-3飼喂蒸餾水和10mM奎寧后的蜜蜂Kaplan–Meier生存曲線Fig2-3Kaplan–Meiercurvesofsurvivalforharnessedhoneybeesfedwithdistilledwaterand10mMquininesolution.注：在被飼喂以后的4h內(nèi)，藍(lán)線代表的是消化蒸餾水(n=44)的生存曲線，紅線代表的是消化10mM奎寧(n=60)的生存曲線，消化10mM的奎寧溶液比消化蒸餾水有更高的致死率。Notice:Thebluecurveandtheredcurverepresentthedistillwater-fedgroupand10mMquinine-fedgrouprespectively,andthegroupofhoneybeeshavingingesteda10mMquininesolution(n=44)exhibitedasignificantdecreaseinsurvivalcomparedtothegroupfedwithdistilledwater(n=60)duringthe4hpost-ingestionperiod.見圖2-3，在飼喂奎寧或蒸餾水的4h內(nèi)，根據(jù)蜜蜂的存活率繪制的Kaplan-Meier生存曲線[61]。在消化的4h內(nèi)，記錄每組蜜蜂每30min的死亡數(shù)量，并根據(jù)獲得的數(shù)據(jù)計(jì)算生存率，然后繪制了生存曲線。結(jié)果表明，兩組蜜蜂消化各自獲取的溶液，兩組蜜蜂的生存率存在顯著差異（LRT:Z=2.22,df:1,P=0.027，

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]多巴胺及其受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用研究進(jìn)展[J]. 萬朋,金清華.  武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2017(01)

碩士論文
[1]5-羥色胺對(duì)蟋蟀視覺學(xué)習(xí)記憶的影響研究[D]. 郭瑞.沈陽(yáng)師范大學(xué) 2014
[2]東方蜜蜂與西方蜜蜂學(xué)習(xí)記憶比較及蜜蜂學(xué)習(xí)記憶相關(guān)分子機(jī)理分析[D]. 秦秋紅.江西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



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