十字花科蔬菜是人們?nèi)粘Ｉ钪邢M(fèi)和需求的主要蔬菜種類之一。由于其生長周期短,茬口密集、周年生產(chǎn)導(dǎo)致土壤連作障礙問題不斷出現(xiàn)。近年來,絲核菌（Rhizoctonia spp.）引起的根腐病成為限制其生產(chǎn)的主要因素之一,導(dǎo)致蔬菜產(chǎn)量降低,嚴(yán)重時(shí)可絕收。目前,國內(nèi)尚未登記過防治十字花科蔬菜絲核菌根腐病的藥劑,這就使得田間防治更為困難。本文綜合了形態(tài)學(xué)鑒定、致病性測(cè)定和分子生物學(xué)方法,對(duì)十字花科蔬菜絲核菌根腐病進(jìn)行了病原生物學(xué)、病原菌的檢測(cè)技術(shù)以及防治藥劑的研究。主要結(jié)果如下:1.明確了我國部分地區(qū)十字花科蔬菜絲核菌包括4個(gè)融合群,且存在生物學(xué)特征差異。本研究在河北、天津、北京、內(nèi)蒙古、甘肅、江蘇、山西等16個(gè)省份31個(gè)地區(qū)的十字花科蔬菜主產(chǎn)區(qū)進(jìn)行了病樣調(diào)查和采集,共分離保存278株絲核菌,寄主主要有白菜、油菜、芥菜、蘿卜和甘藍(lán)等9種。經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定、致病性測(cè)定和菌株DNA的ITS、TEF-1α序列分析,共鑒定出4個(gè)融合群,分別為AG-2-1、AG-1-IB、AG-4HGII和AG-A,其中AG-2-1的分離頻率最高,占62%。2.建立了立枯絲核菌的多重?zé)晒舛縋CR檢測(cè)技術(shù),可同時(shí)檢測(cè)AG-2... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：78 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

絲核菌菌株在PDA上的形態(tài)特征和菌核分布

絲核菌Fig.2-2HyphalceA

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院碩士學(xué)位論文第二章十字花科蔬菜絲核菌根腐病的病原生物學(xué)研究192.3.2細(xì)胞核數(shù)目測(cè)定和菌絲融合現(xiàn)象細(xì)胞核染色結(jié)果表明，270株待測(cè)菌株菌絲細(xì)胞為多核，每個(gè)細(xì)胞含4～13個(gè)細(xì)胞核（圖2-4）；8株為雙核，每個(gè)菌絲細(xì)胞僅含2個(gè)細(xì)胞核（圖2-5）。選取包含雙核和多核共108個(gè)待測(cè)菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行融合群測(cè)定，結(jié)果顯示，70株待測(cè)菌株與標(biāo)準(zhǔn)菌株AG-2-1完全融合（圖2-6），初步表明該70株菌屬于AG-2-1，同樣的，發(fā)現(xiàn)28株與AG-1-IB完全融合，其余10株與標(biāo)準(zhǔn)菌株完全不融合（圖2-7）。圖2-4菌絲細(xì)胞核數(shù)目200×（標(biāo)尺=40μm）Fig.2-4Nucleusnumbersofhyphalcells200×（Bar=40μm）圖2-5菌絲細(xì)胞核數(shù)目400×（標(biāo)尺=20μm）Fig.2-5Nucleusnumbersofhyphalcells400×（Bar=20μm）圖2-6菌絲融合類型（完全融合）200×（標(biāo)尺=40μm）Fig.2-6Typeofhyphalfusion(completefusion)200×（Bar=40μm）圖2-7菌絲融合類型（完全不融合）400×（標(biāo)尺=20μm）Fig.2-7Typeofhyphalfusion(non-fusion)200×（Bar=20μm）2.3.3菌株融合群的分子生物學(xué)鑒定本研究在所有寄主菌株進(jìn)行了分子生物學(xué)鑒定，利用ITS1/ITS4和TEF-1α序列的PCR擴(kuò)增，分別獲得了約750bp的片段（圖2-8和圖2-9）。將測(cè)序得到的序列提交到Genebank中（登錄號(hào)見附錄B），經(jīng)NCBI進(jìn)行BLAST分析，采用鄰接法構(gòu)建了基于ITS和TEF-1α的系統(tǒng)發(fā)育樹，能夠很好的將不同融合群區(qū)分開。構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹明顯可將4個(gè)融合群劃分為兩大分支，其中分支I包括多核絲核菌AG-2-1（參考菌株為KX468086、KX631356、FJ492102和KJ545577）、AG-4HGII（參考菌株為HQ629867、JX843818和KJ170349）和AG-1-IB（參考菌株為GU585667、

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]基于環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)快速診斷大豆根部主要病害的研究[D]. 陸辰晨.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]應(yīng)用LAMP檢測(cè)技術(shù)快速診斷大豆根莖部真菌病害[D]. 宋必.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015
[2]馬鈴薯黑痣病菌系統(tǒng)發(fā)育分析及融合群快速鑒定[D]. 張春艷.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[3]中國北方馬鈴薯黑痣病菌融合群鑒定及遺傳多樣性分析[D]. 李曉妮.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[4]包菜立枯絲核菌球腐病的病原學(xué)研究[D]. 張麗.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3546993